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[发明专利]dsRNA的制备方法及其在制备dsRNA标准品中的应用-CN202310099407.3在审
发明人：耿玉杰 -专利权人：武汉瀚海新酶生物科技有限公司
申请日： 2023-02-01 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明提供了一种dsRNA的制备方法及其在制备dsRNA标准品中的应用，涉及生物技术领域。该dsRNA的制备方法包括先经体外转录合成ssRNA，再将反应产物中的体外转录模板降解为单个核苷酸；然后退火形成dsRNA，再使用S1核酸酶降解退火产物中的单链核酸，纯化反应产物得到dsRNA。该制备方法缓解了现有技术中缺少一种制备高纯度dsRNA方法的问题。
dsrna 制备方法及其标准中的应用

[发明专利]一种利用DNA聚合酶和DNA连接酶便捷制备含非天然碱基核酸链的方法及其应用-CN202210346898.2在审
发明人：陈庭坚;白静思;邹金容;曹懿君;吴静;郑鑫倩 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2022-04-02 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明公开一种利用DNA聚合酶和DNA连接酶便捷制备含非天然碱基核酸链的方法及其应用。该方法为将模板链、上游结合链和下游结合链与聚合酶反应缓冲液充分混合得到混合液Ⅰ、变性后，退火；加入非天然核苷三磷酸和DNA聚合酶，得到混合液Ⅱ，孵育，孵育结束后热处理变性聚合酶；将反应液纯化，得到中间混合产物A；将中间混合产物A与ATP、DNA连接酶混合在反应体系中，得到混合液Ⅲ，孵育后纯化，得到中间混合产物B；将中间混合产物B和亲和纯化磁珠混合在缓冲液中；将混合液用缓冲液多次洗涤，并用碱处理分离模板链，得到混合液Ⅳ；洗涤混合液Ⅳ后，加甲酰胺热孵育磁珠，得到混合液Ⅴ；纯化，得到含有非天然碱基的ssDNA。
一种利用 dna 聚合连接酶便捷制备天然碱基核酸方法及其应用

[发明专利]一种基于KRAS蛋白的核苷酸交换方法-CN202110895927.6有效
发明人：范仕龙;陈喜玲 -专利权人：清华大学
申请日： 2021-08-05 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于KRAS蛋白的核苷酸交换方法。本发明中的核苷酸交换方法是在碱性磷酸酶的作用下，严格控制反应时间，按照一定的比例加入GTP类似物，将KRAS蛋白中的核苷酸GDP替换为GTP类似物。最终得到KRAS蛋白与GTP类似物复合物。本发明使用的核苷酸交换方法，可以方便快速的得到交换后的复合物样品。
一种基于 kras 蛋白核苷酸交换方法

[发明专利]用于抑制外周髓鞘蛋白-22的表达的产物和方法-CN202180092622.X在审
发明人： S·Q·哈尔佩尔;K·克莱奥帕;M·斯塔夫鲁 -专利权人：全国儿童医院研究所;塞浦路斯肌肉萎缩症研究基金会暨神经病学与遗传学研究所
申请日： 2021-11-30 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：提供了用于抑制外周髓鞘蛋白‑22基因的表达的基于RNA干扰的方法和产物。提供了抑制所述外周髓鞘蛋白‑22基因的RNA以及编码所述RNA的DMA。如重组腺相关病毒等递送媒剂递送编码抑制所述外周髓鞘蛋白‑22基因的RNA的DMA。所述方法治疗夏科‑马里‑图思病(Charcot‑Marie‑Tooth Disease)，如夏科‑马里‑图思病1A型(CMT1A)。
用于抑制髓鞘蛋白 22 表达产物方法

[发明专利]使用蛋白酶控制限制酶活性-CN202111286567.6有效
发明人：朱振宇;孙大鹏;A·昆比 -专利权人：武汉爱博泰克生物科技有限公司
申请日： 2021-11-02 - 公布日： 2023-10-17 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：蛋白酶是水解蛋白质酶、消除其活性的酶。本发明利用包括蛋白酶K、内切蛋白酶LysC和/或胰蛋白酶的蛋白酶的水解活性来控制限制酶的活性和/或消除或减少不需要的DNA或RNA片段的产生(称为星号活性)。
使用蛋白酶控制限制活性

