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[发明专利]转化细菌细胞的方法-CN201880047705.5在审
发明人： M·F·菲勒;S·西梅尔 -专利权人：巴斯夫欧洲公司
申请日： 2018-07-11 - 公布日： 2020-03-17 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明涉及在重组宿主细胞中产生DNA甲基转移酶，其中所述DNA甲基转移酶使DNA甲基化，产生在识别序列GCNGC中含有5‑甲基胞嘧啶的DNA，并且其中所述DNA甲基转移酶包含根据SEQ ID NO：33另外，本发明涉及这种DNA甲基转移酶用来产生细菌转化体的用途，所述用途包括步骤：(a)向第一细菌宿主细胞中引入多核苷酸，所述多核苷酸包含编码该DNA甲基转移酶的多核苷酸序列，以产生甲基化DNA，和(b)将甲基化DNA从第一细菌宿主细胞转移入第二细菌宿主细胞，其中第二细菌宿主细胞包含能够降解该DNA但不能降解该甲基化DNA的限制性核酸内切酶。
转化细菌细胞方法

[发明专利]一种游离DNA提取及甲基化转化方法、试剂及试剂盒-CN202010239949.2在审
发明人：苗保刚;卜振中;孙瑶;李红东;郭军辉;韩文 -专利权人：西安天隆科技有限公司
申请日： 2020-03-31 - 公布日： 2020-06-05 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开了一种游离DNA提取及甲基化转化方法、试剂及试剂盒，能提供足量、高纯度的游离DNA，属于生物技术领域，解决了现有技术中灵敏度不高，不能有效识别甲基化位点的问题。本发明的方法包括：采用磁珠法对样本中的游离DNA进行富集纯化；利用亚硫酸盐使纯化后的DNA中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转化成尿嘧啶；利用磁珠法对转化后的DNA进行纯化。本发明的试剂包括磁珠、游离DNA提取试剂，DNA甲基化试剂。本发明的试剂盒包括上述试剂。本发明操作简单，方便，所需要样本量小，2‑4mL即可，能提供足量、高纯度的游离DNA，使得后续的PCR扩增、测序以及基于杂交的捕获技术能够有效识别甲基化位点。
一种游离 dna 提取甲基化转化方法试剂试剂盒

[发明专利]甲基化DNA检测方法-CN201610077986.1无效
发明人：范建兵;蔡绪雨 -专利权人：广州市基准医疗有限责任公司
申请日： 2016-02-03 - 公布日： 2016-10-05 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：甲基化DNA检测方法。本申请公开了一种检测包含DNA的样品中DNA片段的特定基因组位置的甲基化的方法，所述方法包括用亚硫酸氢钠处理包含特定基因组位置的DNA片段；将经亚硫酸氢钠处理过的所述DNA片段变性为单链DNA片段；环化所述单链DNA片段；将所述环化的单链DNA片段制备为包含所述特定基因组位置的DNA测序文库；对所述DNA测序文库进行测序以鉴定所述单链DNA片段的序列。本申请还公开了检测包含DNA的样品中DNA片段的特定基因组位置的甲基化的试剂盒，以及环化试剂在制备检测DNA片段的特定基因组位置的甲基化的试剂盒中的用途。
甲基化 dna 检测方法

[发明专利]用于食管癌基因甲基化检测的试剂及其试剂盒与应用-CN202210969834.8在审
发明人：李红乐;李俊;徐斌杰;李香梅;周长悦;陈颖琪 -专利权人：安徽达健医学科技有限公司
申请日： 2022-08-12 - 公布日： 2023-05-26 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，公开了用于食管癌基因甲基化检测的试剂及其试剂盒与应用，具体公开了用于食管癌基因甲基化检测的检测区域。本发明提供的食管癌基因甲基化检测的检测区域，可用于食管癌的早期筛查、进程监测、预后评估的重要检测指标，以DNA甲基化异常作为检测对象，DNA甲基化异常通常发生在癌症早期，并贯穿癌症的发生和发展过程，其甲基化状态一旦形成需要受到外界环境较长时间的持续刺激才会发生改变，因此DNA甲基化区域的检测可以作为食管癌的早期筛查、进程监测、预后评估的重要生物指标。
用于食管癌基因甲基化检测试剂及其试剂盒应用

[发明专利]一种可传代细胞的高保真甲基化位点的分离与分析方法-CN202211093343.8有效
发明人：康亚妮;程酩;王佳宁;邵志峰;李华;秦玉兰 -专利权人：苏州京脉生物科技有限公司;上海交通大学
申请日： 2022-09-08 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本申请提供一种可传代细胞的高保真甲基化位点的分离与分析方法，包括步骤：(A)将可传代细胞进行传代培养多代后，取不同代数的细胞进行基因组DNA提取，作为实验样本；(B)将spike‑in加入实验样本中，进行重亚硫酸盐转化，构建简并代表性重亚硫酸盐测序文库，并进行测序；所述spike‑in为甲基化和未甲基化的lambda DNA；(C)对于测序数据，根据spike‑in计算转化效率和错误转化率最终对甲基化水平的评估产生偏差，并且对每个位点的DNA甲基化水平采用二项分布近似贝叶斯模型进行定量检测，通过比较不同代别的甲基化水平得到高保真甲基化位点。
一种传代细胞高保真甲基化分离分析方法

