本发明公开一种内切葡聚糖苷酶突变体、基因工程菌及其在降解纤维素中的应用。所述内切葡聚糖苷酶突变体是将SEQ ID No.3所示氨基酸序列第202位的赖氨酸突变为精氨酸。本发明内切葡聚糖苷酶突变体的比活力比野生酶显著提高1.4倍左右。以微晶纤维素为底物时，纤维素酶与突变酶的共同反应，反应催化效率较以纤维素酶单独降解底物显著提高了23.5％，可以看出突变酶显著提高了酶活力，可以降低工业应用的经济成本，为其在食品生物乙醇等工业生产领域提供了应用基础
本发明公开了一种α‑L‑鼠李糖苷酶突变体的编码基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明以棘孢曲霉野生型α‑L‑鼠李糖苷酶基因为基础进行位点突变，突变后的α‑L‑鼠李糖苷酶突变体基因与野生型α‑L‑鼠李糖苷酶基因相似性为99.89％，突变后的α‑L‑鼠李糖苷酶突变体基因在毕赤酵母中表达后，与野生型相比，α‑L‑鼠李糖苷酶的酶活力和耐热性能都明显提高。本发明能提高α‑L‑鼠李糖苷酶在高温条件下的催化性能和稳定性。
本发明公开了一种醇脱氢酶突变体，为野生型醇脱氢酶的氨基酸发生如下任意一种情况的突变：野生型醇脱氢酶的序列中第35位丝氨酸突变为天冬氨酸；野生型醇脱氢酶的序列中第35位丝氨酸突变为天冬氨酸，且第36位精氨酸突变为异亮氨酸；野生型醇脱氢酶的序列中第34位丙氨酸、缬氨酸、或半胱氨酸突变为异亮氨酸，且第35位丝氨酸突变为天冬氨酸，且第36位精氨酸突变为异亮氨酸；野生型醇脱氢酶的序列中第13位丝氨酸突变为丙氨酸，且第34位丙氨酸、缬氨酸、或半胱氨酸突变为异亮氨酸，且第35位丝氨酸突变为天冬氨酸，且第36位精氨酸突变为异亮氨酸；所述的野生型醇脱氢酶的序列如SEQ ID NO：2、4、6或8中的任意一项所示。
本发明涉及一种热稳定性和比活力提高的低温β‑木糖苷酶突变体，所述突变体为低温β‑木糖苷酶突变体G110S，其氨基酸序列为SEQ ID NO.1；或者，所述突变体为低温β‑木糖苷酶突变体Q201R，其氨基酸序列为SEQ ID NO.2；或者，所述突变体为低温β‑木糖苷酶突变体loop2，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3。本发明中稳定性提高和比活力上升的低温β‑木糖苷酶突变体更适合工业应用，在食品、饲料、造纸等领域具有更广泛的应用前景，从而扩大了低温β‑木糖苷酶在食品、医药、造纸、饲料等领域提供了应用潜力。
