“限制性内切酶位点”专利关键词查询_检索下载_查询列表_检索列表_行业专利分布_钻瓜专利网

钻瓜专利网为您找到相关结果13795052个，建议您升级VIP下载更多相关专利

[发明专利]一种偶数200bp梯度DNA分子量标准及其快速制备方法-CN200810015777.X无效
发明人：叶春江 -专利权人：济南大学
申请日： 2008-05-07 - 公布日： 2009-11-11 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：通过全新的基因工程手段构建一种超级质粒，通过大肠杆菌发酵和限制性内切酶酶切的方法制备一种偶数200bp梯度DNA分子量标准。DNA分子量标准是由7条DNA带组成的限制性内切酶酶切混合物，长度分别为：400bp、600bp、800bp、1000bp、1400bp、2000bp、3000bp；各条DNA带的浓度(质量)之间具有一定的比列关系快速制备方法包括7条DNA带是以质粒pYE9600酶切对象，通过大肠杆菌发酵和碱裂解法提取目标质粒pYE9600，经过纯化，用限制性内切酶EcoRI进行酶切消化，从而释放其中所含的200bp系列片段。
一种偶数 200 bp 梯度 dna 分子量标准及其快速制备方法

[发明专利]一种鉴别迟眼蕈蚊与异迟眼蕈蚊幼虫的PCR鉴定引物及其鉴定方法-CN201310192776.3无效
发明人：褚栋;于毅;国栋;陶云荔 -专利权人：青岛农业大学
申请日： 2013-05-22 - 公布日： 2013-08-21 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种鉴别迟眼蕈蚊与异迟眼蕈蚊幼虫的PCR鉴定引物及其鉴定方法，步骤如下：（1）提取韭蛆与菌蛆基因组DNA；（2）以韭蛆与菌蛆基因组DNA为模板对其线粒体COI基因进行PCR扩增；（3）对步骤（2）制得的PCR产物用限制性内切酶EcoRⅤ酶切，得酶切产物；（4）对步骤（3）制得的酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。本发明所述的限制性内切酶为常用的限制性内切酶，为筛选韭蛆与菌蛆提供了简便稳定的酶切标记，同时探索建立了韭蛆与菌蛆的鉴别技术，为今后的韭蛆与菌蛆鉴定、种群动态监测以及综合防控奠定了基础。
一种鉴别迟眼蕈蚊异迟眼蕈蚊幼虫 pcr 鉴定引物及其方法

[发明专利]一种鉴别日光蜂不同遗传支系的引物及鉴别方法-CN201310026079.0无效
发明人：周洪旭;褚栋;张瑞明;国栋;陶云荔 -专利权人：青岛农业大学
申请日： 2013-01-23 - 公布日： 2013-05-08 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种鉴别日光蜂不同遗传支系的引物及鉴别方法，步骤如下：（1）提取日光蜂基因组DNA；（2）以日光蜂基因组DNA为模板对其线粒体COI基因进行PCR扩增；（3）对步骤（2）制得的PCR产物用限制性内切酶Alu I酶切，得酶切产物；（4）对步骤（3）制得的酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。本发明所述的限制性内切酶为常用的限制性内切酶，为筛选两种遗传支系的日光蜂提供了简便稳定的酶切标记，同时探索建立了两种遗传支系的日光蜂的鉴别技术，为今后的两种遗传支系的日光蜂的种群动态鉴定、生物学以及传播机制的研究奠定了基础
一种鉴别日光不同遗传引物鉴别方法

[发明专利]一种利用PCR-RFLP技术鉴别西花蓟马品系的方法-CN201110366091.7无效
发明人：于毅;褚栋;段惠生;张安盛;国栋 -专利权人：山东省农业科学院植物保护研究所
申请日： 2011-11-17 - 公布日： 2012-03-28 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种利用PCR-RFLP技术鉴别西花蓟马品系的方法，步骤如下：(1)提取西花蓟马基因组DNA；(2)以西花蓟马基因组DNA为模板对其线粒体COI基因进行PCR扩增；(3)对步骤(2)制得的PCR产物用限制性内切酶EarI酶切，得酶切产物；(4)对步骤(3)制得的酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。本发明所述的限制性内切酶为常用的限制性内切酶，为筛选两种类型西花蓟马提供了简便稳定的酶切标记，同时探索建立了两种类型西花蓟马的鉴别技术，为今后的两种类型西花蓟马的种群动态鉴定、生物学以及入侵机制的研究奠定了基础
一种利用 pcr rflp 技术鉴别西花蓟马品系方法

