本发明公开了一种蛋白酶突变体，所述突变体在对应于SEQ ID NO：1的第11位上具有氨基酸的取代；且所述突变体具有蛋白酶活性。本发明所述蛋白酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。另外，本发明通过科学的突变点方案设计及大量的突变体筛选实验，获得的蛋白酶突变体在宿主细胞中的发酵活力与其亲本蛋白酶相比显著增加，有利于在工业化生产中降低该酶的生产成本，提高工厂的蛋白酶产品产能，为其广泛应用于不同领域提供基础
本发明提供了一种酶活提高及最适pH改变的天冬氨酸酶突变体，属于基因工程技术领域；所述天冬氨酸酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的天冬氨酸酶突变体是在来源于Bacillus sp.YM55‑1天冬氨酸酶的基础上，将第12位亮氨酸突变为天冬氨酸，将第166位酪氨酸突变为谷氨酸，将第169位谷氨酰胺突变为谷氨酸，将第314位精氨酸突变为甲硫氨酸，从而提升了该酶的pH适应性，同时增强了该酶合成β‑氨基丁酸的能力，有利于工业化生产β‑氨基丁酸。
本发明公开了一种7β‑HSDH酶突变体及其编码基因和应用。所述的7β‑HSDH酶突变体的氨基酸序列与氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的野生型7β‑HSDH酶相比，在SEQ IDNO:2所示的氨基酸序列的第95位、第151位、第193位、第260位进行两两联合突变、三个联合突变或四个联合突变中的任意一种突变。所述的7β‑HSDH酶突变体可用于熊去氧胆酸的合成制备，将其作为生物催化剂转化底物7‑KLCA生成UDCA，反应后产物经HPLC验证，反应转化率99％。本发明构建的7β‑HSDH酶突变体与野生型酶相比，催化活性显著提高，能显著降低酶的使用量，具有大规模工业应用的广泛前景。
本发明公开了一种海洋链霉菌磷脂酶D突变体及其重组表达菌株的制备方法，所述的磷脂酶D突变体是在氨基酸序列为SEQ ID NO:1的亲本序列基础上发生如下突变：P343A；或Y383L；或P343A，Y383L相比于野生型，本发明突变体1的酶活力是野生型的1.3倍，突变体2的酶活是野生型的1.46倍，突变体3的酶活是野生型的3.9倍，突变体4的酶活是野生型的11.6倍。本发明获得的磷脂酶突变体活力得到显著提高。
本发明公开了一种7α‑HSDH酶突变体及其编码基因和应用。所述的7α‑HSDH酶突变体的氨基酸序列与氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的野生型7α‑HSDH酶相比，在SEQ IDNO:2所示的氨基酸序列的第154位、第157位、第194位、第199位进行两两联合突变、三个联合突变或四个联合突变中的任意一种突变。所述的7α‑HSDH酶突变体可用于7‑酮基石胆酸的合成制备，将其作为生物催化剂转化底物CDCA生成7‑KLCA，反应后产物经HPLC验证，反应转化率99％。本发明构建的7α‑HSDH酶突变体与野生型酶相比，催化活性显著提高，能显著降低酶的使用量，具有大规模工业应用的广泛前景。
