“限制性内切酶位点”专利关键词查询_检索下载_查询列表_检索列表_行业专利分布_钻瓜专利网

钻瓜专利网为您找到相关结果13795052个，建议您升级VIP下载更多相关专利

[发明专利]猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆疫苗株及其应用-CN201010559005.X有效
发明人：童光志;周艳君;张善瑞;姜一峰;李国新;于海 -专利权人：中国农业科学院上海兽医研究所
申请日： 2010-11-25 - 公布日： 2011-03-09 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明公开一种人工克隆弱毒疫苗株，该疫苗株是高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株HuN4-F112的克隆毒株，在其结构蛋白基因序列中引入标记性的限制性内切酶位点。本发明还公开了一种重组载体，包含高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株HuN4-F112的全长基因cDNA序列，该全长基因cDNA序列的5’端加设有转录启动子，且该全长基因cDNA序列内部引入标记性的限制性内切酶位点本发明的人工克隆弱毒疫苗株，不仅在免疫猪体后能对猪抵抗高致病性PRRSV提供完全的安全免疫保护，而且能有效区分猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫猪与猪繁殖与呼吸综合征自然感染猪，有利于高致病性PRRSV的预防和控制
繁殖呼吸综合征病毒感染性克隆疫苗及其应用

[发明专利]一种蝎抗肿瘤转移肽及其制备方法和应用-CN200610124581.5无效
发明人：蒋达和;李文鑫;曹志贱;毛歆;范少忠;刘辉 -专利权人：武汉大学
申请日： 2006-09-21 - 公布日： 2007-07-25 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：coli BL21/rBmKCTL/pGEX，CCTCC NO：M206094，其制备方法为：首先是设计引物，以从蝎毒腺cDNA文库中筛选蝎抗肿瘤转移肽基因的cDNA序列为模板，进行PCR扩增，获得含有限制性内切酶的切位点序列的蝎抗肿瘤转移肽的基因或基因片段；其次是用限制性内切酶对PCR产物和表达载体质粒进行酶切；第三是用T₄DNA连接酶，构建重组表达载体rBmKCTL/pGEX；第四是将重组表达载体rBmKCTL/pGEX转化感受态大肠杆菌本发明方法简便，安全性高，生产成本低廉，纯化简单且产物纯度高，蝎抗肿瘤转移肽在制备治疗或预防抗肿瘤转移的药物中的应用。
一种肿瘤转移及其制备方法应用

[发明专利]一种T+1断裂蛋白质内含子的构建方法-CN201010510184.8无效
发明人：孟清;王瑾 -专利权人：东华大学
申请日： 2010-10-18 - 公布日： 2011-02-16 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明涉及一种T+1断裂蛋白质内含子的构建方法，包括：(1)利用两条PCR引物对目的基因进行扩增；(2)将上述PCR产物自连转化感受态细胞后得到的质粒经限制性内切酶双酶切，回收小片段；(3)利用限制性内切酶双酶切本发明简单，转换成C+1型或S+1型split intein后它仍具有剪接能力，具有较高通用性。
一种断裂蛋白质内含构建方法

[发明专利]一种纤维素外切酶多拷贝表达提高黑曲霉纤维素酶酶活的方法-CN201710065833.X有效
发明人：薛栋升;曾徐浩 -专利权人：湖北工业大学
申请日： 2017-02-06 - 公布日： 2020-05-26 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明公开了一种纤维素外切酶多拷贝表达提高黑曲霉纤维素酶酶活的方法，属于基因工程领域。本发明方法包括如下步骤：（1）构建以启动子序列‑信号肽编码序列‑纤维素外切酶编码序列‑终止子序列为基本单元的纤维素外切酶多拷贝表达盒。表达盒中各单元的信号肽编码序列均不相同。（2）在纤维素外切酶多拷贝表达盒两端加入限制性内切酶识别位点序列，通过限制性内切酶、DNA连接酶将表达盒构建到表达载体上。（3）将构建的重组表达载体转化到黑曲霉中，转化有重组载体的黑曲霉菌株纤维素酶酶活得到提高。本发明利用不同的信号肽进行组合，避免相同信号肽竞争，从而提高了黑曲霉所产纤维素酶的酶活。
一种纤维素外切拷贝表达提高曲霉纤维素酶方法

