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[发明专利]一种利用无定形蔗糖酶催化合成蔗糖酯的方法-CN202110333096.3在审
发明人：陈小龙;张珂睿;詹蓉;宋贝贝;陆跃乐;朱林江 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2021-03-29 - 公布日： 2021-06-11 - 主分类号： C12P19/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用无定形蔗糖酶催化合成蔗糖酯的方法。所述方法先在蔗糖‑酪蛋白酸钠溶液中加入适量的有机溶剂及表面活性剂，再将该混合溶液在合适的条件下进行喷雾干燥获得的无定形蔗糖作为脂肪酶催化合成蔗糖酯的底物，可大幅提高蔗糖酯的产量。本发明采用Lipozyme TL IM催化合成蔗糖酯，酶活高、酶用量少且反应条件温和；另外，本发明采用低毒、低沸点的叔戊醇或叔丁醇作为反应介质，使产品蔗糖酯的安全性大大提高，可应用于食品及日化品领域，是一种绿色、高效、低成本的蔗糖酯生产方式。
一种利用无定形蔗糖催化合成方法

[发明专利]一种产甾醇酯酶的枝孢菌及产酶方法-CN201811150218.X有效
发明人：王鹏;江晓路;乔乐克;杜春影 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2018-09-29 - 公布日： 2022-06-24 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明公开了一株筛选获得的产甾醇酯酶的枝孢菌（Cladosporium sp.）DZ16，保藏号CCTCC M 2016685。在发酵前期采用第一步低盐液态活化培养提高菌株生物量，后期借助于第二步多因子复合作用，诱导菌株分泌酶蛋白，提高酶活。本发明菌株发酵所产生的甾醇酯酶在医疗检测、食品、制浆造纸工业、环保等领域具有良好的应用潜力。
一种产甾醇酯酶枝孢菌方法

[发明专利]一种植酸酶突变体及其应用-CN201610467505.8有效
发明人：赵丽芳;郭宝林;苏俊兵;黄丽丽 -专利权人：北京昕大洋科技发展有限公司
申请日： 2016-06-24 - 公布日： 2019-04-26 - 主分类号： C12N9/16 文献下载
摘要：本发明公布了一种新型植酸酶突变体，属于生物技术领域。该突变体在耐温性及酶活等方面均表现出良好的特性，具有较好的应用前景。该突变体经甲醇诱导96h发酵液酶活可达28000U/mL，较原始植酸酶提高180％；植酸酶经75℃处理后存留酶活保留在90％以上；突变体耐受85℃制粒温度，存留酶活达到85％以上，适应颗粒饲料生产要求。
种植突变体及其应用

[发明专利]一种胶黏物去除酶-CN202210078215.X在审
发明人：王殿升 -专利权人：哈德逊（苏州）水技术有限公司
申请日： 2022-01-24 - 公布日： 2022-04-22 - 主分类号： C12N9/24 文献下载
摘要：本发明一种胶黏物去除酶，其组分按质量百分比计，包括：包括：纤维素酶25‑30％、淀粉酶5‑10％、果胶酶20‑25％、木聚糖酶20‑25％、丙二醇10‑15％、水3‑12％。纤维素酶的酶活为10000～12000U/ml，淀粉酶的酶活为1000～1200U/ml，果胶酶的酶活为500～700U/ml，木聚糖酶的酶活为1800～2000U/ml。
一种胶黏物去除

[发明专利]一种利用固定化脂肪酶制备共轭亚油酸甘油酯的方法-CN201410123647.3有效
发明人：吴文忠;杨大苹;伏萃翠;徐维锋;姜书华;洪永德 -专利权人：大连医诺生物有限公司
申请日： 2014-03-28 - 公布日： 2014-06-11 - 主分类号： C12P7/64 文献下载
摘要：本发明提供了一种固定化脂肪酶法制备共轭亚油酸甘油酯的方法。采用含有部分游离脂肪酸的共轭亚油酸甲酯/乙酯与甘油为原料，固定化脂肪酶为催化剂，前期共轭亚油酸酯与甘油交替进料，有效地增加甘油与固定化酶的接触几率，增加反应效率，后期共轭亚油酸酯与甘油混合进料的方法制备共轭亚油酸甘油酯，由于游离脂肪酸与甘油反应生成水分子，有利于酶活的发挥，加快了反应效率，同时反应过程中利用充入氮气或抽真空的方式在线脱甲醇或乙醇，大大缩短反应时间，整个制备过程无需添加任何有机试剂，不会带来任何有机溶剂的残留与已知的甘油酯的制备方法相比，本发明的方法更简单、成本更低、得到的共轭亚油酸甘油酯产品品质更高，适合工业化生产。
一种利用固定脂肪酶制备共轭油酸甘油酯方法

