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[发明专利]基于DNA自动机过程的双链DNA序列测定的方法-CN200410093095.2无效
发明人：张治洲;胡钧;贺林 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2004-12-16 - 公布日： 2005-08-31 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明中双链DNA序列作为输入分子，由限制性内切酶对DNA进行切割，露出粘性末端，与状态转移分子通过碱基配对相结合并发生连接。由于状态转移分子仍然含有限制性内切酶的识别位点，连接后的DNA分子继续新一轮的切割和连接循环并使作为输入分子的DNA序列逐渐变短，作为输入分子的DNA序列逐渐变短，输入分子的长度变化反映了DNA序列的信息
基于 dna 自动机过程序列测定方法

[发明专利]一种DNA克隆方法-CN201110304950.X无效
发明人：韩家淮;梁耀极;蒙丹;陈万泽;吴秀榕;李立胜 -专利权人：厦门大学
申请日： 2011-09-28 - 公布日： 2012-01-18 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：在载体插入位点处用限制性内切酶消化载体获线形载体DNA；根据目的DNA片段和载体插入位点处序列设计合成PCR扩增引物，再PCR扩增，获目的DNA片段；纯化线形载体DNA和目的DNA片段，再混合，并加入核酸外切酶III和核酸外切酶III反应缓冲液组成反应体系，继续反应，加入乙二胺四乙酸二钠以终止反应，再反应后，退火；从反应体系中取转化大肠杆菌E.coli感受态细胞；将转化菌液涂布含相应抗生素的LB培养基平板培养不依赖限制性酶切位点和连接酶，能实现DNA片段快速高效克隆。
一种 dna 克隆方法

[发明专利]基于IIB型限制性内切酶特征的宏基因组测序数据处理系统及处理方法-CN202011355328.7有效
发明人：孙政;王师;张荣超;黄适;周丽沙;王修评 -专利权人：青岛欧易生物科技有限公司;中国海洋大学
申请日： 2020-11-27 - 公布日： 2022-07-05 - 主分类号： G16B20/30 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于IIB(2B)型限制性内切酶特征的宏基因组测序数据处理系统，包括：数据预处理模块、定性模块、定量模块和多酶切结果定性/定量合并模块。通过本发明的处理系统可对基于唯一标签的“两步定量法”对具有IIB型限制性内切酶特征的宏基因组测序数据进行分析处理，其具有检测速度快、成本低、假阳性率低、准确率高和分辨率高的特点，为该技术在微生物检测领域打下基础本发明还公开了基于IIB型限制性内切酶特征的宏基因组测序数据处理方法。
基于 iib 限制性内切酶特征宏基序数处理系统方法

[发明专利]肝靶向重组PEGFP－ATK质粒纳米粒制剂-CN01128912.0无效
发明人：张志荣;何勤;刘戟 -专利权人：四川大学华西药学院
申请日： 2001-09-29 - 公布日： 2002-03-06 - 主分类号： A61K48/00 文献下载
摘要：本发明为肝靶向重组pEGFP－ATK质粒纳米粒制剂,以质粒pUC－AFPlb,pEGFP和pNGVL－TK为原料,先用常规法大抽三种质粒,然后分别用限制性内切酶HindIII和EcoRI消化pUC－AFPlb分离纯化得AFP—Alb增强子—启动子片段,用限制性内切酶HindIII—SmaI消化pNGVL－TK,分离纯化得TK片段,用限制性内切酶HindIII—SmaI消化真核表达载体pEGFP,分离纯化得线性化载体片段,然后将该消化载体片段与AFP—Alb启动子片段进行5′端定向连接,酚抽提,乙醇沉淀后再用此连接产物与HindIII—SmaI消化TK片段进行3′端定向连接,再次酚抽提,纯化,然后用绿豆芽核酸酶MB处理
靶向重组 pegfp atk 质粒纳米制剂

