本发明涉及一种嗜几丁质类芽孢杆菌几丁质酶基因及其克隆表达与应用,所述一种嗜几丁质类芽孢杆菌几丁质酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述几丁质酶基因编码上述嗜几丁质类芽孢杆菌几丁质酶,所述编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。所述的编码基因编码的酶可有效降解几丁质‑,其编码的几丁质酶活性高,它能有效的降解几丁质,尤其是能够直接降解虾和/或蟹壳粉末获得几丁寡糖,降低工业生产的成本。
本发明公开了高效降解α‑几丁质的融合几丁质酶及其相关生物材料与应用。该融合几丁质酶为将β‑N‑乙酰己糖胺酶和几丁质酶融合在一起得到的几丁质酶活性高于所述β‑N‑乙酰己糖胺酶和所述几丁质酶的蛋白质;该几丁质酶为D1)或D2):D1)氨基酸序列是SEQ ID No.2的第53该融合几丁质酶对多种类型的几丁质都有降解作用,对胶体几丁质、α‑几丁质和真菌细胞壁几丁质都有较高的活性;具有完全水解几丁质,产生N‑乙酰葡萄糖胺的能力。
角毛壳菌几丁质酶基因及其编码的氨基酸序列和用于克隆的引物,它涉及一种几丁质酶基因及其编码的氨基酸序列和用于克隆的引物。本发明旨在增加几丁质酶的种类,拓宽几丁质酶的获得途径。本发明角毛壳菌几丁质酶基因序列如SEQ ID NO:1所示。角毛壳菌几丁质酶基因完整的开放读码框的基因序列如SEQ ID NO:2所示。角毛壳菌几丁质酶基因编码的氨基酸序列如SEQ IDNO:3所示。用于克隆角毛壳菌几丁质酶基因的引物P1~P4的基因序列如SEQID NO:4~7所示。本发明角毛壳菌几丁质酶基因是一个新的几丁质酶基因,为酸性内切几丁质酶基因。
本发明提供了一种几丁质脱乙酰酶RsCDA、制备方法及其在几丁质水解中的应用。几丁质脱乙酰酶RsCDA来源于匍枝根霉,氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明还公开了该几丁质脱乙酰酶RsCDA与来源于哈维氏弧菌的几丁质酶VhChit2在几丁质水解中具有协同作用,当协同水解温度为40~70℃,pH 6~8,RsCDA与VhChit2的摩尔浓度比为1:1~10:1,水解时间为0~5h,产生的乙酸含量是RsCDA水解的175.6%,还原糖含量是VhChit2水解的120.3%,协同水解后的几丁质脱乙酰度是RsCDA水解后的128.4%。该几丁质脱乙酰酶RsCDA与几丁质酶VhChit2的协同可以有效提高对几丁质的水解程度,在几丁质的生物转化中具有较好的应用价值。