本发明公开了一种低温活性改良的外切菊粉酶突变体MutDR121EH9,该突变体MutDR121EH9具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列,其热活性和热稳定性发生了改变,在低温下具有更高的活性,而热稳定性降低,低温活性变高有利于在低温反应时减少酶的用量或缩短反应时间,热稳定性变差有利于通过热处理控制酶的反应过程。野生酶InuAMN8的最适温度为35℃,突变酶MutDR121EH9的最适温度为20℃;50℃处理后,野生酶InuAMN8保持81%以上的酶活性,突变酶MutDR121EH9的酶活从32%降至14%。本发明的突变体MutDR121EH9可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。
本发明涉及基因工程及蛋白质改造技术领域,公开了一种低温耐盐性改变的菊粉酶突变体MutS117N及其应用,该突变体MutS117N的氨基酸序列是将野生外切菊粉酶InuAMN8的第117位氨基酸(丝氨酸)突变为天冬酰胺获得,MutS117N的序列如SEQ ID NO.1所示。与野生酶InuAMN8相比,突变酶MutS117N的低温活性提高,热稳定性降低,在氯化钠中的活性和稳定性降低,有利于酶的安全性使用和应用于低温环境要求下的生物技术领域。本发明低温耐盐性改变的菊粉酶突变体MutS117N可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。
本发明公开了一种热敏感的菊粉酶突变体MutY119N及其应用,该热敏感的菊粉酶突变体MutY119N的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,该突变体MutY119N的氨基酸序列是将野生外切菊粉酶InuAMN8的第119位酪氨酸突变为天冬酰胺获得。与野生酶InuAMN8相比,本发明的突变酶MutY119N的低温活性提高,热稳定性降低,有利于酶的安全性使用和应用于低温环境要求下的生物技术领域。本发明的低温外切菊粉酶突变体MutY119N可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。
本发明公开了一种低温适应性提高的外切菊粉酶突变体MutV268Δ13,该突变体MutV268Δ13具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。与野生酶InuAMN8相比,突变酶MutV268Δ13的热活性和热稳定性发生了改变,在低温下的活性提高,在中温下的活性和稳定性降低,有利于应用于低温环境要求下的生物技术领域。温度从0℃上升到25℃,InuAMN8的活性从15%上升到74%,MutV268Δ13的活性从24%上升到94%;50℃处理后,InuAMN8保持81%以上的活性,MutV268Δ13的酶活从25%降至0%。本发明的突变体MutV268Δ13可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。
本发明涉及基因工程及蛋白质改造技术领域,公开了一种热盐性敏感的菊粉酶突变体MutY119D及其制备方法,该突变体MutY119D的氨基酸序列是将野生外切菊粉酶InuAMN8的第119位氨基酸(酪氨酸)突变为天冬氨酸获得,MutY119D的序列如SEQ ID NO.1所示。与野生酶InuAMN8相比,突变酶MutY119D的低温活性提高,热稳定性降低,在氯化钠中的活性和稳定性降低,有利于酶的安全性使用和应用于低温环境要求下的生物技术领域。本发明的热盐性敏感的菊粉酶突变体MutY119D可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。
本发明涉及基因工程及蛋白质改造技术领域,具体来说是一种低温外切菊粉酶突变体MutAP122EK5及应用,该突变体MutAP122EK5的氨基酸序列是将野生外切菊粉酶InuAMN8的第122位至126位的AAPLP替换为EEDRK这5个氨基酸,MutAP122EK5的序列如SEQ ID NO.1所示。与野生酶InuAMN8相比,突变酶MutAP122EK5的低温活性提高,热稳定性降低,有利于应用于低温环境要求下的生物技术领域。本发明的低温外切菊粉酶突变体MutAP122EK5可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。
本发明涉及基因工程及蛋白质改造技术领域,具体来说是一种热稳定性降低的低温外切菊粉酶突变体MutA122Δ5及应用,该突变体MutA122Δ5的氨基酸序列是在去除野生外切菊粉酶InuAMN8的第122位至126位氨基酸基础上得到的,即去除了InuAMN8的第122位至126位的AAPLP这5个氨基酸,MutA122Δ5的序列如SEQ ID NO.1所示。与野生酶InuAMN8相比,突变酶MutA122Δ5在低温下的活性提高且热稳定性降低,有利于低温生产并通过温度变化控制酶的催化反应。本发明的低温外切菊粉酶突变体MutA122Δ5可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。
本发明涉及基因工程及蛋白质改造技术领域,公开了一种低温外切菊粉酶突变体MutA118H及其应用,该突变体MutA118H的氨基酸序列是由野生外切菊粉酶InuAMN8的第118位氨基酸(丙氨酸)突变为组氨酸获得,其序列如SEQ ID NO.1所示。与野生酶InuAMN8相比,突变酶MutA118H的热活性和热稳定性发生了改变,突变酶MutA118H的最适温度降低且更容易热变性,适用于低温环境要求下的生物技术领域,并有利于通过温度变化控制酶的催化反应。本发明的低温外切菊粉酶突变体MutA118H可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。
本发明涉及基因工程及蛋白质改造技术领域,具体来说是一种耐热性降低的低温外切菊粉酶突变体MutG169Δ4及应用,该突变体MutG169Δ4的氨基酸序列是在去除野生外切菊粉酶InuAMN8的第169位至172位氨基酸基础上得到的,即去除了InuAMN8的第169位至172位的甘氨酸‑甘氨酸‑丙氨酸‑甘氨酸这4个氨基酸,MutG169Δ4的序列如SEQ ID NO.1所示。与野生酶InuAMN8相比,突变酶MutG169Δ4的耐热性降低,有利于通过温度变化控制酶的催化反应。本发明的低温外切菊粉酶突变体MutG169Δ4可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。
本发明公开了一种低温改良的外切菊粉酶突变体MutS117G,该突变体MutS117G具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。与野生酶InuAMN8相比,突变酶MutS117G的热活性和热稳定性发生了改变,突变酶MutS117G的低温活性变高但热稳定性变差。纯化的野生酶InuAMN8的最适温度为35℃,而突变酶MutS117G的最适温度为25℃;50℃处理后,野生酶InuAMN8的酶活从88%降至81%,而突变酶MutS117G的酶活从87%降至58%;55℃处理后,野生酶InuAMN8的酶活剩余70%,而突变酶则完全失活。本发明的突变体MutS117G可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。