本发明公开了一种耐金属离子和有机溶剂的羧酸酯酶及其应用，属于酶工程领域。本发明将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的羧酸酯酶BaCEs04在大肠杆菌中异源表达，得到的羧酸酯酶BaCEs04在Zn2+，NH4+存在下，分别提高了24.3％和23.5％的酶活，其余金属离子Na+，K+，Mg2+，Ca2+，Cu2+，Fe3+对酶活几乎没有影响甚至有略微的提高，说明该羧酸酯酶在存在金属离子的环境中较为稳定。
本发明公开了一种漆酶及其基因和应用，属于基因工程技术领域。本发明的漆酶基因是经过对色齿毛菌Cerrena unicolor漆酶基因进行密码子优化后所得，核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明提供的漆酶基因通过转化黑曲霉重组表达，可在工业上实现大规模生产高酶活的漆酶，摇瓶培养最高酶活达到39U/ml，在7L发酵罐培养125h后，漆酶总酶活达9234U/ml。同时，本发明提供的漆酶与介体丁香酸甲酯对玉米赤霉烯酮有显著的破坏效果，有利于粮食运输和储备。
本发明公开了一种酶活提高的酮还原酶突变体及其应用，属于生物技术领域，其源于Meyerozyma guilliermondii的野生型酮还原酶，能将4‑氯乙酰乙酸乙酯转化生成(R)‑4‑氯‑3‑羟基丁酸乙酯，酮还原酶突变体与野生型序列相比具有更高的醇脱氢酶活性，与SEQ ID NO.8具有90％以上相似性。本发明的酮还原酶突变体具有明显的高比酶活，比野生型酮还原酶提高了2‑10倍，反应条件温和，对设备要求低，生产过程无需高温或者冷却，能耗低，由于酶催化具有高效，专一的选择性，纯化方便，此外反应绝大部分溶剂为水，无需加入乙酸丁酯等溶剂形成双相反应体系，三废排放低，制备过程绿色环保。
本发明公开了一种深海沉积物来源新型酯酶EST4及其编码基因与应用。一种深海来源酯酶基因est4由宏基因组筛选获得，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码的酯酶EST4氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明所述的酯酶基因经异源表达后，底物为对硝基苯酚己酸酯(C6)时催化活性最高，酶活为56.1U/mg。酯酶EST4酯酶催化水解最适温度为35℃～40℃；在Ca2+、Co2+、Sr2+和Zn2+存在下酶学活性增大。该酯酶可应用于手性药物合成、食品加工及食品风味改良、废水处理和洗涤工业等工业生产。
