本发明公开了分解聚酯的酯酶突变体基因及该基因表达的蛋白与应用，其一种分解聚酯的酯酶突变体基因，简称为A基因，所述A基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。实验表明，本发明的分解聚酯的酯酶突变体基因表达的蛋白能够正确折叠，在大肠杆菌系统能够大量纯化。同时本发明的分解聚酯的酯酶突变体基因表达的蛋白具有野生型酯酶降解PET的功能，本发明的蛋白的催化效率与野生型酯酶相比显著增加。本发明的蛋白在pH为6‑11范围内均具有降解PET的活性；在30℃‑70℃具有活性且稳定。具体地，在pH＝9.0，温度为45℃时对PET的降解能力与野生型酯酶相比提高了1.72倍。
本发明公开了一种胞质不相容性因子(CI factor，Cif)包括CifA的突变基因及蛋白，所述亲本CifA来源于沃尔巴克氏体(Wolbachia)，所述突变蛋白相对于亲本存在若干个氨基酸的突变，所述突变蛋白的核苷酸序列CifAST如SEQ ID NO.1所示。本发明以胞质不相容性因子CifA与CifB复合物结构为基础，根据A因子与B因子相互作用界面特点，利用基因工程的方法对原有的CifA基因进行互作界面突变，使得来自不同沃尔巴克氏体菌株的本不能产生相互作用的胞质不相容性因子CifA与CifB能够产生相互作用。
本发明公开了具有聚酯降解活性的酯酶突变体及其应用，酯酶突变体为下列之一：SEQ ID NO.3所示的酯酶A的氨基酸序列第177位的谷氨酸突变为谷氨酰胺；或第178位的天冬酰胺突变为丙氨酸；或第180位的丝氨酸突变为苏氨酸、亮氨酸、缬氨酸；或第181位的异亮氨酸突变为缬氨酸等；实验表明，本发明的酯酶突变体基因表达的蛋白能够正确折叠，在大肠杆菌系统能够大量纯化。同时本发明的酯酶突变体具有降解聚酯的功能，酯酶突变体基因表达的蛋白的热稳定性及催化效率与野生型酯酶相比显著增加。本发明的酯酶突变体在pH为4‑11范围内均具有降解聚酯的活性。本发明的酯酶突变体在37‑70℃具有活性且稳定。
本发明公开了一种酯酶突变体基因及该基因表达的蛋白与应用，一种酯酶突变体基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；实验表明，本发明的酯酶突变体基因表达的蛋白能够正确折叠，在大肠杆菌系统能够大量纯化。同时本发明的突变蛋白具有野生型酯酶降解PET的功能，酯酶突变体基因表达的蛋白的热稳定性及催化效率与野生型酯酶相比显著增加。本发明的酯酶突变体基因表达的蛋白在pH为6‑11范围内均具有降解PET的活性。本发明的酯酶突变体基因表达的蛋白在30℃‑70℃具有活性且稳定。具体地，在pH 9.0，温度为50℃时对PET的降解能力与野生型酯酶相比提高了58倍。