[发明专利]一种基于无缝克隆技术的克隆载体制备方法以及试剂盒-CN201810163345.7在审
发明人：庞一林;谭国强;吕建新;李江辉;李唐;张涛;孙倩倩;韩琴霞 -专利权人：温州医科大学
申请日： 2018-02-27 - 公布日： 2018-09-04 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：所述克隆载体的制备方法包括：PCR扩增获得目的基因，PCR产物的特征在于其两末端从外到里依次为任意大肠杆菌表达载体的多克隆位点中单一限制性内切酶酶切位点上/下游15‑20bp的同源序列和同一限制性内切酶识别序列；采用TA克隆的方法构建重组质粒；经同一限制性内切酶切割，回收T载体大片段，采用T4DNA连接酶使其自连后构建了pWMU‑19T系列载体。
克隆载体制备阳性克隆试剂盒构建限制性内切酶酶切位点限制性内切酶识别序列克隆大肠杆菌表达构建重组质粒限制性内切酶多克隆位点蓝白斑筛选技术优势目的基因同源序列载体构建高通量切割大片回收

[发明专利]DLK1基因标记检测西门塔尔牛胴体脂肪覆盖率的方法-CN201811616457.X有效
发明人：杨润军;王梦岩;赵志辉;房希碧;余湘 -专利权人：吉林大学
申请日： 2018-12-28 - 公布日： 2021-09-14 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明公开了一种DLK1基因标记检测西门塔尔牛胴体脂肪覆盖率的方法，以中国西门塔尔牛DLK1基因的DNA序列为模板，设计一对引物，进行严格的PCR反应体系进行样品的PCR扩增和电泳，通过测序筛查并找到2个SNP位点；群体中筛查DLK1‑478 C/T位点的限制性内切酶为Msp I，该酶限定的切割碱基为CCGG;筛查DLK1‑609 T/G位点的限制性内切酶为Ase I；中国西门塔尔牛群体中携带DLK1‑478 C/T位点T等位基因和TT突变基因型个体具有较高的脂肪覆盖率和较好的大理石花纹；及携带DLK1‑609 T/G位点的G等位基因和GG突变基因型个体具有较高的脂肪覆盖率。本发明DLK1基因两个突变位点可以作为预示中国西门塔尔牛脂肪覆盖率和大理石花纹性状遗传标记，用于肉用牛早期标记辅助选择。
dlk1 基因标记检测西门塔尔牛胴体脂肪覆盖率方法

[发明专利]一种融合基因原核表达中引物的生成方法-CN201310518850.6无效
发明人：王景文 -专利权人：王景文
申请日： 2013-10-29 - 公布日： 2014-02-19 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：具体方法为：首先根据基因库中小鼠CＲT和PD－1基因序列，设计2对特异性引物，以小鼠淋巴细胞CDNA为模板PCＲ克隆获得mCＲT、mPD1目的片段；其中在mCＲT上、下游引物分别引入NcotⅠ和BamHⅠ限制性内切酶位点，mPD1上、下游引物分别引入BamHⅠ和XholⅠ限制性内切酶位点。
一种融合基因表达引物生成方法

[发明专利]一种双基因干扰提高里氏木霉纤维素酶酶活的方法-CN201710045616.4有效
发明人：薛栋升;曾徐浩 -专利权人：湖北工业大学
申请日： 2017-01-22 - 公布日： 2019-11-08 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明公开了一种双基因干扰提高里氏木霉纤维素酶酶活的方法，属于基因工程技术领域。本发明方法为通过RNAi降低里氏木霉木聚糖酶基因、纤维素内切酶基因的表达，具体包括如下步骤：将两端有限制性内切酶识别位点且含有SEQ ID NO.1所示序列的干扰片段通过相应限制性内切酶和DNA连接酶构建到pSilent‑1上；将所构建的重组载体转化到里氏木霉中，转化有重组载体的里氏木霉纤维素酶酶活得到提高。本发明通过RNAi干扰序列的合理设计，不仅显著降低木聚糖酶的表达，还适度降低纤维素内切酶的表达、增强葡糖苷酶的表达，优化了纤维素酶酶系中三种酶的活性比例，提高了里氏木霉纤维素酶酶活。
一种基因干扰提高里氏纤维素酶方法

[发明专利]一种高效筛选单酶切基因表达载体的方法-CN200710043036.8无效
发明人：王海嵘;陈芳源 -专利权人：上海交通大学医学院附属仁济医院
申请日： 2007-06-28 - 公布日： 2008-12-31 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：一种高效筛选单酶切基因表达载体的方法，包括一个选择合适载体和限制性内切酶的过程，一个利用限制性内切酶对载体进行酶切的过程，一个选择插入基因片段的过程，一个利用限制性内切酶对基因片段进行单酶切的过程，将单酶切后的载体和单酶切后的基因片段转化感受态细胞本发明采用单酶切方法构建载体，转化细菌后使用特定设计的引物，进行PCR，根据菌落PCR的结果，直接筛选出正确构建的重组载体，减少了测序费用。
一种高效筛选单酶切基因表达载体方法

