本发明涉及一种海藻糖合酶突变体，属于基因工程技术领域。所述海藻糖合酶突变体是对氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的海藻糖合酶的第201位和/或第351位的氨基酸进行定点突变获得的。本发明在天然海藻糖合酶的基础上，通过理性设计，结合定点突变生物技术改造海藻糖合酶分子结构，分析了突变后残基对酶热稳定性的影响，并最终获得了稳定性提高的突变菌株S201I、H351A及组合突变株S201I/H351A，本发明的海藻糖合酶突变体在热稳定显著提高的同时酶的活性不受影响，本发明的海藻糖合酶突变体比野生型更适合于催化麦芽糖生成海藻糖的应用，更利于生产工艺的灵活性。
本发明公开了一种D‑来苏糖异构酶突变体及其应用，其中，所述D‑来苏糖异构酶突变体是由SEQ ID No.1所示的D‑来苏糖异构酶的氨基酸序列发生突变获得，突变位点包括第21，58，78，119和170位氨基酸中的至少两个位点进行突变本发明制得的多点D‑来苏糖异构酶突变体在相同的酶反应条件下的D‑甘露糖的转化率明显高于野生酶WT体系中D‑甘露糖的转化率，酶活性高于野生酶且突变体酶的热稳定性较野生型的有显著的提升，进而可满足工业化应用的诉求
本发明公开了一种腈水解酶突变体及其在合成2‑氯烟酸中的应用，所述腈水解酶突变体是将SEQ ID No.2所示腈水解酶氨基酸序列的第146位或194位氨基酸进行单突变或多突变获得的。本发明腈水解酶突变体较野生型活力大幅提高，在使用该酶的粗提取物或工程菌全细胞进行催化时，反应酶活仍然保持较高状态。此外，本发明的腈水解酶突变体能够适应30～45℃的催化温度。本发明的腈水解酶突变体较亲本活力提高80多倍，产量提高23.2倍，为工业化酶法合成2‑氯烟酸奠定基础。
本发明的目的是提供一种植酸酶突变体及其应用，是在植酸酶HTP6M的基础上通过大量的突变筛选，最终获得耐热性得到显著提高的植酸酶突变体，其氨基酸序列为SEQ ID NO:3。本发明以植酸酶突变体HTP6M为基础，提供了包含D35Y单点突变的植酸酶突变体HTP6M1，包含D35Y和F254Y两点突变的植酸酶突变体HTP6M2和包含D35Y、F254Y、Q184E、Y289K、I405L五点突变的植酸酶突变体HTP6M5。与植酸酶HTP6M相比，突变体HTP6M1、HTP6M2和HTP6M5的最适作用温度和pH没有发生改变，但其耐热性得到显著提升。