[发明专利]一种嗜热耐高温的甘油酸激酶及其制备方法与应用-CN200610068967.9无效
发明人：申玉龙;刘波 -专利权人：山东大学
申请日： 2006-09-28 - 公布日： 2007-03-14 - 主分类号： C12N15/54 文献下载
摘要：该酶的最适酶活温度为45℃，具有较为宽的酶适应温度，在20－50℃具有很高的酶活；该酶的最适酶活pH为2.5，在酸性条件下具有很高的酶活。该酶能够利用ATP，GTP，CTP，UTP及ADP作为磷酸供体。该酶的制备方法，包括质粒、菌株与培养基的选择，PCR扩增及重组质粒的构建，基因的诱导表达与蛋白质的纯化。该酶具有极高的热稳定性，可用于医药、生物工程领域2－磷酸甘油酸的制备。
一种耐高温甘油激酶及其制备方法应用

[发明专利]一种隶属于R型水合酶的基因片段及其编码蛋白与应用-CN201310091588.1有效
发明人：张修国;王会征 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2013-03-20 - 公布日： 2014-02-19 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明公开了一种隶属于R型水合酶的基因片段及其编码蛋白与应用。本发明所提供的隶属于R型水合酶的基因片段编码的蛋白是如下（a）或（b）：（a）由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）将序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加，实验证明，本发明所提供的MaoC-Del63-88蛋白对于底物巴豆酰辅酶A（Crotonyl-CoA）具乙酰辅酶A水合酶活性，其酶活达126.7U/mg，显著高于原始MaoC蛋白的酶活（58.1U/mg本发明所提供的MaoC-Del63-88蛋白及其编码基因可用于有效合成聚羟基脂肪酸酯（PHA），为进一步应用绿色塑料聚羟基脂肪酸酯（PHA）提供了一定的技术储备。
一种隶属于水合基因片段及其编码蛋白应用

[发明专利]黄绿木霉产纤维素酶的酶学性质研究方法-CN201010157740.8无效
发明人：关东明;邓传峰;罗方;朱书全;托马斯·艾米登;刘世界 -专利权人：中国矿业大学（北京）
申请日： 2010-04-21 - 公布日： 2010-10-06 - 主分类号： C12N9/42 文献下载
摘要：本发明提供了一种黄绿木霉产纤维素酶的酶学性质研究方法。该方法是先将黄绿木酶在液体发酵培养基内进行发酵，将所得的发酵液离心，得到粗酶液。在20℃到70℃的温度范围内、pH＝4.8时测粗酶液的CMC酶活，得到最适酶反应温度。在上述所得的最合适酶反应温度、4.0到8.0的pH范围内测粗酶液的CMC酶活，得到最适酶反应pH。将新鲜酶液在pH＝7.0，10℃到70℃的温度范围内保持，在最合反应温度和pH条件下测CMC酶活，得到黄绿木霉产纤维素酶的最合适保持温度。将新鲜酶液在最合适保持温度，4.0到10.0的pH范围内保持，在最合适反应温度和pH条件下测CMC酶活，得到黄绿木霉产纤维素酶的最合适保持pH。
黄绿木霉产纤维素酶性质研究方法

[发明专利]一种热稳定性和比酶活提高的角蛋白酶突变体及其应用-CN201610908126.8有效
发明人：张娟;陈坚;方真;堵国成;任春慧 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-10-18 - 公布日： 2019-05-17 - 主分类号： C12N9/50 文献下载
摘要：本发明公开了一种热稳定性和比酶活提高的角蛋白酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明的片段融合突变体DDFD在50到70℃温度范围内，比酶活大于出发型突变体DDF，最大提升值接近20％。此外，突变体DDFD比酶活提升明显，达到6050U/mg，比出发型突变体DDF增加了2000多个酶活单位。因此本发明的角蛋白酶突变体具有显著提高的热稳定性和比酶活，比野生型角蛋白酶更具有应用的价值和潜力。
一种热稳定性提高角蛋白突变体及其应用

[发明专利]一种提高里氏木霉纤维素酶酶活的方法-CN201510795507.5有效
发明人：姚斌;苏小运;薛鲜丽;罗会颖;王亚茹;黄火清;柏映国;石鹏君;王苑 -专利权人：中国农业科学院饲料研究所
申请日： 2015-11-18 - 公布日： 2019-04-16 - 主分类号： C12N1/15 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种提高里氏木霉纤维素酶酶活的方法。包括在里氏木霉中表达外源的β‑葡萄糖苷酶基因NfBgl3A的步骤。本发明通过在里氏木霉中表达异源β‑葡萄糖苷酶，获得了纤维素酶酶活显著提高的转化子。转化子在MM‑Avicel中培养6天后，其纤维素酶的滤纸酶活0.18U/ml，较出发菌株分别提高了3.7倍。CMC酶活0.40U/ml，较出发菌株分别提高了2.9倍。
一种提高里氏纤维素酶方法

