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[发明专利]一种调味料复合鲜味剂及其制备方法-CN201810953790.3有效
发明人：潘世朝;李志强;刘世亭 -专利权人：厦门璞真食品有限公司
申请日： 2018-08-21 - 公布日： 2019-08-09 - 主分类号： C12N9/64 文献下载
摘要：本发明提供了一种双水相萃取‑超声波联合分离提纯木瓜蛋白酶的方法，具体操作步骤为：将木瓜汁采用反复冻融的方法破壁后收集上层清液得到木瓜蛋白酶粗提液，再采用羟甲基纤维素钠‑无机盐双水相萃取，并置于超声波中超声15‑20分钟，再静置8‑15分钟，取上相在截留相对分子质量为5000的透析膜中透析12‑20小时后，再经冷冻干燥得木瓜蛋白酶粉末。本发明双水相萃取和超声波联合的方法对木瓜蛋白酶进行提纯，具有选择性高，体系分相速度快的优点，且操作简便，设备常规，适合工业化生产。本发明所述方法制得木瓜蛋白酶末中木瓜蛋白酶纯度高达97.1％，总收率高达84.2％。
木瓜蛋白酶双水相萃取超声波分离提纯羟甲基纤维素钠无机盐反复冻融上层清液设备常规粗提液木瓜汁透析膜总收率提纯超声破壁透析截留联合

[发明专利]一种高活性木瓜蛋白酶的制备工艺-CN201710042619.2在审
发明人：范远景;龚涛;刘培志;王明和;姚勇;徐柳;杨簦玲;娄鹏祥;童今注 -专利权人：合肥工业大学
申请日： 2017-01-20 - 公布日： 2017-05-31 - 主分类号： C12N9/50 文献下载
摘要：本发明公开一种高活性木瓜蛋白酶制备工艺。包括以下操作步骤（1）将新鲜宣木瓜洗净、去皮仔，分割成小块，加入蒸馏水，打浆。（2）加入复合酶（纤维素酶和果胶酶）搅拌均匀，酶解。（3）抽滤，得新鲜木瓜汁。（4）将新鲜木瓜汁经离心取上清液；（5）上清液加入乙醇和酶活保护剂（L‑cys、EDTA），调节PH为6.0‑8.0，静置，得到混合溶液；混合溶液离心取沉淀，冷冻干燥至恒重得木瓜蛋白酶粗品。本发明采用榨汁、复合酶解、添加酶活保护剂等工艺，显著提高了木瓜汁中蛋白酶的含量，比较常规酶制剂提取方法，本发明木瓜蛋白酶的酶活达到1.55万U/g；通过应用试验，本发明木瓜蛋白酶的粗产品能够显著改善肉制品的嫩度
一种活性木瓜蛋白酶制备工艺

[发明专利]靶向2019新型冠状病毒的木瓜蛋白酶样蛋白酶PLpro的稳定多肽类蛋白共价抑制剂-CN202111179976.6有效
发明人：李子刚;尹丰;刘娜;章亦弛 -专利权人：深圳湾实验室坪山生物医药研发转化中心;北京大学深圳研究生院;深圳湾实验室
申请日： 2021-10-09 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C07K5/103 文献下载
摘要：本发明提供了一种靶向2019新型冠状病毒的木瓜蛋白酶样蛋白酶的稳定多肽类蛋白共价抑制剂。本发明还提供了上述稳定多肽类蛋白共价抑制剂在制备用于抑制木瓜蛋白酶样蛋白酶PLpro酶活的药物中的用途。本发明采用锍盐稳定多肽与小分子偶联的策略发明了新型的靶向木瓜蛋白酶样蛋白酶PLpro的稳定多肽类蛋白共价抑制剂。本发明的多肽类蛋白共价抑制剂可以有效抑制木瓜蛋白酶样蛋白酶PLpro活性，从而阻断其切割ISG15产生的免疫逃逸反应。
靶向 2019 新型冠状病毒木瓜蛋白酶蛋白酶 plpro 稳定多肽蛋白共价抑制剂

