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[发明专利]DNA甲基化文库的构建方法以及DNA甲基化的检测方法-CN202111497281.2在审
发明人：罗慧娟;曹博洋;李南南;罗甜;吴逵;赵鑫 -专利权人：深圳华大生命科学研究院
申请日： 2021-12-08 - 公布日： 2023-06-09 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明涉及生物检测领域，更具体地，涉及DNA甲基化文库的构建方法以及DNA甲基化的检测方法。所述DNA甲基化文库的构建方法包括：重亚硫酸盐处理、第一接头连接、第二接头连接和PCR扩增。本发明方法操作简便快捷、成本低，对基因组GC覆盖偏向性小，具有基因组以及CpG岛覆盖度高的特点，是一个可以很好的用于DNA全基因组(特别是尿液游离DNA全基因组)甲基化分析的技术，可以包装成建库试剂盒。
dna 甲基化文库构建方法以及检测

[发明专利]一种基于DNA甲基化位点基因型的全基因组分型方法-CN202111123272.7在审
发明人：郑峻松;刘华敏;李艳;方立超;黄辉;汪莉娜;邓均;朱全敬;朱垂雨;李承红;刘飞雪;吴春梅 -专利权人：中国人民解放军陆军军医大学
申请日： 2021-09-24 - 公布日： 2021-11-26 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于DNA甲基化位点基因型的全基因组分型方法，包括以下步骤：步骤一，采集样品；步骤二，建立DNA文库；步骤三，文库测序；步骤四，鉴定位点；步骤五，基因型分型；所述步骤二中，联合甲基化敏感性限制性内切酶的MBD处理是指，用非待测区的内切酶和甲基化敏感的限制性内切酶同时消化DNA片段，随后通过MBD柱捕捉，保留了含有甲基化区的片段，所述步骤一中，针对一个群体中不同的时段，如白天和黑夜，本发明相较于现有的基因型分型方法，能够判断不同时段的环境对DNA甲基化状态的影响；本发明能够判断不同生长状态下的DNA甲基化状态的变化；本发明采用两种不同的处理DNA的方法，提高了基因型分型的精准性。
一种基于 dna 甲基化基因型基因组分方法

[发明专利]结直肠癌DNA甲基化标志物-CN201910702472.4有效
发明人：丁伟峰;濮伟霖;鞠少卿;钱飞;马彦云;张健锋;邵可可;肖峰;靳钦 -专利权人：南通大学附属医院
申请日： 2019-07-31 - 公布日： 2022-12-23 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明提供一种用于预测结直肠癌(CRC)风险的DNA甲基化标志物集，所述标志物集包括ESR1、ZNF132、ZNF229、ZNF542和ZNF677；本发明还提供一种用于测定DNA甲基化标志物集的试剂盒；本发明还提供一种DNA甲基化标志物集用于制备预测受试者中结直肠癌(CRC)风险的试剂盒的用途。本发明还提供一种获取DNA甲基化标志物集的方法，本发明还提供一种用于评估结直肠癌DNA甲基化标志物集诊断准确性的方法，本发明提出了预测结直肠癌(CRC)风险的DNA甲基化标志物集并构建了诊断模型(模型1
直肠癌 dna 甲基化标志

[发明专利]预测精神分裂症发生风险的DNA甲基化标记物及筛选方法和应用-CN202110075050.6在审
发明人：宗小芬;邹秀芬;徐顺生;刘忠纯;胡茂林;张钦然 -专利权人：武汉大学
申请日： 2021-01-20 - 公布日： 2021-06-01 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于预测精神分裂症发生风险的DNA甲基化标记物，其特征在于，DNA甲基化标记物选自人第1～22号染色体上的至少一个甲基化CpG位点。本发明还提供上述甲基化标记物在制备用于预测精神分裂症发生风险的诊断试剂和/或辅助诊断试剂和/或诊断试剂盒中的用途。本发明进一步提供上述甲基化标记物的筛选方法。用于预测精神分裂症发生风险的DNA甲基化标记物预测精神分裂症发生风险，可以提高精神分裂症发生风险的预测准确率，节约成本，适于推广应用，具有较好的应用前景；本发明甲基化标记物的筛选方法，简单、科学、可靠。
预测精神分裂症发生风险 dna 甲基化标记筛选方法应用

[发明专利]粪便宿主DNA甲基化检测方法-CN201810266872.0在审
发明人：罗海贝;王臣;赵然;冯俊;陈小凤 -专利权人：上海锐翌生物科技有限公司
申请日： 2018-03-28 - 公布日： 2018-06-29 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明提出了提取粪便中宿主DNA的试剂组合物及利用其提取粪便中宿主DNA的方法、DNA甲基化的方法和对经过甲基化的粪便宿主DNA进行甲基化特异性PCR检测的试剂盒及方法。利用本发明的试剂组合物能够充分提取出粪便中的宿主DNA，且提取效率较好、宿主DNA纯度较高，操作简便，适于规模化应用。
宿主DNA 粪便试剂组合物甲基化特异性PCR 甲基化检测硫酸根离子提取效率钙离子规模化甲基化裂解液试剂盒絮凝剂检测应用

