本发明属于分子检测技术领域，公开了一种检测检测血浆中外泌体let‑7b‑5p含量的方法，及外泌体let‑7b‑5p或检测外泌体let‑7b‑5p表达量的试剂在制备检测患者样本结核病的产品中的应用，该检测血浆中外泌体let‑7b‑5p含量的方法包括如下步骤：提取待检测患者血浆中的外泌体RNA；将提取得到的外泌体RNA进行逆转率得到cDNA；采用如SEQ ID NO.2所示序列的检测引物对所述cDNA进行扩增得到扩增产物，并根据扩增产物分析测定外泌体let‑7b‑5p相对表达量。其中，该外泌体let‑7b‑5p可以作为结核病的检测标志，特异性强，可快速并特异性识别结核病患者，灵敏度及准确性高。
本发明提供了可同时检测4种miRNA的qRT‑PCR检测专用引物探针组合，组合的序列是基于带有茎环结构的序列设计的；带有茎环结构的序列为如SEQ ID No.1‑SEQ ID No.4所示序列中的一条或多条；并提供了使用此引物探针组合的qRT‑PCR检测方法及检测试剂盒。与现有技术相对比，本发明具有以下优点：本发明提供了三条特异性茎环序列用以设计靶标的引物探针组，并提供了具有特定引物探针加样比例、金属离子浓度和UDG酶的检测方法及检测试剂盒，用以实现短起峰时间、引物探针高特异性、标准曲线灵敏度高的一步法多重实时荧光定量PCR检测技术，采用此技术可实现对miRNA的特异性检测。