[发明专利]一种鸭肠腌制用木瓜蛋白酶式调味品及其制备方法-CN202011536037.8在审
发明人：唐浩 -专利权人：唐浩
申请日： 2020-12-23 - 公布日： 2021-04-20 - 主分类号： A23L27/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种鸭肠腌制用木瓜蛋白酶式调味品及其制备方法。本发明由以下重量份组成，木瓜蛋白酶30～40份、菠萝蛋白酶20～25份、食盐20～23份、葡萄糖17～21份，红曲米提取物0.5～1.5份，所述木瓜蛋白酶通过喷雾干燥制备而成，所述菠萝蛋白酶是采用新鲜的菠萝皮制备而成，通过离心去除部分杂质后再进行喷雾干燥，所生产出的成品酶活力相对高，达到100万单位/g左右，杂质相对也较少，色泽相对也较白，制得木瓜蛋白酶，实现了对木瓜蛋白酶纯度的提升，提高了食用口感，同时提高了其酶活性
一种腌制木瓜蛋白酶调味品及其制备方法

[发明专利]一种木瓜蛋白酶制剂及固定化方法-CN201410009414.0有效
发明人：娄文勇;宗敏华;曹诗林;黄宇美 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2014-01-08 - 公布日： 2014-04-30 - 主分类号： C12N11/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种木瓜蛋白酶制剂及固定化方法，包括如下步骤：（1）将纤维素纳米晶基材分散在pH为5-9的缓冲溶液中，配置成基材溶液；（2）将（1）中所得的基材溶液与木瓜蛋白酶溶液或木瓜蛋白酶浆状物混合，在0-35℃振荡混合1-60min，得到混合悬浊液；（3）将（2）所得的混合悬浊液与聚丙烯酰胺溶液混合，震荡1-60min；（4）将（3）中所得的固定化木瓜蛋白酶洗涤后冷冻干燥即得。本发明具有固定化木瓜蛋白酶固定化效率高、酶活回收率高，操作简便，条件温和等优点。
一种木瓜蛋白酶制剂固定方法

[发明专利]一种利用木瓜蛋白酶检测重金属污染的方法-CN201110169299.X无效
发明人：李秀婷;滕超;朱运平 -专利权人：北京工商大学
申请日： 2011-06-22 - 公布日： 2011-12-21 - 主分类号： C12Q1/37 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用木瓜蛋白酶酶抑制法测定重金属浓度的方法。本发明所提供的重金属浓度的方法，包括以下步骤：1)自未成熟的番木瓜提取木瓜蛋白酶；2)以Folin法测定蛋白酶酶活；将不同浓度的重金属与木瓜蛋白酶混合，40℃保温30min后测定酶活抑制率；制作工作方程3)将待测样品稀释至合适浓度，按照步骤2)测定木瓜蛋白酶酶活；利用2)得到的工作方程计算样品中的重金属浓度。
一种利用木瓜蛋白酶检测重金属污染方法

[发明专利]一种木瓜蛋白酶粗酶的分离方法-CN201811456489.8有效
发明人：磨光庭;卢福燊 -专利权人：广西南宁天绿生物制品有限公司
申请日： 2018-11-30 - 公布日： 2020-07-31 - 主分类号： C12N9/50 文献下载
摘要：本发明公开了一种木瓜蛋白酶粗酶的分离方法，包括如下步骤，(1)木瓜预处理；(2)湿法珠磨破碎；(3)冷冻离心初滤；(4)低温真空干燥；(5)饱和盐析。本发明的工艺流程更加优化，能够得到更多的木瓜乳汁，在制备过程中能够有效防止褐变，有效的保护木瓜蛋白酶的巯基，防止酶活性降低，最后制得的木瓜蛋白酶的酶活性可达到60万u/g以上。
一种木瓜蛋白酶分离方法