[发明专利]用于检测肝癌的DNA甲基化组合物、试剂盒及应用-CN202310832382.3在审
发明人：吴飞燕;柳泽旭 -专利权人：杭州萧山华翼医学检验实验室有限公司
申请日： 2023-07-07 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明提供了用于检测肝癌的DNA甲基化组合物和试剂盒。所述DNA甲基化组合物包括GSTP1基因甲基化上下游引物及探针，RASSF1A基因甲基化上下游引物及探针，P16基因甲基化上下游引物及探针，RIZ1基因甲基化上下游引物及探针，LHPP基因甲基化上下游引物及探针，内参GAPDH基因甲基化上下游引物及探针。本发明采用多重PCR技术，通过创新设计的特异性引物及探针，一是实现与多个目标甲基化序列的精准匹配，二是实现多个目标甲基化序列扩增时温度梯度的统一；具有检测结果准确、检测方法灵敏、特异性高、实验流程优化、本发明通过检测血浆cfDNA中上述基因组合的甲基化水平，进行肝癌检测，具有高度灵敏度和特异度。
用于检测肝癌 dna 甲基化组合试剂盒应用

[发明专利]快速检测尿液脱落细胞基因甲基化的试剂及方法-CN202310560633.7在审
发明人：肖国伟;龚伟伟 -专利权人：上海长岛抗体诊断试剂有限公司
申请日： 2023-05-17 - 公布日： 2023-08-01 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明涉及快速检测尿液脱落细胞基因甲基化的试剂及方法，具体提供一种细胞裂解液，包括离子螯合剂、蛋白变性剂、缓冲液、盐以及表面活性剂。使用本文提供的细胞裂解液结合DNA甲基化检测可快速检测低细胞含量的样品中的细胞DNA甲基化状态，而无需单独提取DNA。
快速检测尿液脱落细胞基因甲基化试剂方法

[发明专利]飞行时间质谱多重靶向DNA甲基化位点定量检测方法-CN202110145666.6在审
发明人：张方舟;廉欢欢;张起起;秦胜红;王新新;梁海泳 -专利权人：博淼生物科技（北京）有限公司
申请日： 2021-02-02 - 公布日： 2021-04-30 - 主分类号： C12Q1/6872 文献下载
摘要：本发明属生物技术领域，具体公开了一种飞行时间质谱多重靶向DNA甲基化位点定量检测方法，本发明提供了一种DNA甲基化位点的高通量检测方法，可以针对多重待检测的甲基化位点，设计特异性探针，在同一个反应体系中，得到定量甲基化程度检测结果。具有操作简单、可同时检测在不同区域内的甲基化位点，降低对应的实验成本等特点。
飞行时间多重靶向 dna 甲基化定量检测方法

[发明专利]甲基化SLC19A3基因的应用-CN201110048270.6有效
发明人：王娴;金洪传;吴启安 -专利权人：杭州博谱医药科技有限公司
申请日： 2011-03-01 - 公布日： 2011-09-14 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及医药生物技术领域，具体提供甲基化SLC19A3基因在制备肿瘤诊断、检测和筛查药物中的应用。SLC19A3基因在肿瘤细胞以及肿瘤组织中特异性低表达，这是因为其启动子区DNA发生了肿瘤特异性的高甲基化，逆转该基因的DNA甲基化，可以恢复SLC19A3基因在肿瘤细胞中的表达。甲基化SLC19A3基因可以在肿瘤患者的外周血中检测到，而且，甲基化水平同肿瘤进展密切相关。因此在外周血中检测SLC19A3基因的DNA甲基化，是检测肿瘤进展以及人群筛查和诊断肿瘤的一种无创性新方法。
甲基化 slc19a3 基因应用

[发明专利]一种DNA甲基化实时检测方法及其应用-CN201610933983.3有效
发明人：戴宗;张立;邹小勇 -专利权人：中山大学
申请日： 2016-10-31 - 公布日： 2019-04-16 - 主分类号： G01N27/26 文献下载
摘要：本发明公开了一种DNA甲基化实时检测方法及其应用。本发明基于DNA双链的长程电子转移特性，结合特异性化学衍生化反应，建立一种快速、简便的DNA甲基化动态过程实时电化学检测方法和电化学生物传感器，并应用于DNA甲基化过程的实时检测，酶抑制剂筛选，以及酶序列偏好性等研究
一种 dna 甲基化实时检测方法及其应用

[发明专利]一种肝细胞肝癌患者诊断、预后和复发统一模型的构建方法-CN202010305378.8在审
发明人：龙俊宇;赵海涛 -专利权人：北京恩瑞尼生物科技股份有限公司
申请日： 2020-04-17 - 公布日： 2020-07-10 - 主分类号： G16B5/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种肝细胞肝癌患者诊断、预后和复发统一模型的构建方法，包括以下步骤：Step1)采集肝细胞肝癌的基因表达数据和DNA甲基化数据；Step2)对肝细胞肝癌的基因表达数据和DNA甲基化数据进行分析，鉴定出肝细胞肝癌中的DNA甲基化驱动基因；Step3)对肝细胞肝癌中的DNA甲基化驱动基因通过单因素Cox回归、最小绝对收缩和选择算子回归分析和多因素Cox回归分析建立肝细胞肝癌患者诊断、预后和复发统一模型本发明发现并验证了由3个DNA甲基化驱动基因组成的肝细胞肝癌患者诊断、预后和复发统一模型，为肝细胞肝癌生物标记物筛查提供了新的研究方向，为肝细胞肝癌患者的个体化治疗提供了新的可能性。
一种肝细胞肝癌患者诊断预后复发统一模型构建方法

