本发明公开了一种褐藻胶裂解酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。编码该褐藻胶裂解酶的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。所述褐藻胶裂解酶在降解褐藻胶或海藻酸钠中的应用，在制备褐藻寡糖中的应用。本法发明还公开了一种制备褐藻寡糖的方法：采用褐藻胶裂解酶降解褐藻胶制备褐藻寡糖，最适反应pH为9.0，最适反应温度为60℃，反应时间2 h，所得褐藻寡糖的聚合度为2～4。本发明的褐藻胶裂解酶，可以在温和的条件下裂解褐藻胶或海藻酸钠，酶活性高，且具有较好的温度稳定性，相较于已报道的褐藻胶裂解酶，可在底物溶解性较好的高温下进行反应，可高效降解褐藻胶制备褐藻寡糖。
本发明公开了一种褐藻胶裂解酶AlgFP及其制备方法和应用，其中褐藻胶裂解酶AlgFP的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示；其制备方法为将核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的褐藻胶裂解酶基因全合成后，构建至表达载体中，然后导入毕赤酵母细胞，诱导培养并获得分泌表达的褐藻胶裂解酶；该褐藻胶裂解酶可单独用于褐藻酸及其盐类的降解制备褐藻酸寡糖；或者所述褐藻胶裂解酶与其他褐藻胶裂解酶混合使用，协同降解褐藻酸及其盐类本发明获得的褐藻胶裂解酶对褐藻酸钠底物有较高的水解活性，摇瓶发酵产生的粗酶液即具有0.53ml(蛋白质含量约0.015mg)彻底降解1g褐藻酸钠的能力，具有良好的工业应用前景。
本发明涉及基因工程技术领域，具体的说是一种定向获得褐藻寡糖三糖产物的褐藻胶裂解酶及其应用。褐藻胶裂解酶的碱基序列如SEQ ID NO.1中碱基序列所示。所述褐藻胶裂解酶在定向降解褐藻获得褐藻寡糖三糖中的应用。本发明利用来源于海洋嗜热菌Defluviitalea phaphyphila sp.Alg1的褐藻胶裂解酶AL1761，通过生物酶解法降解获得的褐藻寡糖聚合度小于5，即褐藻寡糖三糖，进而在最大程度的保留了褐藻寡糖主要活性成分的同时，并将褐藻胶中的大分子转化为能被机体直接吸收的小分子，是环保、高效的加工工艺；本发明采用特定的酶定向获得褐藻寡糖三糖产物，本发明所述的褐藻胶裂解酶具有产物单一、酶活高、降解效率高的优点，具备良好的工业应用前景