[发明专利]一种葡糖苷酶多拷贝表达提高里氏木霉纤维素酶酶活的方法-CN201710065834.4有效
发明人：薛栋升;曾徐浩 -专利权人：湖北工业大学
申请日： 2017-02-06 - 公布日： 2019-11-22 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明公开了一种葡糖苷酶多拷贝表达提高里氏木霉纤维素酶酶活的方法，属于基因工程领域。本发明方法包括如下步骤：（1）构建以启动子序列‑信号肽编码序列‑葡糖苷酶编码序列‑终止子序列为基本单元的葡糖苷酶多拷贝表达盒。表达盒中各单元的信号肽编码序列均不相同。（2）在葡糖苷酶多拷贝表达盒两端加入限制性内切酶识别位点序列，通过限制性内切酶、DNA连接酶将表达盒构建到表达载体上。（3）将构建的重组表达载体转化到里氏木霉中，转化有重组载体的里氏木霉菌株纤维素酶酶活得到提高。本发明利用不同的信号肽进行组合，避免相同信号肽竞争，从而提高了里氏木霉所产纤维素酶的酶活。
一种葡糖苷酶多拷贝表达提高里氏纤维素酶方法

[发明专利]一种预测ACEI类降压药药效的试剂盒、方法、软件和复方药-CN02125863.5有效
发明人：邢厚恂;蒋善群;朱国英;张敏敏;余运贤;光文伟;洪秀梅;陈常中;陈光亮 -专利权人：安徽省生物医学研究所
申请日： 2002-07-31 - 公布日： 2004-02-04 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种预测降压药药效的试剂盒、方法和复方药，特别用于通过测定功能基因多态性位点基因型，来预测ACEI类降压药药效的方法及其应用。该试剂盒包括组成包括：引物(Primer)；限制性内切酶HaeIII和限制性内切酶缓冲液2。方法为通过测定受试者的高半胱氨酸通路上MS基因Asp919Gly多态性位点的基因型，可定性预测ACEI类降压药药效。本发明便于医生在用药时根据个体差异进行选择，提高了临床用药和治疗的效率与安全性，降低了发生毒副作用和经济负担的风险。
一种预测 acei 降压药药效试剂盒方法软件复方

[发明专利]一种预测ACEI类降压药药效的试剂盒、方法、软件和复方药-CN02123875.8无效
发明人：邢厚恂;黄帼;张岩;彭少杰;李栋;王滨燕;陈光亮;黄爱群;吴涤 -专利权人：安徽省生物医学研究所
申请日： 2002-07-05 - 公布日： 2004-01-07 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种预测降压药药效的试剂盒、方法和复方药，特别用于通过测定功能基因多态性位点基因型，来预测ACEI类降压药药效的方法及其应用。该试剂盒包括组成包括：引物(Primer)；限制性内切酶NcoI和限制性内切酶缓冲液4。方法为通过测定受试者的ADRB2基因Arg16Gly多态性位点的基因型，可定性预测ACEI类降压药药效。本发明便于医生在用药时根据个体差异进行选择，提高了临床用药和治疗的效率与安全性，降低了发生毒副作用和经济负担的风险。
一种预测 acei 降压药药效试剂盒方法软件复方

[发明专利]一种利用限制性内切酶处理DNA模板以增进DNA扩增效率的方法-CN200710057926.4无效
发明人：孟良玉;李静;阎大伟;张治洲 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2007-07-03 - 公布日： 2008-01-30 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明涉及一种应用限制性内切酶处理DNA模板以增进聚合酶链式反应扩增效率的方法，该方法采用限制性内切酶处理DNA模板，通过对待扩增DNA模板的酶切实现对难以扩增的DNA片段的有效扩增，从而提高目的DNA
一种利用限制性内切酶处理 dna 模板增进扩增效率方法

[发明专利]一种SalI限制性内切酶的制备方法-CN202110020913.X在审
发明人：于博文;李建辉;单永超 -专利权人：上海咏科生物科技有限公司
申请日： 2021-01-08 - 公布日： 2021-05-18 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种SalI限制性内切酶的制备方法，包括以下步骤：一、合成SalIM和SalI的编码基因，分别如SEQ ID NO.1所示和SEQ ID NO.2所示，分别构建至相应载体中，获得带有SalIM基因的重组载体和融合了纯化标签的SalI蛋白表达质粒；二、将带有SalIM基因的重组载体转入大肠杆菌中，获得具备基底SalIM表达的重组菌，保护基因组DNA不被SalI内切酶切割，使大肠杆菌能够继续正常生长增殖三、制作成具备基底SalIM表达的重组菌感受态细胞；四、将融合了纯化标签的SalI蛋白表达质粒转入具备基底SalIM表达的重组菌感受态细胞中，获得阳性单克隆，培养进行SalI限制性内切酶的表达；五、SalI限制性内切酶的纯化。
一种 sali 限制性内切酶制备方法

[发明专利]一种非限制性核酸内切酶突变体及其制备方法-CN202211550436.9在审
发明人：杨洋;汪寄宇 -专利权人：上海拜朗生物科技有限公司
申请日： 2022-12-05 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：本发明公开了一种非限制性核酸内切酶突变体及其制备方法。本发明的一种非限制性核酸内切酶突变体，在野生型非限制性核酸内切酶氨酸酸序列上进行六个氨基酸位点的突变获得，六个氨基酸突变位点为：R65V、N66A、W67F、E135G、D136T、Q137I，所述的非限制性核酸内切酶突变体的氨基酸序列如本发明通过突变关键位点的氨基酸带电荷或疏水性的改变，从而改变核酸内切酶的空间结构，提高非限制性核酸内切酶的表达效率和活性。
一种限制性核酸内切酶突变体及其制备方法