[发明专利]一种快速的基因表达载体构建连接方法-CN201210257058.5无效
发明人：马燕斌;王霞;吴霞;李燕娥 -专利权人：山西省农业科学院棉花研究所
申请日： 2012-07-24 - 公布日： 2012-11-14 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：本发明涉及生物基因克隆表达技术，具体是一种快速的基因表达载体构建连接方法，弥补了现有的基因表达载体构建方法存在的缺陷，其步骤为（1）酶切基因：酶切体系Ⅰ：含有目的基因的T克隆载体经限制性内切酶消化，酶切体系Ⅱ：转基因载体经限制性内切酶消化；（2）回收获得目的基因片段及酶切载体；（3）酶切产物的连接；（4）连接产物的转化；（5）转化产物的鉴定。本发明所述的快速的基因表达载体构建连接方法简单方便、实用性强，替换了凝胶电泳、EB染色等步骤，提高了科研人员的安全性，提高了工作效率，减少了试验环节所需费用，并能够有效地减少试验用EB对水资源等环境的污染
一种快速基因表达载体构建连接方法

[发明专利]一种分子检测和鉴定甘蔗赤条病菌不同株系的试剂盒-CN201610686714.1有效
发明人：高三基;王锦达;李晓燕;傅华英;孙生仁;陈如凯 -专利权人：福建农林大学
申请日： 2016-08-19 - 公布日： 2019-06-28 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明的试剂盒中至少包括外侧引物对16S‑F4/23S‑R4和内侧引物对ITS‑F1/ITS‑R1，试剂盒内还有PCR反应液I和II、限制性内切酶反应液、Ex Taq酶液、HindIII内切酶、EcoRI内切酶、阳性样品DNA、阴性样品DNA和无核酸酶无菌水。本发明集合了巢式PCR检测方法的高度灵敏性和限制性内切酶切条带长度多态性与唯一性等优点，为甘蔗赤条病菌检测和鉴定提供了一种简便、快速、准确的方法。
一种分子检测鉴定甘蔗病菌不同试剂盒

[发明专利]用于鉴定金花茶的SNP分子标记及其应用-CN201310300890.3有效
发明人：宋云;赵竹;徐晗 -专利权人：中国检验检疫科学研究院
申请日： 2013-07-17 - 公布日： 2015-01-21 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明提供一种用于鉴定金花茶的SNP分子标记及其应用，所述SNP位于如SEQ ID NO.1所示的金花茶GBSSI基因的第141位碱基，此处碱基为T，则鉴定为金花茶物种。本发明首次基于金花茶SNP位点建立dCAPS分子标记体系，通过生物信息学方法对金花茶GBSSI基因序列进行分析，筛选SNP位点，设计适当的错配引物进行PCR扩增，选择合适的限制性内切酶进行酶切，最终将SNP
用于鉴定金花 snp 分子标记及其应用

[发明专利]一种内切酶Mph1103I检测人XPA基因多态性位点rs7045160的方法-CN201710629049.7在审
发明人：谢伟;于湛;代丽萍 -专利权人：郑州大学第一附属医院;河南省医药科学研究院
申请日： 2017-07-28 - 公布日： 2018-02-23 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本发明公开了一种内切酶Mph1103I检测人XPA基因多态性位点rs7045160的方法，包括以下步骤抽提待测人基因组DNA；提供扩增人XPA基因多态性rs7045160位点附近序列的上游引物和下游引物，以待测人基因组DNA为模板，利用上游引物和下游引物进行PCR扩增，获取扩增产物；使用限制性内切酶对获取的扩增产物进行酶切，获取相应的酶切产物；将酶切产物采用3%的琼脂糖凝胶进行电泳，以判定XPA基因多态性本发明重复性好，操作较简单，成本低，酶切结果容易辨识，适用范围广，是一种进行单碱基突变位点基因型鉴定的好方法，并有望预测食管癌的易感性，用于高发区人群食管癌的早期预警和筛查。
一种内切酶 mph1103i 检测 xpa 基因多态性 rs7045160 方法

[发明专利]用于选择母鸡产蛋蛋重的SNP分子标记-CN202110520100.7在审
发明人：李世军;马卓旺;蔡金萍;戎笠;杨森栋;阮鸿基;杨柯;贾子佳;南久红;彭秀丽;俸艳萍;盛哲雅;朱桂玉;李竞一;龚炎长 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2021-05-12 - 公布日： 2022-11-15 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于选择母鸡产蛋蛋重的SNP分子标记及其应用，通过候选基因关联分析和限制性内切酶长度多态性（PCR‑RFLP）技术方法，在母鸡基因组上筛选到2个与母鸡产蛋蛋重相关联的SNP分子标记，SNP位点分别位于1号染色体第64135953位和第67657474位碱基。这些SNPs位点的多态性与母鸡的产蛋蛋重显著关联，所述的SNP分子标记可以单独使用，用于选择和改良母鸡个体的产蛋蛋重。
用于选择母鸡蛋蛋 snp 分子标记

