本发明属于生物技术领域,公开了甘油脱氢酶突变体、产二羟基丙酮的工程菌及其用途。所述的甘油脱氢酶突变体是以氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的甘油脱氢酶为亲本,将亲本第527位突变和/或649位突变。本发明的甘油脱氢酶突变体能提高甘油脱氢酶表达量,本发明还利用构建了过表达上述突变体的工程菌,其能够将甘油高效转化为二羟基丙酮。
本发明公开了一种酯酶突变体基因及该基因表达的蛋白与应用,一种酯酶突变体基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;实验表明,本发明的酯酶突变体基因表达的蛋白能够正确折叠,在大肠杆菌系统能够大量纯化。同时本发明的突变蛋白具有野生型酯酶降解PET的功能,酯酶突变体基因表达的蛋白的热稳定性及催化效率与野生型酯酶相比显著增加。本发明的酯酶突变体基因表达的蛋白在pH为6‑11范围内均具有降解PET的活性。本发明的酯酶突变体基因表达的蛋白在30℃‑70℃具有活性且稳定。具体地,在pH 9.0,温度为50℃时对PET的降解能力与野生型酯酶相比提高了58倍。