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[发明专利]用于等温DNA扩增的方法和组合物-CN202080045635.7在审
发明人：赫尔本·卡罗尔森·马蒂纳斯·宗达格;布拉姆·约翰内斯·特尼斯;纳韦尔·亚历杭德罗·保利诺 -专利权人：辛沃鲁克斯IP有限公司
申请日： 2020-04-23 - 公布日： 2022-02-18 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明涉及用于扩增DNA模板的方法，包括在核糖核苷酸存在下用DNA依赖性RNA聚合酶培养DNA模板，和通过链置换DNA聚合酶扩增DNA模板。本发明还涉及RNA聚合酶用于在DNA模板上产生核糖核苷酸引物然后通过链置换DNA聚合酶扩增DNA模板的用途，以及部件试剂盒，包括RNA聚合酶和链置换DNA依赖性DNA聚合酶，以及部件试剂盒用于扩增DNA模板的用途。
用于等温 dna 扩增方法组合

[发明专利]一种缩短DNA模板的DNA测序方法及其应用-CN201110341269.2有效
发明人：肖鹏峰;浦丹;谢宏梅;王文捷;陆祖宏 -专利权人：东南大学
申请日： 2011-11-02 - 公布日： 2012-02-08 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：一种缩短DNA模板的DNA测序方法及其应用，（1）采用合成或者连接测序方法将固定DNA模板中的一小段序列测定；（2）停止该测序引物的测序，并加入四种dNTPs单体延伸测序引物链，使DNA模板成为双链；（3）缩短DNA模板：用限制性内切酶处理预先设定包含酶识别序列的连接子，将已经测定的DNA模板中的一小段序列断裂；（4）将测序引物、且包含酶识别序列的双链寡核苷酸片段，连接到上述切割后的缩短DNA模板上；（5）变性，除去未固定的DNA链，重新获得DNA模板；（6）杂交测序引物，继续对固定DNA模板中的一小段序列进行测定；（7）重复步骤（2）到（6），直到未测定DNA模板序列测定完成。
一种缩短 dna 模板方法及其应用

[发明专利]促翻译反应DNA片断和使用该片断的无细胞系蛋白质合成法-CN200510131047.2无效
发明人：铃木崇;伊东昌章;江连彻;四方正光;小林慎一郎 -专利权人：株式会社岛津制作所
申请日： 2005-12-07 - 公布日： 2006-07-05 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明提供能够简单地克隆需要的基因并可以进一步提高翻译效率的DNA片断、具有该DNA片断的蛋白质表达载体以及模板DNA、从该模板DNA得到的mRNA、含有该模板DNA或mRNA的无细胞系蛋白质合成反应液、使用该模板DNA的无细胞系蛋白质合成方法以及含有该表达载体的无细胞系蛋白质合成试剂盒。是用于促进翻译反应的具有序列表序列号1～11中任意所示的碱基序列的DNA片断、具有该DNA片断的蛋白质表达载体以及模板DNA、从该模板DNA得到的mRNA、含有该模板DNA或mRNA的无细胞系蛋白质合成反应液、使用该模板DNA的无细胞系蛋白质合成方法以及含有该表达载体的无细胞系蛋白质合成试剂盒。
翻译反应 dna 片断使用细胞系蛋白质成法

[发明专利]高通量测序模板的原位复制及其增加阅读长度的测序方法-CN201110030788.7无效
发明人：肖鹏峰;陈婧;葛芹玉;陆祖宏 -专利权人：东南大学
申请日： 2011-01-28 - 公布日： 2011-08-03 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：高通量测序模板的原位复制及其增加阅读长度的测序方法，已经制备好的DNA测序模板，在测序得到一段序列片段后，将其变性为DNA单链－旧模板，再通过活化先前引入的延伸引物将其复制，并将旧模板全部切除后，得到与原来DNA测序模板完全互补的DNA单链－新模板，将这些DNA单链作为DNA测序模板进行序列测定，便得到与旧模板另一端、且互补的新测定序列，将新、旧模板测定的序列片段拼接，增加了测序模板的阅读长度，降低了短片段序列拼接的困难
通量模板原位复制及其增加阅读长度方法

