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[发明专利]DNA甲基化位点测序文库的构建方法-CN202210881697.2在审
发明人：李凯;廖端芳;张佳;齐捧;肖莉;曾娅玲;传军;李玉婧;何庆;罗晶晶;常蕾 -专利权人：江门市灿明生物科技有限公司
申请日： 2022-07-26 - 公布日： 2023-03-21 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明提供一种DNA甲基化位点测序文库的构建方法，本发明采用非甲基化接头和甲基化接头进行甲基化位点的分析和构建甲基化测序文库，其中，甲基化接头利用甲基化依赖性限制性内切酶酶切产生粘性末端利用连接酶引入，识别含有甲基化的C碱基的特定位点并在识别位点侧翼进行酶切。非甲基化接头采用对碎片化核酸填平补A加接头或者利用非甲基化相关的可产生粘性末端的内切酶加接头，当使用甲基化敏感性限制性内切酶时，本发明对部分甲基化位点进行了两次识别过程。
dna 甲基化位点测序文构建方法

[发明专利]一种体外筛选PD-L1的DNA核酸适配体的方法及其在癌症诊断中的应用-CN202080001212.5有效
发明人：娄新徽;任惜娇;李济远 -专利权人：首都师范大学
申请日： 2020-06-30 - 公布日： 2023-08-04 - 主分类号： C12N15/115 文献下载
摘要：一种体外筛选程序性细胞死亡受体1‑配体1(PD‑L1)高亲和力和特异性DNA核酸适配体的新方法，简称内编码‑SELEX(Encoded‑SELEX)。本方法的起始随机DNA文库包含两个随机序列区域和位于其间的含有Ⅱ型限制性内切酶识别位点的固定区域(即内编码)。利用MCP‑SELEX预先富集文库，随后将文库与PD‑L1均相孵育，然后加入限制性内切酶。能够与PD‑L1结合的序列，其内编码结构被破坏，因而序列不被限制性内切酶切断，PCR扩增得以保留。所获得的核酸适配体具有内编码长度越长亲和力越高的特点，便于快速遴选高亲和力核酸适配体。
一种体外筛选 pd l1 dna 核酸适配体方法及其癌症诊断中的应用

[发明专利]一种在DNA序列特定位点上装配染色质结构的能力检测方法-CN201710903858.2有效
发明人：赵宏宇;蔡禄;张凤慧;赵秀娟;刘国庆 -专利权人：内蒙古科技大学
申请日： 2017-09-29 - 公布日： 2021-03-23 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本申请涉及分子生物学领域，尤其涉及一种在DNA序列特定位点上装配染色质结构的能力检测方法，用以解决现有技术无法定点检测核小体占据率以确定染色质结构装配能力的问题。该方法主要是将含有特定限制性内切酶位点的DNA序列装配成染色质结构，用限制性内切酶进行酶切消化，去除各种蛋白后电泳检测，定量化计算该位点及其附近DNA序列核小体占据率，判断检测位点附近染色质局部结构。进而，分析出DNA序列上特定位点装配染色质结构的效率及核小体的组装能力，该检测方法实现过程简单、便捷，特异性及准确率高。
一种 dna 序列定位装配染色质结构能力检测方法

[发明专利]Leber氏遗传性视神经病变检测方法及其试剂盒-CN96116296.1无效
发明人：周海林;邹祝英;胡育新 -专利权人：中国人民解放军第二军医大学
申请日： 1996-04-01 - 公布日： 1997-02-19 - 主分类号： C12Q1/00 文献下载
摘要：本发明是一种临床检测Leber氏遗传性视神经病变的方法及其试剂盒。根据本病患者存在线粒体点突变致使正常线粒体DNA中限制性内切酶SfaNI识别位点丧失的特点，利用特定的抗凝剂、溶血液和一对引物，经PCR扩增后的产物不能被SfaNI限制性内切酶消化切割而检测本病。本发明的有益效果是解决了以往只能靠家族遗传史来诊断Leber氏遗传性视神经病变的问题，为临床明确检测本病提供了一种简便、可靠的方法和试剂盒。
leber 遗传性视神经病变检测方法及其试剂盒

[发明专利]一种限制性内切酶DpnI制剂及其制备方法-CN201911204796.1在审
发明人：郭敏;徐丽琼;于雪 -专利权人：康码（上海）生物科技有限公司
申请日： 2019-11-29 - 公布日： 2021-03-23 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：本发明提供一种限制性内切酶DpnI制剂及其制备方法。所述限制性内切酶制剂通过体外蛋白合成反应制备，具体地，构建体外无细胞蛋白合成体系，其中加入含有DpnI的编码基因的DNA模板，进行体外蛋白合成反应，合成具有DpnI结构的目的蛋白，固液分离，采集上清液，测定酶活力，选取具有限制性内切酶活性的上清溶液，获得本发明的限制性内切酶DpnI制剂，进行包装或者制备成储存液后进行包装。本发明所提供产品的制备方法简单，避免了因传统的分离纯化步骤导致的蛋白含量损失，具有高酶切活性，可广泛应用于分子生物、生物工程、食品等领域。
一种限制性内切酶 dpni 制剂及其制备方法