[发明专利]用于人源粪便DNA甲基化分析的核酸纯化方法-CN201811458096.0有效
发明人：王美丛;刘晶;秦楠 -专利权人：上海锐翌生物科技有限公司
申请日： 2018-11-30 - 公布日： 2021-11-02 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明提出了用于人源粪便DNA甲基化分析的核酸纯化方法，该方法包括：将初始核酸样本进行变性处理；将变性处理产物在温度为75～80℃的条件下进行40～50分钟的转化处理，所述转化处理过程中，变性处理产物中未甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶，甲基化的胞嘧啶仍为胞嘧啶；将转化处理产物进行纯化处理，以便获得用于DNA甲基化分析的核酸样本；其中，所述转化处理是在亚硫酸氢钠、亚硫酸钠以及保护剂存在的条件下进行的。该方法能够有效用于低含量人源DNA样本的甲基化分析，如人源粪便DNA甲基化分析，得到高转化率、高质量的转化后的DNA，有利于甲基化研究的全自动化及标准化操作。
用于粪便 dna 甲基化分析核酸纯化方法

[发明专利]DNA甲基化修饰剂在调控棉花纤维长度中的应用-CN201210142654.9有效
发明人：朱玉贤;靳翔;逄宇;王慧 -专利权人：北京大学
申请日： 2012-05-09 - 公布日： 2012-09-19 - 主分类号： A01G7/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种DNA甲基化修饰剂在调控棉花纤维长度中的应用。所述DNA甲基化修饰剂为DNA甲基化抑制剂或DNA甲基化促进剂。实验证明，使用DNA甲基化抑制剂5-杂氮-2'-脱氧胞苷处理棉花胚珠，当浓度为6μmol/L时，体外培养6天后的棉花纤维长度与对照相比，增长受到的促进作用最高，是对照的2.39倍；DNA甲基化促进剂S-
dna 甲基化修饰调控棉花纤维长度中的应用

[发明专利]一种调控人卵巢颗粒细胞中PLPP3转录活性的方法-CN202310792043.7在审
发明人：袁晓龙;全洪燕;张哲;李硕;何颖婷;黄恩媛;张柳红;陈永财 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2023-06-30 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明以PLPP3基因DNA甲基化以及PLPP3为研究对象，通过分析PLPP3在卵泡发育过程中的潜在调控作用，利用5‑Aza‑CdR或DNMT1‑siRNA验证PLPP3低甲基化促进其表达，而通过CpG甲基化处理带来PLPP3高甲基化则抑制了其表达。最后通过dCas9‑DNMT1和gRNA实现定点甲基化找到PLPP3甲基化水平发生变化的具体区域。本发明通过探究DNA甲基化调控PLPP3转录表达机制的应用，对研究PLPP3基因的DNA甲基化参与卵泡发育调控及卵巢衰老分子机制研究具有具有很好的应用价值。
一种调控卵巢颗粒细胞 plpp3 转录活性方法

[发明专利]预测缺血性脑卒中发病风险的DNA羟甲基化标志物及试剂盒-CN202210467094.8在审
发明人：彭浩;姚佳玲;刘洋 -专利权人：苏州大学
申请日： 2022-04-29 - 公布日： 2022-07-22 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本发明涉及一种预测缺血性脑卒中发病风险的DNA羟甲基化标志物及试剂盒，DNA羟甲基化标志物包括NPPA基因启动子区的DNA羟甲基化位点Chr1:11908348，其羟甲基化程度指示缺血性脑卒中发病风险程度本发明提供的NPPA基因DNA羟甲基化标志物可用于预测缺血性脑卒中发病风险，也可以作为预防和控制缺血性脑卒中的干预靶点，不仅有助于阐释心房利钠肽作用于缺血性脑卒中的分子机制，也将为NPPA基因羟甲基化作为预防和控制缺血性脑卒中的药物靶点提供重要的流行病学证据
预测缺血性脑卒中发病风险 dna 甲基化标志试剂盒

[发明专利]一种DNA甲基化测序文库甲基化转化率的评估方法、应用、终端设备及存储介质-CN202211343981.0有效
发明人：王小庆;洪媛媛;王睿;聂佩瑶;夏瑞燕;吕芳;张琦;陈维之;杜波 -专利权人：臻和（北京）生物科技有限公司;臻悦生物科技江苏有限公司
申请日： 2022-10-31 - 公布日： 2023-01-31 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：本发明公开了一种DNA甲基化测序文库甲基化转化率的评估方法、应用、终端设备及计算机可读存储介质，属于基因检测技术领域。上述甲基化测序文库甲基化转化率的评估方法是选择位点甲基化转化率与甲基化文库甲基化转化率相关的位点作为参照位点，该评估方法克服了酶学转化法甲基化文库构建过程中甲基化文库C‑T甲基化转化率受碱基序列影响的问题，利用该参照位点甲基化转化率能够快速评估甲基化文库甲基化转化率，并用于DNA甲基化检测中甲基化转化率的质控，方便快捷，解决了传统方法周期长、耗时、耗力等问题。同时提供了终端设备及计算机可读存储介质，能够根据参照位点的甲基化转化率输出文库甲基化转化率或输出文库是否合格的结果。
一种 dna 甲基化序文转化评估方法应用终端设备存储介质