[发明专利]用于选择性扩增等位基因的合成多核苷酸和方法-CN202280012877.5在审
发明人：查尔斯·罗迪 -专利权人：瑞红德西公司
申请日： 2022-02-02 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：在替代实施方案中，提供了基于引物的核酸扩增方法，其能够选择不扩增或修复特定等位基因，同时不干扰靶序列内特定核苷酸位置处的任何替代等位基因或突变的扩增或修复，或者换句话说，提供了用于选择性抑制一个等位基因同时扩增任何替代等位基因的方法，或者提供用于抑制野生型序列同时扩增点突变(包括扩增单核苷酸变体(SNV)、插入和缺失)的方法。在替代实施方案中，核酸组合物的一部分不选择性抑制特定核酸靶序列的扩增，从而提供可用于确定扩增的成功和确定特定核酸靶序列与编码替代等位基因或突变的序列的相对比率的内部对照。
用于选择性扩增等位基因合成多核苷酸方法

[发明专利]高纯度RNA组合物及其制备方法-CN202310687777.9在审
发明人：史蒂芬·霍格;威廉·伊萨;爱德华·J·米拉科;珍妮弗·尼尔森;埃米·E·拉比多;加博尔·布托拉 -专利权人：摩登纳特斯有限公司
申请日： 2017-09-14 - 公布日： 2023-10-03 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本申请涉及高纯度RNA组合物及其制备方法。本发明涉及用于治疗应用的改进的RNA组合物。所述RNA组合物特别适用于人治疗应用(例如，RNA治疗剂)。所述RNA组合物通过改进的方法，具体地讲，改进的体外转录(IVT)方法制备。本发明还涉及用于产生和纯化RNA(例如，治疗性RNA)的方法，以及使用所述RNA组合物的方法及其治疗应用。
纯度 rna 组合及其制备方法

[发明专利]一种无细胞体系全酶法微环DNA的制备方法及其应用-CN202310729480.4在审
发明人：柳伟强;付煜烨;许映冲;黄国帅;徐杰;齐金才;何腾飞;申姝茵;杨平 -专利权人：苏州泓迅生物科技股份有限公司
申请日： 2023-06-20 - 公布日： 2023-10-03 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明提供了一种无细胞体系全酶法微环DNA的制备方法及其应用，通过构建含有基因治疗表达框架的重组质粒，经过聚合酶体外扩增，在整合酶的作用下分离成微环DNA和骨架载体，然后利用限制性内切酶将骨架载体切除线性DNA，再用核酸外切酶进一步降解掉线性DNA，达到彻底去除骨架载体的目的，从而获得高纯度的微环DNA。本发明采用无细胞体系的全酶法DNA复制体系制备高纯度微环DNA，较细胞内制备方法具有重复性好、纯度高、成本低的优势。
一种细胞体系全酶法微环 dna 制备方法及其应用

[发明专利]利用末端脱氧核糖核苷酸转移酶无模板合成含非天然碱基寡核苷酸链的方法及其应用-CN202111302525.7有效
发明人：陈庭坚;王光远;何传平;刘家韵 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2021-11-04 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明涉及利用末端脱氧核糖核苷酸转移酶无模板合成含非天然碱基寡核苷酸链的方法及其应用。将引发链单链DNA、TdT反应缓冲液和醋酸镁溶液混合，为混合液1；混合液1中加入天然的脱氧核糖核苷酸、dTPT3TP、dTPT3TP衍生物或者dNaMTP中的一种，为混合液2；混合溶液2中加入TdT，为混合液3；混合液3孵育，热处理，使TdT失活，为混合液4；混合液4中加入上样缓冲液，加热处理，使寡核苷酸链完全变性，通过变性胶，分析TdT将非天然碱基添加到寡核苷酸链3’末端的效果。该方法偶联效率高，成本低，操作方便，副产物少，不产生污染性废物。所述寡核苷酸链在DNA末端标记、六碱基信息存储中具有潜在应用价值。
利用末端脱氧核糖核苷酸转移酶模板合成天然碱基寡核苷酸方法及其应用

[发明专利]用于合成5’-加帽RNA的组合物和方法-CN202310734863.0在审
发明人： R·I·霍格雷夫;A·列别捷夫;A·P·麦卡弗里;D·施恩 -专利权人：垂林克生物技术有限公司
申请日： 2016-09-20 - 公布日： 2023-09-15 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本文的发明名称为用于合成5’‑加帽RNA的组合物和方法。本文提供用于合成5’加帽RNA的方法和组合物，其中起始加帽寡核苷酸引物具有通式形式m7Gppp[N2’ome]n[N]m，其中m7G为N7‑甲基化的鸟苷或任何鸟苷类似物，N为任何天然的、修饰的或非天然的核苷，“n”可以是从0至4的任何整数且“m”可以是从1至9的整数。
用于合成 rna 组合方法