[发明专利]DNA-RNA杂合双链特异性缀合物在促进核酸复制及在新型冠状病毒检测中应用-CN202110500362.7有效
发明人：陈华;谭淼 -专利权人：苏州海苗生物科技有限公司
申请日： 2021-05-08 - 公布日： 2023-05-12 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明公开了DNA‑RNA杂合双链特异性缀合物在促进核酸复制中的应用，所述DNA‑RNA杂合双链特异性缀合物为特异识别DNA‑RNA杂合双链的抗体或结合因子。本发明使用DNA引物，以RNA为模板，或者使用RNA引物，以DNA为模板，利用DNA‑RNA杂合双链特异性缀合物提高不依赖于核酸序列的DNA引物与RNA模板或者RNA引物与DNA模板的亲和性，从而使引物设计不受序列限制，同时促进引物‑模板结构稳定性，提高转录复制效率，并提高复制后下游核酸扩增效率。
dna rna 杂合双链特异性缀合物促进核酸复制新型冠状病毒检测应用

[发明专利]一种提高循环肿瘤DNA检出率的检测装置及方法-CN201810435722.8有效
发明人：林云富 -专利权人：浙江品级基因科技有限公司
申请日： 2018-05-08 - 公布日： 2022-09-06 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种提高循环肿瘤DNA检出率的检测装置及方法。所述检测装置包括：模板制备单元，用于制备抛锚搭桥模板；分子延伸单元，用于利用抛锚搭桥模板将循环肿瘤DNA分子片段进行延伸，所述抛锚搭桥模板的长度长于所述循环肿瘤DNA分子片段；模板清除单元，用于清除所述抛锚搭桥模板，获得延伸后的循环肿瘤DNA分子片段，所述延伸后的循环肿瘤DNA分子片段能够被PCR方法扩增。本发明检测装置及方法使得循环肿瘤DNA分子的检测灵敏度提高了三倍左右，这对于目前的循环肿瘤DNA分子检测技术是一个很重要的进步。
一种提高循环肿瘤 dna 检出检测装置方法

[发明专利]一种合成短单链脱氧核糖核苷酸探针的方法-CN201310189835.1有效
发明人：彭长庚;温婷 -专利权人：昆山彭济凯丰生物科技有限公司
申请日： 2013-05-21 - 公布日： 2013-09-04 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明属于DNA生物合成领域，具体涉及一种合成短单链脱氧核糖核苷酸探针方法及其应用，可用于检测小的非编码核糖核酸，如微核糖核酸,包括如下步骤：（1）制备重组有模板DNA的质粒；（2）切割并连接模板DNA，从重组质粒上酶切获得模板DNA，使模板DNA首尾连接成环；（3）切单链，滚环复制，用切口酶切断模板DNA的一条链，加入聚合酶以环状带切口的DNA为模板进行滚环复制，扩增出含颈环-探针结构的DNA单链；（4）目的短单链DNA的制备，对步骤（3）的产物采用Ⅱ型内切酶切割形成目的单链DNA探针和副产物DNA，通过PAGE分离纯化得到无突变的单链DNA探针。
一种合成短单链脱氧核糖核苷酸探针方法

[发明专利]一种高纯度DNA模板的制备方法-CN201910253729.2在审
发明人：杨保伟;李怡谰;牛沁雅;盛焕精;曹晨阳;崔生辉;瞿洪仁 -专利权人：西北农林科技大学
申请日： 2019-03-30 - 公布日： 2019-05-28 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开了一种高纯度DNA模板的制备方法，其技术方案是：将培养的菌株置于加入无菌去离子水的PCR管中形成混合菌液，将混合菌液置于PCR仪中高温裂解，后降温冷却；然后在离心机上经12000‑15000rpm离心，吸取上清液，弃除沉淀物，即获得高纯度DNA模板；依据需求将获得的高纯度DNA模板直接或经稀释后加入PCR体系进行PCR扩增。本发明降低了对后续扩增体系、特别是DNA聚合酶活性的影响，菌体高温裂解后再将裂解物冷却，可以使DNA重新快速形成螺旋，获得的DNA模板纯度高、数量多，DNA模板约占混合菌液量的67%‑72%，对后续PCR扩增过程中DNA聚合酶的影响较小，极大的提高了扩增效率，减少了非特异性扩增，制备的DNA模板稳定，克服了现有DNA模板制备方法存在的缺陷。
高纯度DNA 制备混合菌液无菌去离子水离心机除沉淀物非特异性高温裂解降温冷却扩增体系扩增效率裂解物上清液中高温稀释菌体菌株扩增裂解上经冷却

