本发明公开了一种酶法不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯的方法。即以氨基酸序列如SEQIDNO:2所示的羰酰还原酶为催化剂,以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物,以NADPH为辅因子,不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯。本发明首次将氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的羰酰还原酶应用于4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中,取得很好的效果,其酶活高达7.3U/mg,其对底物的得率高达95%、
本发明提供一种羰基还原酶突变体及其制备方法、应用和(R)‑6‑羟基‑8‑氯辛酸乙酯的制备方法,所述羰基还原酶突变体为发生了氨基酸突变的羰基还原酶;所述羰基还原酶包括SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列本发明通过在原始羰基还原酶序列基础上引入突变,使得酶活提高,立体选择性提高,能够在较为温和的条件下高收率高纯度得到(R)‑6‑羟基‑8‑氯辛酸乙酯,降低了生产成本,适用于工业化生产。
本发明公开了一种醛酮还原酶突变体及其在不对称还原6‑氰基‑(5R)‑羟基‑3‑羰基己酸叔丁酯制备6‑氰基‑(3R,5R)‑二羟基己酸叔丁酯中的应用,所述醛酮还原酶突变体是将SEQ ID No.2所示氨基酸第本发明制备的醛酮还原酶突变体pKlAKR‑I125V‑S30P‑Q212R‑I63W的比酶活较母本醛酮还原酶提升了1.31倍,最大底物6‑氰基‑(5R)‑羟基‑3‑羰基己酸叔丁酯投料达到80g/L,该醛酮还原酶突变体更具工业应用前景