本发明公开了一种磷脂酶A2的应用，所述磷脂酶A2的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明发现通过基因工程菌异源表达的西班牙糖丝菌来源的磷脂酶PLA2‑SE拥有较高酶活、高纯度，且将其与纤维素酶、果胶酶、木聚糖酶复配的方式对造纸原料楮皮的脱胶除杂效果进行验证，结果表明PLA2‑SE具有优异的脱胶去杂质能力，在造纸方面有着广阔的工业应用前景。
本发明公开了一种海洋链霉菌脂肪酶突变体及其应用，所述海洋链霉菌脂肪酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明通过对海洋链霉菌属脂肪酶的第40位和第237位进行单点突变和双点突变，发现其双突变体G40D/T237R脂肪酶在酯化合成甘油酯时，偏甘油酯/甘油三酯的比例可达到7.51，远远超过野生型脂肪酶的偏甘油酯/甘油三酯的比例，具有更好的合成偏甘油酯的酯化活力，可以广泛应用于偏甘油酯的生产。
本发明公开了一种非特异性过氧合酶突变体及其编码基因和应用，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。在本发明中，通过对非特异性过氧合酶rDcaUPO进行定点突变后发现，突变体rDcaUPO‑A161C对双氧水的耐受性增强，在10mM双氧水中孵育14h，半衰期为野生型的6倍，在100mM的双氧水中孵育处理2h后，仍能维持较高的酶活。因此，本发明的非特异性过氧合酶突变体可在生物催化过程中应用，具有良好的稳定性能，可在应用过程中寿命延长和提高催化效率，更适用于工业领域上的应用。
本发明公开了一种脂肪酸脱羧酶OleTPM的突变体及其应用，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示或所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。本发明发现，突变体OleTPM‑F291W和突变体OleTPM‑F291Y对C18饱和脂肪酸的脱羧效率相较野生型OleTPM有了大幅度提升，因此，OleTPM突变体不仅丰富了P450FADCs的种类，增添特异性催化长链脂肪酸脱羧生成α‑烯烃的OleT酶种类，为P450FADCs的进一步工程设计提供了重要的指导，在α‑烯烃生物烃的生产中有着广阔的工业应用前景。
本发明公开了一种偏甘油酯单酯酶突变体及其编码基因和应用，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.5所示。本发明通过在野生型偏甘油酯单酯酶EstGtA2中引入合适的单点突变，获得了偏甘油单酯酶突变体EstGtA2‑S147G和EstGtA2‑S147A；同一条件下，野生型偏甘油酯单酯酶的酯化率为48.86％，而偏甘油单酯酶突变体EstGtA2‑S147G的酯化率为65.93％，偏甘油单酯酶突变体EstGtA2‑S147A的酯化率为63.80％，酯化率显著提高的同时且水解比酶活并没有降低，更适合于工业化应用。
本发明公开了一种来源于南极细菌的磷脂酶D突变体及其应用，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:8。本发明所构建的突变体S148C‑T206C和D225C‑A328C相比于野生型酶蛋白，在保持其最适反应温度条件不变的情况下，将其在最适反应温度条件下的半衰期提高到原来的1.4和2.0倍。S148C‑T206C和D225C‑A328C叠加突变后，其在最适反应温度条件下的半衰期提高到原来的3.2倍，且酶活力提高到原来的1.4倍。本发明获得的MsPLD突变体可适用于磷脂改性，生产磷脂酸及各类天然稀有磷脂和非天然磷脂化合物，应用于生物、食品、医药、日化等领域。
本发明公开了一种海洋链霉菌磷脂酶D突变体和应用，所述的磷脂酶D突变体是在氨基酸序列为SEQ ID NO:1的基础上单点突变380位点氨基酸所得。本发明磷脂酶D突变体酶活力显著提高，实验测定突变体1(S380A)的酶活力是野生型的2.4倍，突变体2(S380F)的酶活力是野生型的1.1倍，突变体3(S380V)的酶活力是野生型的2.6倍，突变体4(S380M)的酶活力是野生型的1.2倍，突变体5(S380L)的酶活力是野生型的1.6倍。同时，本发明突变体的催化效率也显著提高，酶活力和催化性能的改善进一步提升了该酶的工业利用价值。