[发明专利]一种DNA模板制备液及DNA模板制备方法-CN202010106451.9有效
发明人：徐世永;刘京鸽;陈清;茅慧华;崔凛;李斯旋 -专利权人：金陵科技学院
申请日： 2020-02-21 - 公布日： 2023-06-20 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开了一种DNA模板制备液，包括以下成分：单价阳离子盐、乙醇，溶剂为水；其中所述单价阳离子的终浓度为0.1‑0.8M，所述乙醇的终浓度为0.5‑30％；还公开了一种DNA模板的制备方法，包括以下步骤：(1)将抗凝血液和DNA模板制备液以体积比1:1‑200混合；(2)将步骤(1)得到的混合液直接离心或静置5min后离心，上清液即为DNA模板。本发明即用型的DNA模板制备液，制备液中无需蛋白酶或其他的高价盐离子，且获取过程简单，无需加热处理、时间短；本发明的DNA模板制备液与血液的比例要求不严格，在宽的范围内制备DNA模板均可很好地用于PCR
一种 dna 模板制备方法

[发明专利]检测DNA聚合酶活性的方法及检测试剂盒-CN201710324886.9有效
发明人：蔡统聪;邓艳华;杨浩;黄田田;孙康成;王益琼 -专利权人：菲鹏生物股份有限公司;广东菲鹏生物有限公司
申请日： 2017-05-10 - 公布日： 2019-12-27 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明涉及一种检测DNA聚合酶活性的方法及检测试剂盒。该方法将待测DNA聚合酶与足量的待补平模板混合，在dNTP存在的条件下，通过待测DNA聚合酶诱导待补平模板中的第一DNA片段延伸形成与凸出片段的碱基互补的补平片段得到补平模板。补平模板中的U碱基被足量的UDG酶消化去除，得到适于PCR扩增的模板，正向引物针对凸出片段设计，反向引物针对第一DNA片段的5’端设计，诱导第一模板链扩增。而未经补平的模板经消化酶去除U碱基后则无法与正向引物配对，即不能进行PCR扩增反应。将待测DNA聚合酶的CT值带入由DNA聚合酶标准品建立的标准曲线中，运算即可获得待测DNA聚合酶的酶活性。
补平凸出正向引物碱基足量去除诱导标准曲线反向引物检测试剂碱基互补标准品酶活性酶消化模板链消化酶种检测扩增配对运算延伸

[发明专利]从生物样品中选择性捕获和扩增外显子或靶标基因组区域的方法-CN201010205574.4无效
发明人：林曦;汤文学;李玉华 -专利权人：林曦;汤文学;李玉华
申请日： 2010-06-10 - 公布日： 2011-01-12 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：在一个具体实施方式中，该方法包括以下步骤：获得针对靶标基因组区域的DNA模板，将DNA模板克隆进入克隆载体以形成模板DNA克隆，构建至少包括靶标基因组区域的模板DNA克隆库，从库中的DNA模板克隆产生杂交探针，通过靶标基因组DNA样品(通过机械方法或酶学方法片段化)与所产生的杂交探针的杂交而捕获靶标基因组DNA区域，以及通过使用将结合的DNA从杂交探针上释放并分离的条件洗脱捕获的基因组片段。
生物样品选择性捕获扩增外显子靶标基因组区域方法