[发明专利]入门载体pAmpGate和pGentGate的构建及使用方法-CN201610700818.3有效
发明人：张孟臣;娜仁;杨春燕;闫龙;史晓蕾;邸锐;赵鑫;冯燕 -专利权人：河北省农林科学院粮油作物研究所
申请日： 2016-08-22 - 公布日： 2019-03-19 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明所提供的入门载体为含有DNA片段A的环形载体；所述DNA片段A自5’端到3’端依次含有attL1序列、IIs型限制性内切酶A的识别序列、IIs型限制性内切酶B的识别序列、筛选标签序列1、所述IIs型限制性内切酶B的识别序列、所述IIs型限制性内切酶A的识别序列、attL2序列。本发明所提供的入门载体可采用Golden Gate构建方法取代传统的BP反应进行入门克隆的构建，由经济实惠的IIS型限制性核酸内切酶和DNA连接酶取代昂贵的BP酶，大大节省了实验费用，同时该入门载体既可以用来进行单片段
入门载体 pampgate pgentgate 构建使用方法

[发明专利]一种转录激活子样效应因子的固相合成方法-CN201110456702.7在审
发明人：庄峰锋 -专利权人：北京唯尚立德生物科技有限公司
申请日： 2011-12-31 - 公布日： 2012-07-18 - 主分类号： C07K14/00 文献下载
摘要：一种转录激活子样效应因子的固相合成方法，包括以下步骤：将一段核酸适配序列(DNAlinker)固定化到固相界面上，用限制性内切酶剪切产生3′-粘性末端；将产物与经限制性内切酶处理过的具有5′-粘性末端的TALE连接单元接触，在DNA连接酶的作用下连接，洗脱未连接底物；用限制性内切酶处理上一步骤所得产物，在DNA上剪切重新生成一个3′-粘性末端，再与经限制性内切酶处理过的具有5′-粘性末端的TALE连接单元接触，在DNA连接酶的作用下连接，洗脱未连接底物；重复操作上述步骤至少一次；用限制性内切酶将连接好的DNA分子从固相界面上剪切下来，分离纯化，除去未连接底物；将所得DNA分子表达成蛋白分子，即为含目标TALE
一种转录激活效应因子相合成方

[发明专利]一种利用限制性内切酶防止PCR污染的方法-CN200810208128.1无效
发明人：姚见儿;白艳军;谈畅;李久彤 -专利权人：上海透景生命科技有限公司
申请日： 2008-12-29 - 公布日： 2010-07-07 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用限制性内切酶防止PCR污染的方法。具体地，本发明方法包括步骤(a)将PCR反应体系在IIS型限制性内切酶的酶切温度下保温一段时间，从而消化反应体系中可能存在的污染物；(b)灭活IIS型限制性内切酶；和(c)对PCR反应体系进行退火-延伸
一种利用限制性内切酶防止 pcr 污染方法

[发明专利]一种构建重组质粒的方法-CN201110330257.X有效
发明人：查向东 -专利权人：广东希普生物科技股份有限公司
申请日： 2011-10-26 - 公布日： 2012-02-22 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：本发明公开一种构建重组质粒的方法，旨在公开一种利用平末端随机连接和限制性内切酶切割，有效、快捷的拼接DNA片段构建重组质粒的的简便方法；其技术要点依次包括下述步骤：1)采用聚合酶链式反应对至少两个DNA基因进行扩增，得到对应的末端带限制性内切酶识别和切割位点的PCR产物；2)采用连接酶对步骤1)所得的PCR产物进行平末端连接；3)将步骤2)所得的连接产物双酶切，检测，回收获取目的片段；4)将目的片段与双酶切后的载体质粒连接
一种构建重组质粒方法

