本发明公开了一种低温活性改良的外切菊粉酶突变体MutDR121EH9,该突变体MutDR121EH9具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列,其热活性和热稳定性发生了改变,在低温下具有更高的活性,而热稳定性降低,低温活性变高有利于在低温反应时减少酶的用量或缩短反应时间,热稳定性变差有利于通过热处理控制酶的反应过程。野生酶InuAMN8的最适温度为35℃,突变酶MutDR121EH9的最适温度为20℃;50℃处理后,野生酶InuAMN8保持81%以上的酶活性,突变酶MutDR121EH9的酶活从32%降至14%。本发明的突变体MutDR121EH9可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。
本发明涉及基因工程及蛋白质改造技术领域,公开了一种低温耐盐性改变的菊粉酶突变体MutS117N及其应用,该突变体MutS117N的氨基酸序列是将野生外切菊粉酶InuAMN8的第117位氨基酸(丝氨酸)突变为天冬酰胺获得,MutS117N的序列如SEQ ID NO.1所示。与野生酶InuAMN8相比,突变酶MutS117N的低温活性提高,热稳定性降低,在氯化钠中的活性和稳定性降低,有利于酶的安全性使用和应用于低温环境要求下的生物技术领域。本发明低温耐盐性改变的菊粉酶突变体MutS117N可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。
本发明公开了一种耐盐耐醇的β‑葡萄糖苷酶及其在转化人参皂苷中的应用,涉及基因工程技术领域,该酶命名为BglPcC1,该酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的β‑葡萄糖苷酶BglPcC1具有良好的耐醇和耐盐的特性,且一定浓度的NaCl或KCl能提高酶的活性,该酶在4h内能将人参皂苷Rb1转化为人参皂苷Rd,转化率可达98.41%,本发明体提供的β‑葡萄糖苷酶BglPcC1可应用于医药、保健品、食品等行业。
本发明公开了一种耐热性提高的N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶突变体及其应用,涉及基因工程技术领域。该酶突变体为MutNΔ120,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码该酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该突变体MutNΔ120的最适温度为45℃,其在10℃、20℃和30℃时分别具有25%、58%、67%的酶活力;37℃处理60min后,仍能保持78%的酶活力,与氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示的野生酶相比,37℃处理60min的酶活力提高了42%。本发明提供的N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶突变体可应用于功能性食品生产或海产品加工等行业。
本发明公开了一种热敏感的菊粉酶突变体MutY119N及其应用,该热敏感的菊粉酶突变体MutY119N的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,该突变体MutY119N的氨基酸序列是将野生外切菊粉酶InuAMN8的第119位酪氨酸突变为天冬酰胺获得。与野生酶InuAMN8相比,本发明的突变酶MutY119N的低温活性提高,热稳定性降低,有利于酶的安全性使用和应用于低温环境要求下的生物技术领域。本发明的低温外切菊粉酶突变体MutY119N可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。
本发明公开了一种低温适应性提高的外切菊粉酶突变体MutV268Δ13,该突变体MutV268Δ13具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。与野生酶InuAMN8相比,突变酶MutV268Δ13的热活性和热稳定性发生了改变,在低温下的活性提高,在中温下的活性和稳定性降低,有利于应用于低温环境要求下的生物技术领域。温度从0℃上升到25℃,InuAMN8的活性从15%上升到74%,MutV268Δ13的活性从24%上升到94%;50℃处理后,InuAMN8保持81%以上的活性,MutV268Δ13的酶活从25%降至0%。本发明的突变体MutV268Δ13可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。
本发明涉及基因工程及蛋白质改造技术领域,公开了一种热盐性敏感的菊粉酶突变体MutY119D及其制备方法,该突变体MutY119D的氨基酸序列是将野生外切菊粉酶InuAMN8的第119位氨基酸(酪氨酸)突变为天冬氨酸获得,MutY119D的序列如SEQ ID NO.1所示。与野生酶InuAMN8相比,突变酶MutY119D的低温活性提高,热稳定性降低,在氯化钠中的活性和稳定性降低,有利于酶的安全性使用和应用于低温环境要求下的生物技术领域。本发明的热盐性敏感的菊粉酶突变体MutY119D可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。
本发明涉及基因工程及蛋白质改造技术领域,具体来说是一种低温外切菊粉酶突变体MutAP122EK5及应用,该突变体MutAP122EK5的氨基酸序列是将野生外切菊粉酶InuAMN8的第122位至126位的AAPLP替换为EEDRK这5个氨基酸,MutAP122EK5的序列如SEQ ID NO.1所示。与野生酶InuAMN8相比,突变酶MutAP122EK5的低温活性提高,热稳定性降低,有利于应用于低温环境要求下的生物技术领域。本发明的低温外切菊粉酶突变体MutAP122EK5可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。
本发明涉及基因工程及蛋白质改造技术领域,具体来说是一种热稳定性降低的低温外切菊粉酶突变体MutA122Δ5及应用,该突变体MutA122Δ5的氨基酸序列是在去除野生外切菊粉酶InuAMN8的第122位至126位氨基酸基础上得到的,即去除了InuAMN8的第122位至126位的AAPLP这5个氨基酸,MutA122Δ5的序列如SEQ ID NO.1所示。与野生酶InuAMN8相比,突变酶MutA122Δ5在低温下的活性提高且热稳定性降低,有利于低温生产并通过温度变化控制酶的催化反应。本发明的低温外切菊粉酶突变体MutA122Δ5可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。
本发明涉及基因工程及蛋白质改造技术领域,公开了一种低温外切菊粉酶突变体MutA118H及其应用,该突变体MutA118H的氨基酸序列是由野生外切菊粉酶InuAMN8的第118位氨基酸(丙氨酸)突变为组氨酸获得,其序列如SEQ ID NO.1所示。与野生酶InuAMN8相比,突变酶MutA118H的热活性和热稳定性发生了改变,突变酶MutA118H的最适温度降低且更容易热变性,适用于低温环境要求下的生物技术领域,并有利于通过温度变化控制酶的催化反应。本发明的低温外切菊粉酶突变体MutA118H可应用于食品、酿酒和洗涤等行业。