[发明专利]一种DNA和RNA杂化纳米花的制备方法及其应用-CN202211583653.8在审
发明人：刘军杰;于文艳;刘兵兵;周蕾;巩恩鹏;车成圆;杨轶;吴鑫赟 -专利权人：郑州大学
申请日： 2022-12-10 - 公布日： 2023-03-14 - 主分类号： A61K31/7105 文献下载
摘要：本发明涉及DNA和RNA杂化纳米花的制备方法及其应用，有效解决粒径合适，生物安全性高，载药量高，且能够靶向脑出血部位，捕获血红蛋白，调控脑部炎性微环境的纳米药物的问题，将包含有血红蛋白适配体序列的磷酸化DNA模板、引物和含有DNA连接酶的缓冲液混合环化反应，得含有血红蛋白适配体序列的环状DNA模板；将包含有miR‑124序列的磷酸化DNA模板、引物混合于含有DNA连接酶的缓冲液中环化反应，得含miR‑124序列的环状DNA模板；将含有血红蛋白适配体序列的环状DNA模板与dNTP、DNA聚合酶在RNA聚合酶缓冲液中进行滚环复制，加入含miR‑124序列的环状DNA模板，使滚环复制和滚环转录同时进行，终止反应后
一种 dna rna 纳米制备方法及其应用

[发明专利]一种适用于无细胞合成限制性内切酶BsaI的线性DNA模板、体系及其用途-CN202210262366.0在审
发明人：李健;刘晚秋;季向阳;卢屹聪 -专利权人：上海科技大学
申请日： 2022-03-16 - 公布日： 2023-03-24 - 主分类号： C12N15/55 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，公开了一种适用于无细胞合成限制性内切酶BsaI的线性DNA模板、体系及其用途。一种适于无细胞合成限制性内切酶BsaI的线性DNA模板，所述线性DNA模板依次包括含有启动子的片段、限制性内切酶BsaI的编码基因和含有终止子的片段，所述编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述线性DNA模板不含有限制性内切酶BsaI的酶切位点。本发明的线性DNA模板，能有效防止线性DNA模板被核酸酶降解，其能够适用于任意的体外无细胞蛋白体系且能顺利表达，采用本发明的线性DNA模板进行体外无细胞蛋白合成，获得的限制性内切酶BsaI的纯度高、比活高
一种适用于细胞合成限制性内切酶 bsai 线性 dna 模板体系及其用途

[发明专利]一种微量动物细胞基因组DNA模板制备液及相应的DNA模板制备方法-CN201010507070.8有效
发明人：邢光东;夏银;王根林 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2010-10-14 - 公布日： 2011-01-19 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明属于分子生物学领域，公开了一种微量动物细胞基因组DNA模板制备液及相应的DNA模板制备方法。微量动物细胞基因组DNA模板制备液由A液和B液以1:3-10的体积比混合制得，A液为Tris、(NH4)2SO4、MgCl2的混合溶液，三种试剂终浓度分别为0.1-2.0M；所述的B液为Triton和β本发明微量动物细胞基因组DNA模板制备液成本较之现有的基因组DNA提取所需试剂的提取成本大幅降低；由于模板制备过程简单，所制备的基因组DNA模板完整，没有耗损，可确保细胞基因组DNA模板制备的一次性成功
一种微量动物细胞基因组 dna 模板制备相应方法

[发明专利]闭合线性DNA的生产-CN202310457342.5在审
发明人： T·艾迪;尼尔·波特;保罗·罗斯韦尔 -专利权人：塔驰莱特IP有限公司
申请日： 2017-08-16 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明涉及闭合线性DNA的生产，具体而言，本发明涉及用于生产闭合线性脱氧核糖核酸(DNA)的改良方法，尤其是用于在无细胞下酶促生产闭合线性DNA分子，优选使用闭合线性DNA作为DNA合成的模板。本发明还涉及新型的闭合线性DNA物质，其适合作为模板用在生产闭合线性DNA的改良方法中。另外，本发明还涉及所述方法的中间产物，原因是这能够使由模板生产的闭合线性DNA的数量大于现有技术已知的方法。
闭合线性 dna 生产

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