[发明专利]一种基于PCR-RFLP鉴定中药材鹿茸的方法-CN201510660734.7有效
发明人：黄璐琦;袁媛;蒋超;赵玉洋 -专利权人：中国中医科学院中药研究所
申请日： 2015-10-14 - 公布日： 2018-06-19 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明所提供的用于鉴定中药鹿茸的试剂盒，含有如下(a)或(b)所示的引物对，以及限制性内切酶DdeI或其同裂酶；(a)由序列表中序列1和序列2所示的两条单链DNA分子组成的引物对；(b)由将序列表中序列本发明通过分析中药鹿茸与其混伪品的细胞色素b基因序列，获得鹿茸与其混伪品的差异SNP位点，设计鉴别引物和对应的限制性内切酶，采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应技术实现了鹿茸及其混伪品的准确鉴别。
鹿茸引物伪品限制性内切酶单链DNA分子中药鹿茸限制性片段长度多态性聚合酶链反应中药材细胞色素b基因序列技术实现鉴别引物核苷酸试剂盒同裂酶鉴别分析

[发明专利]新型闭合线性双链DNA的体外制备技术-CN202210625551.1在审
发明人：赵晟;唐传青 -专利权人：宜明（苏州）细胞生物科技有限公司
申请日： 2022-06-02 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：提供了一种制备闭合线性双链DNA的方法，包括：(a)提供一条含目标序列和至少两个限制性内切酶的酶切位点的双链DNA，其中对于每个酶切位点，其切割位点位于其识别序列与目标序列之间，(b)用限制性内切酶消化双链
新型闭合线性 dna 体外制备技术

[发明专利]基于数字PCR检测母体血浆中胎儿游离DNA绝对拷贝数的方法及试剂盒-CN202010082009.7在审
发明人：沈燕龙;梁军;景奉香;吴东平 -专利权人：江苏圣极基因科技有限公司
申请日： 2020-02-06 - 公布日： 2020-05-15 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本申请提供了基于数字PCR检测母体血浆中胎儿游离DNA绝对拷贝数的方法，包括从孕妇外周血浆中获得总DNA，选择包含母胎甲基化差异基因位点序列和内参基因序列设计引物和探针；进行甲基化敏感限制性内切酶消化处理；在数字PCR装置中对包含母胎甲基化差异的基因位点序列和内参基因序列进行PCR扩增，检测荧光信号，得到母体血浆中胎儿游离DNA绝对拷贝数，并排除酶切不完全导致的母源性游离DNA假阳性干扰。本申请通过甲基化敏感性限制性内切酶‑PCR法和数字PCR平台结合，利用母胎甲基化差异基因作为标志物检测母体血浆中胎儿游离DNA绝对拷贝数，有利于准确、快速地对妊娠妇女进行早期无创产前筛查或产前诊断。
基于数字 pcr 检测母体血浆胎儿游离 dna 绝对拷贝方法试剂盒

[发明专利]一种检测人类MTHFR基因677位点的酶切方法-CN201610149791.3在审
发明人：孙淼;徐兴顺;徐智策 -专利权人：苏州大学附属第一医院
申请日： 2016-03-16 - 公布日： 2016-06-22 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测人类MTHFR基因677位点的酶切方法，包括提取血液基因组DNA，设计特异性引物，PCR扩增反应及酶切鉴定等步骤。本发明采用基因组DNA的PCR扩增结合限制性内切酶方法，可快速准确鉴定MTHFR基因677位点基因型，仅需要PCR仪等基本设备仪器，结果准确易懂，非专业人员也可分析，且成本低，是一种可以广泛应用于临床检验的方法
一种检测人类 mthfr 基因 677 方法

[发明专利]含多拷贝表达盒重组酵母表达质粒的快速构建方法-CN200410011044.0无效
发明人：马鹤雯;张立树;连继勤;张永亮;张玉静 -专利权人：马鹤雯
申请日： 2004-08-18 - 公布日： 2006-02-22 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明选取一对同尾酶及限制性内切酶，再用两组限制性内切酶分别对重组酵母表达质粒进行限制性内切酶双酶切消化反应，分别回收含有表达盒的DNA片段，将回收的DNA片段进行连接，形成的阳性重组质粒即是含多拷贝表达盒重组酵母表达质粒
拷贝表达重组酵母质粒快速构建方法

[发明专利]一种获得已知序列侧翼未知序列的方法-CN201510910524.9有效
发明人：杨琳;张君诚;付凤玲;李晚忱;宋育红 -专利权人：三明学院
申请日： 2015-12-10 - 公布日： 2018-06-08 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种获得已知序列侧翼未知序列的方法，包括如下步骤：1）根据已知的序列设计两条特异性引物，标记为SP1和SP2，SP2带限制性内切酶识别位点，在SP2到边界序列之间设计一对反向PCR引物F1和D1；2）以基因组DNA为模板以任意一个兼并引物和特异的SP1引物，扩增得到PCR产物1；3）以所述PCR产物1为模板，使用特异的SP2引物和步骤2）中同种但加入限制性内切酶识别位点的兼并引物扩增得到PCR产物2；4）将PCR产物2酶切后加入T4连接酶环化，以此为模板，使用F1和D1引物扩增得到PCR产物3，从而获得所述侧翼序列。
限制性内切酶识别位点侧翼未知序列已知序列引物兼并引物扩增特异性引物基因组DNA 边界序列侧翼序列兼并引物序列设计引物扩增环化扩增酶切成功率耗时简易

首页
«上一页
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
下一页»
尾页
共 100000 条