[发明专利]一种新型多样本多片段DNA甲基化检测方法-CN202110642369.2有效
发明人：陈志伟;许林浩;王军;刘鑫;叶竹佳;范建兵 -专利权人：广州市基准医疗有限责任公司
申请日： 2021-06-09 - 公布日： 2023-03-17 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：本发明提供了一种新型多样本多片段DNA甲基化检测方法，包括以下步骤：S1、提取样本基因组DNA或游离DNA，对提取的DNA使用重亚硫酸盐进行处理，然后使用特异性引物对处理好的DNA进行依赖甲基化多重PCR扩增；S2、多重PCR产物处理和纯化：对步骤S1获得的多重PCR产物用酶或磁珠进行处理，然后纯化；S3、对步骤S2获得的纯化产物的甲基化水平进行检测。上述检测方法可以同时对多样本多基因的DNA甲基化进行检测，对起始DNA量要求低，非常适用于低拷贝数的甲基化片段检测，具有灵敏度高、特异性好、准确度高、检测限低以及检测成本低等优点，且整个检测流程和后续的数据分析步骤更简单更科学
一种新型多样片段 dna 甲基化检测方法

[发明专利]一种区分DNA中5-甲基化胞嘧啶和5-羟甲基化胞嘧啶的方法-CN201910624669.0在审
发明人：刘震;李阳 -专利权人：武汉伯远生物科技有限公司
申请日： 2019-07-11 - 公布日： 2019-12-03 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明属于表观遗传学技术领域，具体涉及一种区分DNA中5‑甲基化胞嘧啶和5‑羟甲基化胞嘧啶的方法。该方法基于APOBEC3A对5‑mC和5‑hmC脱氨基转化的差异性，直接将被检测位点作为特异性引物的3’末端，qPCR扩增后不同的甲基化修饰会产生不同的扩增Ct值，根据酶转化产物和阴性对照之间的Ct值差异，从而快速区分被检测位点的修饰是甲基化修饰还是羟甲基化修饰，提高了分析时效性，节约了二次测序成本。该方法转化过程对DNA几乎无损伤作用，可利用低至1ng的样本DNA完成分析，能够广泛应用于DNA表观遗传分析领域。
甲基化修饰羟甲基化扩增位点修饰甲基化胞嘧啶表观遗传学特异性引物遗传分析阴性对照样本DNA 胞嘧啶差异性酶转化时效性脱氨基无损伤检测测序转化分析节约应用

[发明专利]SNRPN基因甲基化检测试剂盒-CN202011618523.4在审
发明人：舒思敏;胡东;郝玮;李小青 -专利权人：武汉海希生物科技有限公司
申请日： 2020-12-31 - 公布日： 2021-04-06 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本发明提供一种SNRPN基因甲基化检测试剂盒，该试剂盒包括两对SNRPN基因甲基化检测引物，序列分别如SEQ ID NO:1‑4所示。本发明还提供基于MS‑PCR技术的SNRPN基因甲基化检测方法，该方法包括：提取血样DNA，进行DNA甲基化修饰，甲基化修饰的DNA经纯化、质控后作为模板，利用两对引物进行PCR反应，PCR产物经琼脂糖凝胶电泳本方法只需少量DNA即可完成检测，检测过程耗时短，成本低，准确度高，可实现对PWS患者的早期快速筛查。
snrpn 基因甲基化检测试剂盒

[发明专利]一种检测VGLL3基因DNA甲基化程度的试剂盒及其应用-CN202110719685.5有效
发明人：黄毅 -专利权人：宁波市第一医院
申请日： 2021-06-28 - 公布日： 2022-04-08 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测VGLL3基因DNA甲基化程度的试剂盒及其应用，检测试剂盒内包括一对VGLL3基因DNA甲基化特异性扩增引物及一个VGLL3基因DNA甲基化特异性测序引物：其中特异性扩增上游引物具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，特异性扩增下游引物具有如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，甲基化特异性测序引物如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列；VGLL3基因DNA被检测序列所在区域为基因前端特定位置并通过焦磷酸测序技术进行DNA甲基化水平分析；VGLL3基因DNA甲基化水平与脑动脉瘤的患病率呈负相关；优点是该诊断试剂盒可以方便快捷地在分子水平上实现对脑动脉瘤的检测，检测效率高，针对性强，以VGLL3基因DNA甲基化为靶点的药物为脑动脉瘤辅助诊断、检测和筛选有效手段。
一种检测 vgll3 基因 dna 甲基化程度试剂盒及其应用