[发明专利]一种高通量定向T载体克隆方法-CN200810047983.9无效
发明人：马立新;钟星 -专利权人：湖北大学
申请日： 2008-06-12 - 公布日： 2008-11-19 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：本发明提出了一种高通量定向T载体克隆方法，它是选定合适的IIS型限制性内切酶位点和乳糖操纵基因序列(LacO)，通过载体诱变酶切连接转化和克隆片段间重构完整的乳糖操纵基因序列(LacO)，实现定向克隆和无鉴定克隆的
一种通量定向载体克隆方法

[发明专利]离子交换色谱法用洗脱液以及核酸链的分析方法-CN201510300454.5在审
发明人：与谷卓也;牛泽幸司 -专利权人：积水医疗株式会社
申请日： 2012-01-12 - 公布日： 2015-09-30 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明提供能够在短时间并且以高性能进行核酸的PCR扩增产物、该PCR扩增产物的限制性内切酶片段、或核酸的限制性内切酶片段等目标核酸的分离检测的离子交换色谱法用洗脱液。
离子交换色谱洗脱以及核酸分析方法

[发明专利]一种基于热不对称反应的接头介导的PCR方法-CN201711309403.4在审
发明人：王丹阳;张雪馨;杨云 -专利权人：西北大学
申请日： 2017-12-11 - 公布日： 2018-06-01 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：此外，本发明还利用识别简并序列的限制性内切酶或识别四个碱基序列的限制性内切酶可将基因组切割成更多短片段，增加了克隆目的片段的几率；而短接头的运用减少了错配的几率，并且降低了成本。
不对称反应限制性内切酶目的片段介导基因组切割碱基序列简并序列短接头产率错配短片引物克隆

[发明专利]一种基因热点突变的检测方法-CN201610237179.1有效
发明人：周翠兰;张安迪;彭翠英;张佳;郭紫芬;肖莉;李文;刘璇;李凯 -专利权人：南华大学
申请日： 2016-04-15 - 公布日： 2019-10-15 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：发明名称一种基因热点突变的检测方法摘要本发明通过采用体外对野生序列进行限制性内切酶消化和将切口处末端进行不利于连接反应的处理，将体外扩增片段亚克隆，然后对克隆形成的菌落进行测序分析。本发明有利于突变基因形成菌落而对野生基因片段由于被限制性内切酶反应和抑制连接处理其形成菌落的能力下降。本发明对突变基因含量低的生物标本的基因突变分析方面具有应用价值。
一种基因热点突变检测方法

[发明专利]离子交换色谱法用洗脱液以及核酸链的分析方法-CN201280005112.5有效
发明人：与谷卓也;牛泽幸司 -专利权人：积水医疗株式会社
申请日： 2012-01-12 - 公布日： 2013-09-18 - 主分类号： G01N30/26 文献下载
摘要：本发明提供能够在短时间并且以高性能进行核酸的PCR扩增产物、该PCR扩增产物的限制性内切酶片段、或核酸的限制性内切酶片段等目标核酸的分离检测的离子交换色谱法用洗脱液。
离子交换色谱洗脱以及核酸分析方法

[发明专利]FMR1基因CGG重复数及甲基化检测试剂盒和检测方法-CN202110322943.6有效
发明人：张俊杰;刘晶晶;刘福平;董玉莲 -专利权人：深圳会众生物技术有限公司
申请日： 2021-03-25 - 公布日： 2022-06-21 - 主分类号： C12Q1/683 文献下载
摘要：本发明公开FMR1基因CGG重复数及甲基化检测试剂盒和检测方法，其中，该检测试剂盒包括限制性内切酶、磁珠以及捕获探针；所述限制性内切酶用以酶切样本的基因组DNA，所述磁珠连接有第一修饰基团，所述捕获探针连接有第二修饰基团，所述第二修饰基团用以连接所述第一修饰基团，以将所述磁珠和所述捕获探针偶联，偶联所述磁珠的所述捕获探针用以特异性结合酶切下来的DNA片段。
fmr1 基因 cgg 复数甲基化检测试剂盒方法