[发明专利]一种黑热病媒介白蛉种类的鉴别方法及其鉴别试剂盒-CN201010159499.2无效
发明人：顾灯安;张仪;危芙蓉;田桢干;何宇平;陆晔 -专利权人：中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所;中华人民共和国上海出入境检验检疫局
申请日： 2010-04-27 - 公布日： 2011-01-26 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明的鉴别方法包括下列步骤：白蛉DNA抽提，所提取DNA进行PCR扩增，用限制性内切酶Dra I酶切，观察酶切条带，根据有无酶切及酶切片段判断白蛉种类情况。本发明的鉴别试剂盒包括白蛉DNA抽提液，PCR反应液，限制性内切酶Dra I及酶切缓冲液。本发明所提供的鉴别方法简单实用，试剂盒敏感性高、特异性强、重复性好，为基层展开白蛉分子学鉴定提供便利。
一种黑热病媒介种类鉴别方法及其鉴别试剂盒

[发明专利]基于PCR-RFLP快速鉴定NX型禾谷镰刀菌的引物及方法-CN202211023113.4在审
发明人：王建华;杨宪立;王昇;杨俊花;赵志勇;王郝玉;张梦圆 -专利权人：上海市农业科学院
申请日： 2022-08-25 - 公布日： 2023-04-28 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：PCR‑RFLP快速鉴定NX型禾谷镰刀菌的引物及方法，本发明通过分析禾谷镰刀菌及其近缘种在Tri1基因序列上的差异，获得了NX型禾谷镰刀菌特异性的SNP位点，设计了相应的限制性内切酶；即以禾谷镰刀菌基因组DNA为模板，分别利用设计开发的两组引物组合，扩增其Tri1基因部分序列；将PCR产物进行纯化后使用限制性内切酶NheI或BclI进行酶切；对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳结果观察；本发明操作简便、重复性好，特异性高
基于 pcr rflp 快速鉴定 nx 禾谷镰刀引物方法

[发明专利]一种简化基因组测序的方法与相关应用-CN202211356595.5在审
发明人：阮珏;陈鹏;常玉晓;郭建飞 -专利权人：中国农业科学院深圳农业基因组研究所
申请日： 2022-11-01 - 公布日： 2023-03-07 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明的简化基因组测序的方法包括：对重测序文库进行限制性内切酶酶切后，分选不含有酶切位点的目标长度的片段进行测序，从而实现简化基因组测序。本发明在全基因组测序文库的基础上，在测序之前进行限制性内切酶酶切，含有酶切位点的片段因为被切断而不能被测序，从而对基因组上含有酶切位点的片段进行反向选择，实现对基因组的简化。
一种简化基因组方法相关应用

[发明专利]用于生产目的DNA序列的方法和克隆载体-CN202180091064.5在审
发明人：叶露萌;孙海烨;高倩;陈娟 -专利权人：南京金斯瑞生物科技有限公司
申请日： 2021-08-06 - 公布日： 2023-10-03 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：所述方法包括在宿主细胞内进行的DNA构建体的扩增和提取步骤，以及原核端粒酶‑IIS型限制性内切酶和/或兆核酸酶‑DNA核酸外切酶催化的三步恒温酶反应步骤，其中所述构建体为自主复制的且包含：(a)一个或更多个IIS型限制性内切酶和/或兆核酸酶识别序列；(b)目的DNA序列；(c)在所述目的DNA序列两端侧翼的原核端粒酶识别序列。
用于生产目的 dna 序列方法克隆载体

[发明专利]用于表达miRNA和/或蛋白的载体及其应用-CN201110416641.1有效
发明人：盛望;陈学斌;杨志平;曾毅;李泽琳 -专利权人：北京工业大学
申请日： 2011-12-14 - 公布日： 2012-06-27 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：EmGFP-miR和两端各有一个粘性末端的双链DNA片段连接而成的环状表达载体；所述线性载体pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR的两个末端和所述双链DNA片段的两个粘性末端相连，并且两个连接处均形成限制性内切酶BsmB I的识别位点；所述DNA片段的内部还包括限制性内切酶Dra I的识别位点。实验证明，在表达miRNA方面，本发明所提供的表达载体为环形载体，可在大肠杆菌中大量扩增，克服了原始线性载体pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR一次性使用的缺陷，大大节约了实验成本；同时，本发明所提供的表达载体还可用于表达蛋白
用于表达 mirna 蛋白载体及其应用