[发明专利]一种基于单次加样的连接环化单链核酸的方法-CN202310559836.4在审
发明人：蔡梦 -专利权人：杭州纳博智造科技有限公司
申请日： 2023-05-16 - 公布日： 2023-09-05 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于单次加样的连接环化单链核酸的方法，包括：将待连接环化的单链核酸和其他组分一次性混合，以形成环化体系；和将所述环化体系置于连接环化条件，以使所述待连接环化的单链核酸连接环化，其中所述核酸为DNA和/或RNA，所述其他组分包括热稳定性DNA连接酶和/或RNA连接酶和可选地反应缓冲液。该方法一次性添加所有组分形成单链核酸的环化体系，能够提高单链核酸的环化连接效率，并应用于自动化环化单链核酸。
一种基于单次加样连接环化核酸方法

[发明专利]转座酶和Y衔接子用于片段化和标签化DNA的用途-CN201780032464.2有效
发明人： R·A·哈;N·M·萨姆帕斯;B·J·彼得 -专利权人：安捷伦科技有限公司
申请日： 2017-01-19 - 公布日： 2023-09-05 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明提供转座酶和Y衔接子用于片段化和标签化DNA的用途。本文中特别描述了包含一群第一寡核苷酸、第二寡核苷酸和第三寡核苷酸的衔接子，其中第一寡核苷酸、第二寡核苷酸和第三寡核苷酸杂交在一起以产生复合物，所述复合物包含：(i)包含转座酶识别序列的第一端，(ii)可变序列的中心单链区和(iii)包含非互补序列的第二端。还提供了一种方法、以及用于实施该方法的试剂盒。
转座酶衔接用于片段标签 dna 用途

[发明专利]从环境样品中检测李斯特菌的方法-CN202180078533.X在审
发明人： P·K·比斯瓦斯;L·张;L·L·沃克;R·S·多诺弗里奥 -专利权人：纽勤有限公司
申请日： 2021-10-21 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本文描述了从环境样品中检测李斯特菌。特别地，所述检测可以在当天或同一工作班次，例如在约12小时或更短或约6至10小时内可得到结果的情况下完成。所述当天检测利用短的孵育时间和/或浓缩步骤，结合快速检测测定来产生当天的结果。
环境样品检测李斯特方法

[发明专利]用于加A法miRNA合成第一链cDNA的方法及产品-CN202210154192.6在审
发明人：宋东亮;滕人达;孙晓亮;竹个个 -专利权人：翌圣生物科技（上海）股份有限公司
申请日： 2022-02-21 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种用于加A法miRNA合成第一链cDNA的方法及产品。具体技术方案为：一种用于加A法miRNA合成第一链cDNA的逆转录引物，所述引物的序列从5’端到3’端依次为：5～15个碱基的通用引物序列、10～20个Oligo(dT)、1～3个与miRNA 3’配对的锚定碱基。并配合提供了含有该逆转录引物的反应体系，体系包括特定的逆转录酶混合试剂和缓冲试剂。利用本发明提供的本发明体系，可适用于多种miRNA模板，且检测灵敏度高、加A及逆转录效率高。
用于 mirna 合成第一 cdna 方法产品

[发明专利]一种非天然核酸水凝胶及其制备方法与应用-CN202110101329.7有效
发明人：陈庭坚;张汝洁;彭乐丽;叶方开;雷谨铭;何传平;王光远 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2021-01-26 - 公布日： 2023-08-18 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种非天然核酸水凝胶及其制备方法与应用，属于生物材料技术领域。本发明方法操作如下：在聚合酶链式反应体系中掺入可配对的、碱基部分的5号位含炔丙胺基修饰的人工核苷酸，制备得到部分碱基上含氨基连接臂的核酸片段，先与点击化学接头反应，再分别与5'端含相应基团的引物进行点击化学反应，得到“毛刷”引物，最后以含有目的片段的核酸片段或质粒为模板，通过“毛刷”引物进行PCR扩增，扩增产物浓缩后高温退火，即可。本发明提供的方法简易、普适性高，所得水凝胶可以保护功能DNA使其不易在血清中降解，不仅克服了传统DNA水凝胶的缺点，而且具有较高稳定性、交联程度可控以及携带遗传信息等优点，具有良好的应用前景。
一种天然核酸凝胶及其制备方法应用

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