本发明提供了用于牛传染性鼻气管炎病毒检测的核酸、试剂盒及微滴式数字PCR方法,其核酸包括正向引物、反向引物和探针,正向引物的序列如SEQ ID NO.1所示,反向引物的序列如SEQ ID NO.2所示,探针的序列如SEQ ID NO.3所示。本发明的牛传染性鼻气管炎病毒检测微滴式数字PCR检测试剂盒的灵敏度为1copies/μL,并只能特异性检测牛传染性鼻气管炎病毒。使用本发明的试剂盒检测牛传染病鼻气管炎病毒疑似样品,结果表明其准确率高于现有的qPCR,可以实现痕量病毒的检测,且无需标准曲线即可对核酸进行绝对定量。本发明的检测方法可实现对牛传染性鼻气管炎病毒的高特异性、高灵敏度、绝对定量检测。