本发明涉及一种突变型Taq酶及其制备方法，所述突变型Taq酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明通过氨基酸突变位点Q592K、S612R、A643L、V649L、A689I、F697I、和V720I，得到突变型Taq酶，在相同条件下的检测中突变型Taq酶的活性较市售Taq酶的活性有明显的提高,同时在热稳定性方面，突变型Taq酶较市售Taq酶有明显改善。
本发明涉及一种突变的源于Aspergillus niger 113的植酸酶基因及其表达。所述突变的植酸酶基因含1350个碱基，编码氨基酸450个；所述突变的植酸酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO 1所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO2所示。本发明的突变的源于Aspergillus niger 113的植酸酶基因在121位含有一个突变位点，将Glu氨基酸突变为Phe。与野生型的植酸酶比较，本发明的突变的源于Aspergillus niger 113植酸酶基因的酶活性提高了3.1倍，同时kcat/Km值也提高了0.86倍。
本发明提供一种烟酰胺核糖转移酶突变体及其应用，该突变体的氨基酸序列与氨基酸序列SEQ ID NO.2相比，在氨基酸序列SEQ ID NO：2中第R189位、第S232位、第R302位进行单突变、两两联合突变、三个联合突变中的一种突变；该新型烟酰胺核糖转移酶突变体酶用于β‑烟酰胺单核苷酸的合成制备。本发明构建的烟酰胺核糖激转移酶突变体酶具有酶成本低，转化时间短、工艺操作简单等特点，具有大规模工业应用的广泛前景。
本发明公开了耐热的I型普鲁兰酶的突变体酶，其氨基酸序列如SEQ ID No.1，或如SEQ ID No.2，或SEQ ID No.3，或SEQ ID No.4、或SEQ ID No.5所示。本发明还公开了编码突变体酶的基因，其如SEQ ID No.6，或SEQ ID No.7，或SEQ ID No.8，或SEQ ID No.9、或SEQ ID No.10。本发明还公开了突变体酶的制备方法，包括从普鲁兰酶的氨基酸序列选取突变位点，设计突变引物对；以携带普鲁兰酶基因的载体为模板，进行点突变反应，得到突变质粒；然后于转化工程菌中复制表达。本发明的突变体酶具有更优的耐热性能。
本发明公开了一种L‑谷氨酸脱氢酶突变体，所述L‑谷氨酸脱氢酶突变体的序列为将SEQ ID NO.1所述序列的第175位氨基酸残基A突变为G，和，第386位氨基酸残基V突变为空间位阻更小的氨基酸残基后的序列本发明还公开了该L‑氨基酸脱氢酶突变体在制备L‑草铵膦或其盐中的应用。本发明的L‑谷氨酸脱氢酶突变体制备L‑草铵膦或其盐时，与仅在175位或者仅在386突变的L‑谷氨酸脱氢酶突变体相比，比酶活更高，从而酶的作用效率提高，降低了反应的成本，利于工业化生产。
本发明公开了一种天冬氨酸酶突变体及其应用，所述天冬氨酸酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。利用本发明提供的天冬氨酸酶突变体能够催化制备β‑丙氨酸，本发明构建的天冬氨酸酶突变体的反应温度为15℃～30℃，避免了丙烯酸聚合反应。本发明提供的天冬氨酸酶突变体酶活力为3.28U/mg，与野生型酶活力0.023U/mg相比，酶活提高了143倍。
本发明公开了一种β‑葡萄糖苷酶突变体、工程菌及其在降解纤维素中的应用，所述β‑葡萄糖苷酶突变体是将SEQ ID No.2所示氨基酸序列第20位或第240位进行定点突变获得的。本发明突变酶的比活力比野生酶显著提高1.5倍及以上。以内切葡聚糖苷酶、外切葡聚糖苷酶、裂解多糖单加氧酶与突变酶的混合液为催化剂时，葡萄糖产率较野生酶提高了15％‑25％。
本发明提供了一种肝素酶突变体H1‑6及其工程菌株和应用，属于蛋白突变技术领域。本发明提供的肝素酶突变体H1‑6，是在野生型肝素酶氨基酸序列SEQ ID NO:1的基础上进行了以下突变：P10R、V45A、C113S、L135P、L160P、R166C和R218G。本发明对来源于拉乌尔菌属(Raoultellasp.)的肝素酶基因采用CepPCR与MegawhopPCR结合的易错PCR技术进行随机突变，高通量筛选获得高酶活的肝素酶突变体。实验结果表明，重组表达的肝素酶突变体菌株的酶活为3726U/L以上，比野生型肝素酶酶活提高了97.6％以上，具有较高的应用价值。
本发明提供了一种肝素酶突变体H2‑15及其工程菌株和应用，属于蛋白突变技术领域。本发明提供的肝素酶突变体H2‑15，是在野生型肝素酶氨基酸序列SEQ ID NO:1的基础上进行了以下突变：P10R、V45A、C113S、L135P、L160P、R166C和R218G。本发明对来源于拉乌尔菌属(Raoultellasp.)的肝素酶基因采用CepPCR与MegawhopPCR结合的易错PCR技术进行随机突变，高通量筛选获得高酶活的肝素酶突变体。实验结果表明，重组表达的肝素酶突变体菌株的酶活为4000U/L以上，比野生型肝素酶酶活提高了112.1％以上，具有较高的应用价值。
