本发明涉及酶催化技术领域,尤其是一种热稳定的天冬氨酸β‑脱羧酶在L‑丙氨酸制备中的应用,所述天冬氨酸β‑脱羧酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示,在天冬氨酸β‑脱羧酶的存在下,45℃‑60℃下可催化L‑天冬氨酸生成L‑丙氨酸。本发明采用耐热性更好、酶活更高的天冬氨酸β‑脱羧酶制备L‑丙氨酸,可有效减少废水排放,并有效降低了工业生产L‑丙氨酸的成本,提高了反应效率及产物的光学纯度。
本发明涉及酶催化技术领域,尤其是一种高温制备L‑丙氨酸的方法,在天冬氨酸β‑脱羧酶突变体的存在下,45℃‑60℃下可催化L‑天冬氨酸生成L‑丙氨酸。其中,所述天冬氨酸β‑脱羧酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。本发明采用耐热性更好、酶活更高的天冬氨酸β‑脱羧酶突变体制备L‑丙氨酸,可有效减少废水排放,并有效降低了工业生产L‑丙氨酸的成本,提高了反应效率及产物的光学纯度。
本发明涉及酶催化技术领域,尤其是一种天冬氨酸β‑脱羧酶突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示,与野生型天冬氨酸β‑脱羧酶相比具有更高的热稳定性。本发明的天冬氨酸β‑脱羧酶突变体在45℃‑60℃的活性更持久,能有效缩短反应周期;该突变体对反应的冷却系统要求不高,因而降低了能耗并降低了成本。而且可在室温下运输保存,有效延长保质期。另外,在高温催化反应的条件下,避免了杂菌的生长机会,从而减少了细菌的代谢产物对产品的污染,有助于增加底物的溶解度,提高单位体积的生产效率。
本发明涉及酶催化技术领域,尤其是一种热稳定的天冬氨酸β‑脱羧酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示,与野生型天冬氨酸β‑脱羧酶相比具有更高的热稳定性。本发明的天冬氨酸β‑脱羧酶在45℃‑60℃的活性更持久,能有效缩短反应周期;而且可在室温下运输保存,有效延长保质期。另外,在高温催化反应的条件下,避免了杂菌的生长机会,从而减少了细菌的代谢产物对产品的污染;有助于增加底物的溶解度,提高了单位体积的生产效率。
本发明公开了一种用于生产(R)‑4‑氯‑3‑羟基丁酸乙酯的酮还原酶突变体,属于生物技术领域,其源于Meyerozyma guilliermondii的野生型酮还原酶,能将4‑氯乙酰乙酸乙酯转化生成(R)‑4‑氯‑3‑羟基丁酸乙酯,与野生型序列相比具有更高的醇脱氢酶活性,该酮还原酶突变体的序列为SEQ ID NO.2,该酮还原酶突变体的酶活性比野生型酮还原酶的活性至少增强2‑10倍。本发明酮还原酶突变体和编码这种突变体的多核苷酸可以使用本领域技术人员通常使用的方法制备。突变体可以通过使编码该酶的体外重组、多核苷酸诱变、DNA改组、易错PCR和定向进化方法等获得。
本发明公开了一种酶活提高的酮还原酶突变体及其应用,属于生物技术领域,其源于Meyerozyma guilliermondii的野生型酮还原酶,能将4‑氯乙酰乙酸乙酯转化生成(R)‑4‑氯‑3‑羟基丁酸乙酯,酮还原酶突变体与野生型序列相比具有更高的醇脱氢酶活性,与SEQ ID NO.8具有90%以上相似性。本发明的酮还原酶突变体具有明显的高比酶活,比野生型酮还原酶提高了2‑10倍,反应条件温和,对设备要求低,生产过程无需高温或者冷却,能耗低,由于酶催化具有高效,专一的选择性,纯化方便,此外反应绝大部分溶剂为水,无需加入乙酸丁酯等溶剂形成双相反应体系,三废排放低,制备过程绿色环保。