[发明专利]一种改性聚乙二醇‑酒石酸钠双水相萃取分离提纯木瓜蛋白酶的方法-CN201610474840.0在审
发明人：任新年 -专利权人：瑞安市智造科技有限公司
申请日： 2016-06-22 - 公布日： 2016-11-23 - 主分类号： C12N9/50 文献下载
摘要：本发明提供了一种改性聚乙二醇‑酒石酸钠双水相萃取分离提纯木瓜蛋白酶的方法，将木瓜汁采用反复冻融的方法破壁后收集上层清液得到木瓜蛋白酶粗提液，再向粗提液中加入改性聚乙二醇和酒石酸钠，经双水相萃取后分层，取上相置于截留相对分子质量为10000的透析膜中透析15‑20小时后得木瓜蛋白酶水溶液，再于‑15～‑10℃冷冻干燥8～15小时得木瓜蛋白酶粉末，其中改性聚乙二醇酯中的PEG平均分子量为600、1000或2000。本发明选用的双水相体系对木瓜蛋白酶的选择性高，体系分相速度快，不需借助离心机等设备即可快速分相，操作简便，设备常规，适合工业化生产，所得木瓜蛋白酶产品聚源较高纯度和收率。
一种改性聚乙二醇酒石酸钠双水相萃取分离提纯木瓜蛋白酶方法

[发明专利]一种酶活力稳定的液态木瓜蛋白酶制剂-CN201410708213.X在审
发明人：谢庆武;周宁 -专利权人：广西大学
申请日： 2014-11-27 - 公布日： 2015-04-01 - 主分类号： C12N9/96 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，本发明公开的一种酶活力稳定的液态木瓜蛋白酶制剂，是由按重量百分比的下列组分所组成：木瓜蛋白酶水溶液20～25％、糖醇1.0～80％、NaCl 0.1～0.2％、维生素C 0.1～本发明的液态木瓜蛋白酶制剂，在常温下贮存12个月，酶活力仍然保存95％以上，具有酶活力稳定性高的优点，而且该液态木瓜蛋白酶制剂的生产设备投入少、节能、用户使用方便、易于扩大产能。
一种活力稳定液态木瓜蛋白酶制剂

[发明专利]一种制备木瓜蛋白酶的方法-CN200410024540.X无效
发明人：王美岭 -专利权人：王美岭
申请日： 2004-08-09 - 公布日： 2005-03-23 - 主分类号： C12N9/50 文献下载
摘要：一种制备木瓜蛋白酶的方法，属生物技术领域。本发明的方法包括以下步骤：粗酶制备，粗酶活力达到100万单位/克以上；精酶制备，精酶活力达到200万单位/克以上；纯化酶制备，纯化酶活力达到300万单位/克以上；在此基础上制得木瓜凝乳酶，木瓜凝乳酶活力达到本发明的方法，木瓜蛋白酶提纯的纯度高，一般在200万单位/克以上，同时从中还可提取木瓜凝乳酶。用于纯化木瓜蛋白酶。
一种制备木瓜蛋白酶方法

[发明专利]一种天然木瓜蛋白酶的制备及在动物中的应用-CN202310126536.7在审
发明人：刘拥飞;刘子豪;周贞贞 -专利权人：湖南大唐生物技术有限公司
申请日： 2023-02-16 - 公布日： 2023-04-11 - 主分类号： C12N9/50 文献下载
摘要：本发明提供一种天然木瓜蛋白酶的制备及在动物中的应用，涉及饲料添加剂技术领域。该天然木瓜蛋白酶的制备方法，包括以下步骤：将枯草芽孢杆菌粉剂、乳酸菌分别与蒸馏水稀释，然后添加大豆糖蜜，间歇搅拌后，得到菌液；再将木瓜去核后粉碎，得到的木瓜浆液中添加菌液，并进行恒温厌氧发酵，即得到含天然蛋白酶液体的木瓜发酵物；随后经过滤浓缩、低温喷雾干燥后，即得到含有天然木瓜蛋白酶的木瓜发酵物，再通过添加符合饲料法规的载体，均匀混合制成含有木瓜蛋白酶的产品。通过将木瓜经微生物发酵，制备成饲料添加剂，应用于动物饲料中，既提高了动物生产性能，也提高了饲料转化率，有效地节约了养殖的经济成本。
一种天然木瓜蛋白酶制备动物中的应用