[发明专利]一种提高乳酸菌硫氧还蛋白还原酶酶活的方法-CN202010082832.8在审
发明人：徐颖;贺佳璇;许牡丹;邬淑芳;缑敬轩;张婷 -专利权人：陕西科技大学
申请日： 2020-02-07 - 公布日： 2020-05-22 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：本发明提供一种提高乳酸菌硫氧还蛋白还原酶酶活的方法，使用亚硒酸钠对乳酸菌进行富硒培养，通过测定硫氧还蛋白还原酶的酶活，发现通过富硒培养后提高了保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌和植物乳杆菌的硫氧还蛋白还原酶酶活
一种提高乳酸菌硫氧还蛋白还原酶方法

[发明专利]一种酶活提高的蔗糖合酶突变体-CN202310700317.5在审
发明人：丁重阳;赵丽婷;马忠宝;陈磊;徐萌萌;王琼;顾正华;石贵阳 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-06-13 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种酶活提高的蔗糖合酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明通过基因工程手段对蔗糖合酶进行改造，得到酶活力提高的突变体V148S‑K769H，其比酶活为39U/mg，是野生型比酶活的2.2倍，满足工业化生产的需求。
一种提高蔗糖突变体

[发明专利]一种纯化重组α-淀粉酶的方法-CN201810896403.7在审
发明人：周志江;赵芳坤;杜仁鹏;韩烨;肖华志 -专利权人：天津大学
申请日： 2018-08-08 - 公布日： 2018-12-21 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种纯化重组α‑淀粉酶的方法，构建α‑淀粉酶‑AcmA融合蛋白重组表达载体，α‑淀粉酶与AcmA锚定区之间添加凝血酶酶切位点，诱导表达后利用GEM(革兰氏阳性基质)进行分离纯化，并通过蛋白酶的特异裂解，得到不含任何标签的重组α‑淀粉酶。该方法能够利用简单易得的GEM将重组α‑淀粉酶的进行纯化，简化操作步骤，降低酶活损失，能够得到不含任何标签的重组酶，具有良好好的酶活和蛋白得率。这种方法能够简化纯化操作，降低酶活损失，通过特异性蛋白酶裂解，能够得到不含标签的重组酶。
淀粉酶酶活标签重组酶裂解简化操作步骤特异性蛋白酶重组表达载体革兰氏阳性蛋白酶分离纯化酶切位点融合蛋白诱导表达锚定区凝血酶得率构建基质蛋白

[发明专利]一种重组酯酶、编码基因、载体、工程菌及应用-CN201510497747.7有效
发明人：张朝晖;卢亚南;陈小龙 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2015-08-13 - 公布日： 2018-11-13 - 主分类号： C12N9/18 文献下载
摘要：本发明涉及一种来自反硝化无色杆菌zjut1104的重组酯酶、编码基因、载体、工程菌及在催化农药中间体(R，S)‑2，6‑二甲基苯基氨基丙酸甲酯的不对称水解中的应用；所述酯酶的核苷酸序列为SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示，相应的氨基酸序列为SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示；本发明所述含重组酯酶基因的工程菌表达的酶活比原始菌株分别高了21.6倍和26.1倍，为超表达；本发明提供的重组酯酶EHesterase和BXesterase催化(R，S)‑2，6‑二甲基苯基氨基丙酸甲酯的不对称水解，当底物浓度为5％(m/v)时，37℃下反应3h，底物的转化率分别是43.1％和53.2％，产物2，6
一种重组编码基因载体工程应用

[发明专利]一种利用RNA干扰技术提高里氏木霉生产纤维素酶的方法-CN201510900044.4在审
发明人：姚斌;苏小运;王榕;薛鲜丽;罗会颖;黄火清;王亚茹;柏映国;石鹏君;王苑 -专利权人：中国农业科学院饲料研究所
申请日： 2015-12-08 - 公布日： 2016-05-25 - 主分类号： C12N9/42 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程领域，具体涉及利用RNA干扰技术提高里氏木霉产纤维素酶酶活的方法。本发明通过对里氏木霉的cre1基因进行RNA干扰，获得了纤维素酶酶活显著提高的转化子。转化子在MM-Avicel中培养4.5天后，其中酶活最高的一株转化子，其纤维素酶的滤纸酶活0.51U/mL，较出发菌株分别提高了1.2倍。CMC酶活2.78U/mL，较出发菌株提高了1.4倍。MUC酶活0.65U/mL，较出发菌株提高了7.9倍。
一种利用 rna 干扰技术提高里氏生产纤维素酶方法