[发明专利]一种基于探针发卡结构的DNA杂交信息存储加密方法-CN202310372450.2在审
发明人：王晓霞;张翼飞;王海华;张东裔;刘翟;孙远东;陈芝兰;崔小娟 -专利权人：湖南科技大学
申请日： 2023-04-09 - 公布日： 2023-07-04 - 主分类号： G16B50/40 文献下载
摘要：一种基于探针发卡结构的DNA杂交信息存储加密方法，包括一套带荧光基团、淬灭基团、两个限制性内切酶识别位点的DNA寡核苷酸发卡结构探针组合和两套限制性内切酶组合；为了增强淬灭基团的淬灭效果，本发明采用发卡结构的探针基本序列，在特定的限制性内切酶将带淬灭基团的发卡结构切除，探针激活，由于发卡结构的发卡结构会使就近的淬灭基团对荧光基团进行作用，在DNA杂交存储信息读取的DNA杂交过程中，如果两基团相距较远淬灭效果严重不足，荧光检测信号存在偏差本发明实现了DNA杂交信息存储技术的硬加密，能保障加密程度的准确性，提升DNA杂交存储信息的可靠性，保证该技术在各行业发挥作用时的安全性。
一种基于探针发卡结构 dna 杂交信息存储加密方法

[发明专利]双链核酸分子及利用其去除DNA文库中GLASS接头的方法-CN202080094771.5在审
发明人：闵罗英;裴真植;李旻燮;申相澈 -专利权人：伊万基因诊断中心有限公司
申请日： 2020-12-24 - 公布日： 2022-12-09 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明涉及使用双链核酸分子和限制性内切酶去除DNA文库中游离接头的方法，更特别涉及去除用于下一代测序(NGS)的DNA文库中游离接头的方法，使用包括IIs型限制酶识别位点及其互补序列和IIs型限制酶的双链核酸分子进行
核酸分子利用去除 dna 文库 glass 接头方法

[发明专利]一种DNA多位点定向突变方法-CN201310016659.1无效
发明人：赵淑娟;周禄斌;胡之璧;王峥涛;周吉燕 -专利权人：上海中医药大学
申请日： 2013-01-16 - 公布日： 2013-05-08 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明提供一种DNA多位点定向突变方法，根据DNA突变位点设计包含Class IIS限制性内切酶识别位点和切割位点的引物，经分段PCR扩增、酶切、连接反应得到连接产物，并以该连接产物直接进行PCR扩增，实现DNA多位点突变。
一种 dna 多位点定向突变方法

[发明专利]检测尘肺病易感基因的试剂盒及其应用-CN202310464205.4在审
发明人：王存飞;乔金林;陈亦然;王曙光 -专利权人：国能神东煤炭集团有限责任公司;中国神华能源股份有限公司神东煤炭分公司;安徽理工大学
申请日： 2023-04-26 - 公布日： 2023-08-08 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：其中，试剂盒包括：检测尘肺病易感基因SNP位点的引物及SNP位点对应的限制性内切酶；尘肺病易感基因SNP位点选自以下的一种或多种：rs16944、rs1800796、rs4073或rs562047；引物选自以下一种或多种利用本申请的试剂盒中的引物及相关限制性内切酶对SNP位点rs16944、rs1800796、rs4073或rs562047中的一种或多种进行尘肺病易感基因位点的检测，通过RFLP‑PCR技术能够较快且准确的得到待测样本中是否存在尘肺病易感基因位点
检测尘肺病易感基因试剂盒及其应用

[发明专利]一种混合限制酶及其应用-CN202210526791.6有效
发明人：高尊昉;邓锐;程槐旭;张旭宁;刘杨 -专利权人：江苏百时美生物科技有限公司
申请日： 2022-05-16 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12N9/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种混合的限制性内切酶，所述混合限制性内切酶包括限制酶DpnI和SgeI组成，其中限制酶中DpnI和SgeI浓度分别为1～1.5U/μL，1～2.5U/μL。本发明还公开了一种混合限制性内切酶在消化甲基化DNA和定点突变中的应用，与单独使用DpnI相比，该混合酶消化甲基化DNA的效果显著提升，残留率降低90％以上，反应时间缩短了75％左右。在定点突变应用中，仅需酶切反应15min即可实现99％以上的阳性率。
一种混合限制及其应用

[发明专利]HIV-1整合酶突变体库的构建法-CN201510310101.3在审
发明人：周亚夫;杨立莉;沈学彬;叶剑 -专利权人：浙江大学
申请日： 2015-06-08 - 公布日： 2015-10-14 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种HIV-1整合酶突变体库的构建法，包括如下内容：(1)、利用转座子的转座，以及转座子两端限制性内切酶在目的基因随机位点制造空隙，插入突变插入盒，再利用盒上的限制性内切酶位点，通过酶切自连造成目的蛋白上一个或连续两个氨基酸的突变；(2)、利用定点突变PCR，使突变插入盒上的用于替换原目的基因3个碱基的3个碱基，由编码半胱氨酸的密码子突变为编码其他19个氨基酸的密码子，从而来增加最终突变库的多样性。
hiv 整合突变体构建