[发明专利]一种利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法-CN201511017390.4在审
发明人：刘月伟 -专利权人：广西钦州市绿源天然食品加工有限公司
申请日： 2015-12-29 - 公布日： 2016-04-20 - 主分类号： C07C403/24 文献下载
摘要：本发明提供一种利用木瓜蛋白酶水解虾壳提取虾青素的方法，将虾壳洗净捣碎加入蒸馏水、木瓜蛋白酶酶解，冰水浴冷却灭酶，过滤，沉淀物中加入丙酮提取，过滤，将滤液旋蒸即得虾青素。本发明选用的木瓜蛋白酶是一种在酸性、中性、碱性环境下均能保持较高活性的蛋白酶，具有适应范围广、可操作性强、工艺优化简便等特点；而且木瓜蛋白酶可选择性降解甲壳素的GIcNAc-GleN糖苷键,有利于虾青素的提取
一种利用木瓜蛋白酶水解提取虾青素方法

[发明专利]一种从木瓜中提取蛋白酶的方法-CN201510793440.1在审
发明人：孙铭岐 -专利权人：孙铭岐
申请日： 2015-11-17 - 公布日： 2016-02-24 - 主分类号： C12N9/50 文献下载
摘要：本发明公开一种从木瓜中提取蛋白酶的方法，包括下述步骤：(1)挑选新鲜青木瓜，将之洗净，用刀片将其切成小块，然后用榨汁设备将新鲜木瓜块压榨，得到木瓜榨汁后加入保护剂。(2)将采集的木瓜榨汁用过滤设备过滤。(3)将过滤之后的滤液去杂质，并放入干燥设备内进行干燥处理而得木瓜蛋白酶粗品。(4)将木瓜蛋白酶粗粉碎与半胱氨酸溶液混合后放入研磨机进行研磨。(7)将盐析无放入低温半胱氨酸溶液中进行结晶(8)将结晶体溶于蒸馏水中进行重结晶，而得木瓜蛋白酶。本发明采用了研磨、盐析、结晶等精细方法，使得木瓜蛋白酶的纯度大大提高，能完全适用于食品、饲料、工业以及医学领域，且木瓜蛋白酶的活性大，产量高,成本低。
一种木瓜提取蛋白酶方法

[发明专利]一种木瓜酶制剂的高效制备方法-CN202110026367.0在审
发明人：白新鹏;刘亚文;黄庆成 -专利权人：海南大学
申请日： 2021-01-08 - 公布日： 2021-05-18 - 主分类号： C12N9/50 文献下载
摘要：本发明涉及一种木瓜酶制剂的高效制备方法，其包括以下具体操作步骤：S1、木瓜酶制剂粗品的制备；S2、木瓜蛋白酶粗酶制品溶液和木瓜脂肪酶粗酶制品的制备；S3、木瓜脂肪酶制剂的制备；S4、木瓜蛋白酶的分离纯化本发明实施例所述木瓜酶制剂的高效制备方法，其能够同时自木瓜原浆中分离纯化得到木瓜蛋白酶和木瓜脂肪酶，实现了资源的完整利用，制备步骤精简且设计合理，操作简单，制备过程中对酶的活性影响较小，制取得到的木瓜蛋白酶和木瓜脂肪酶纯度高、活性高且酶活性回收率高，且经强阳离子交换法分离后还能够对试剂进行回收，以便进行重复利用，有效降低成本，可扩大化制备，满足工业化需求。
一种木瓜酶制剂高效制备方法

[发明专利]一种发酵蛋白纯化多肽及用作猪饲料添加剂的用途-CN201811245117.0在审
发明人：白洪响 -专利权人：白洪响
申请日： 2018-10-24 - 公布日： 2019-02-01 - 主分类号： C12P21/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种发酵蛋白纯化多肽及用作猪饲料添加剂的用途。本发明提供的木瓜蛋白酶1000u～3000u发酵酶解肽、木瓜蛋白酶3000u～5000u发酵酶解肽、木瓜蛋白酶7000u～10000u发酵酶解肽、中性蛋白酶3000u～5000u发酵酶解肽和中性蛋白酶5000u～7000u发酵酶解肽可以显著降低育肥猪的料重比，显著改善育肥猪的腹泻情况，可以用作猪饲料添加剂改善育肥猪的生长性能和腹泻情况。
发酵酶猪饲料添加剂木瓜蛋白酶育肥猪中性蛋白酶纯化多肽发酵蛋白腹泻生长性能