[发明专利]一种评估脑卒中发病风险的DNA甲基化标志物、引物及其应用-CN202210546425.7在审
发明人：彭浩;陈立楠;刘洋 -专利权人：苏州大学
申请日： 2022-05-19 - 公布日： 2022-07-29 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本发明涉及一种评估脑卒中发病风险的DNA甲基化标志物、引物及其应用，DNA甲基化标志物包括CORIN基因启动子区的DNA甲基化位点Chr4:47840038、Chr4:47839941和Chr4:47839933中的至少一个位点，并基于该DNA甲基化标志物提供了一种评估脑卒中发病风险的试剂盒。本发明提供的CORIN基因DNA甲基化标志物可用于预测脑卒中发病风险，作为脑卒中高危人群的筛查指标，也可以作为预防和控制脑卒中的干预靶点。本发明不仅有助于阐释Corin作为心房利钠肽的调控者参与脑卒中发病的分子机制，也将为CORIN基因甲基化作为预防和控制脑卒中的药物靶点提供重要的流行病学证据。
一种评估脑卒中发病风险 dna 甲基化标志引物及其应用

[发明专利]一种Hemi-M甲基化修饰引物及其应用-CN201810638121.7有效
发明人：张晓妮;屈宏越;许明炎;陈实富 -专利权人：深圳市海普洛斯生物科技有限公司
申请日： 2018-06-20 - 公布日： 2020-05-12 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明提供了一种Hemi‑M甲基化修饰引物及其应用，所述引物至少含有一个被甲基化修饰的胞嘧啶，其中，所述甲基化修饰包括甲基化和/或羟甲基化修饰；本发明通过设计特异性的甲基化修饰引物，巧妙地与dCTP被mdCTP替代的dNTP相结合，对样本DNA进行胞嘧啶保护，创造性地将其应用于甲基化文库的构建，辅佐以特定的标签，适用于多种应用领域和场景，从而解决文库DNA自身对比分析的问题，实现更准确的甲基化位点分析，具备广阔的应用前景和巨大的市场价值
一种 hemi 甲基化修饰引物及其应用

[发明专利]用于制备检测DNA甲基化试样的试样处理液和试剂盒-CN200810008337.1无效
发明人：梶田昌裕;酒井绫子;山本宪明;石原英干 -专利权人：希森美康株式会社
申请日： 2008-02-26 - 公布日： 2008-09-03 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提供一种可以获得稳定的DNA甲基化检测结果、前处理简便易行、含有蛋白酶和水性溶剂的、用于制备DNA甲基化检测用试样的试样处理液和试剂盒、使用该试样处理液和该试剂盒的试样制备方法和DNA甲基化检测方法
用于制备检测 dna 甲基化试样处理试剂盒

[发明专利]一种甲基化DNA的高通量测序方法及其应用-CN201080067524.2有效
发明人：王燕;叶明芝;韩旭;张秀清;孙中生 -专利权人：中国科学院心理研究所;深圳华大基因科技有限公司
申请日： 2010-08-11 - 公布日： 2013-03-13 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种甲基化DNA的高通量测序方法及其应用，具体而言本发明提供了将甲基化DNA免疫共沉淀，重复序列去除和亚硫酸氢盐处理三者结合的甲基化DNA的高通量测序方法，通过本发明的方法减小了测序文库大小，
一种甲基化 dna 通量方法及其应用

[发明专利]一种检测DNA甲基化位点对数量性状加性和显性遗传效应的方法及其应用技术-CN201910005389.1在审
发明人：张德强;肖亮;杜庆章;权明洋;卢文杰;陈盼飞 -专利权人：北京林业大学
申请日： 2019-01-03 - 公布日： 2019-04-02 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明提供了一种检测DNA甲基化位点对数量性状加性和显性遗传效应的方法及其应用，属于植物分子育种领域；所述方法包括以下步骤：1)采集种质资源群体样品，进行表型性状检测，并对所述样品进行基因组DNA的提取；2)利用所述样品基因组DNA构建重亚硫酸盐测序文库，测序；3)从所述DNA甲基化测序数据中鉴定DNA甲基化位点，并基因型分型；4)采用Tassel 5.0软件包中的混合线性模型将获得的DNA甲基化位点的基因型分型数据与样品表型性状数据进行关联性分析，筛选显著关联的DNA甲基化位点，并对其加性和显性遗传效应进行分析。
位点显性遗传加性基因型分型基因组DNA 表型性状数量性状种检测软件包混合线性模型植物分子育种关联性分析甲基化位点重亚硫酸盐测序数据测序文库辅助育种基因标记技术指导应用技术种质资源鉴定DNA 测序构建育种采集关联筛选检测群体应用分析

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