本发明涉及一种操作简单、快速,能够有效定量扩增检测人、大鼠、小鼠的ACTB基因表达的DNA荧光定量体外扩增检测试剂盒;其中包含ACTB特异的引物、探针和耐热DNA聚合酶、dNTPs、模板DNA、镁离子、PCR缓冲液、超纯水等组成的PCR扩增缓冲反应体系,以及标准ACTB模板;其中所用引物和探针序列分别为:上游引物P1(SEQ ID NO:1);下游引物P2(SEQID NO:2);TaqMan探针序列(SEQID NO:3);引物和探针浓度为每条0.28umol/L、Taq DNA聚合酶1.5U/50ul、dNTPs底物0.25mmol/L、模板cDNA若干、Mg2+2.5mmol/L、缓冲液1×PCR;标准ACTB基因模板序列为(SEQ ID NO:4)。