本发明提供一种南极土壤来源的酯酶及其编码基因和应用，属于基因工程和酶工程技术领域。所述酯酶E33‑5650的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明从南极土壤中筛选克隆获得编码酯酶E33‑5650的基因，通过对其表达蛋白进行研究发现，该酯酶蛋白在高温条件下依然稳定且具有很高的酶活，从而有效克服了一些高温条件下水解脂类物质酯酶的活性降低且不稳定的问题
本发明涉及一种深海沉积物来源酯酶Est2及其编码基因与应用。一种深海来源酯酶基因Est2由宏基因组筛选获得，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述的酯酶基因经异源表达后，底物为对硝基苯酚己酸酯(C6)时催化活性最高，酶活达386U/mg。酯酶Est2反应温度范围为10～55℃，最适反应温度为45℃，反应pH范围为6.0～10.0，最适pH为7.5，EDTA和吐温20可增强其活性。该酯酶可广泛应用于手性药物合成、食品加工及食品风味改良、油脂水解、皮革绢纺原料脱脂、废水处理、洗涤工业等领域。
本发明涉及一种深海来源羧酸酯酶DMWf18‑543及其编码基因与应用。一种深海来源羧酸酯酶DMWf18‑543编码基因由宏基因组筛选获得，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明所述的羧酸酯酶基因经异源表达后，底物为对硝基苯酚丁酸酯(C4)时催化活性最高，酶活达444U/mg。羧酸酯酶DMWf18‑543催化水解温度范围为15～55℃，优选为30～45℃；所述水解的pH值为5.0～10.0，优选为6.0～8.0。该酯酶可广泛应用于手性药物合成、食品加工及食品风味改良、油脂水解、皮革绢纺原料脱脂、废水处理、洗涤工业等领域。
本发明涉及一种深海来源羧酸酯酶DMWf18‑558及其编码基因与应用。羧酸酯酶DMWf18‑558编码基因由宏基因组筛选获得，其核苷酸序列和氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。将此羧酸酯酶基因异源表达后，在底物为对硝基苯酚己酸酯(C6)时催化活性最高，酶活可达367U/mg。羧酸酯酶DMWf18‑558催化水解温度范围为15～40℃，优选为15～35℃；催化水解pH值为3.0～10.0，优选为6.5～9.0；催化水解NaCl浓度在0.5～3M，优选为0.5‑1M。该酯酶可广泛应用于油脂水解、药物合成代谢、食品加工、废水处理、洗涤工业等领域。
本发明公开了一种阿魏酸酯酶及其突变体与应用。所述的阿魏酸酯酶具有如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2或SEQ ID No.3所示的氨基酸序列，其性质稳定，反应pH为6‑8，反应温度为37‑54℃。本发明在所述的阿魏酸酯酶的氨基酸序列的基础上分别通过增加阿魏酸酯酶中二硫键的数量、改变其碳水化合物结合模块的侧链基团以及改变催化结构域电荷，得到了三个阿魏酸酯酶突变体N.1‑300、N.7‑16、N.9‑98，与原始阿魏酸酯酶相比，这三个突变体的比酶活均得到明显提高。本发明得到的阿魏酸酯酶以及突变体性质稳定，有助于阿魏酸酯酶的工业化应用。
