本发明涉及一种阔盘吸虫的实时荧光PCR检测引物、探针及其检测方法和应用。一种阔盘吸虫的实时荧光PCR检测引物、探针，包括引物对和探针，所述引物对为如下任一种：a1)由SEQ ID No.1所示的单链DNA和SEQ ID No.2所示的单链DNA组成；a2)由SEQ ID No.1所示的单链DNA和SEQ ID No.2所示的单链DNA经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的单链DNA，且与a1)中所述引物对功能相同的引物对。本发明采用的荧光PCR检测方法重复性好，灵敏度高，特异性强，可对胰阔盘吸虫、腔阔盘吸虫和枝睾阔盘吸虫进行筛查，对控制阔盘吸虫感染、传播和防治具有重要意义。
本发明公开了一种犬冠状病毒N蛋白抗原截短体及其应用，所述抗原截短体的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明根据已有和预测的蛋白质三维结构，对犬冠状病毒核衣壳蛋白N蛋白的结构进行了分析，选择稳定性较好的片段，使用大肠杆菌原核表达系统进行表达，经过免疫学实验验证，该抗原蛋白活性高，可以很好地结合抗体，制备的ELISA抗体检测试剂盒所用抗原原料生产成本低，试剂盒特异性好、敏感性高，可以应用于临床犬血清样本中犬冠状病毒抗体检测。
本发明公开了一种特异性结合犬细小病毒VP2蛋白的单克隆抗体在检测试剂中的应用，所述单克隆抗体含有名称为VH的重链可变区和名称为VL的轻链可变区，所述VH和VL均由互补决定区和框架区组成；所述互补决定区由CDR1、CDR2和CDR3组成；所述单克隆抗体的VH的CDR1~CDR3的氨基酸序列如SEQ ID No.1~3所示；所述单克隆抗体的VL的CDR1~CDR3的氨基酸序列如SEQ ID No.4~6所示。本发明通过昆虫杆状病毒系统表达获得高保守性的VP2蛋白，免疫小鼠获得特异性的单克隆抗体，具有良好的特异性，为建立更准确、更快速的犬细小病毒检测方法奠定了基础。
本发明公开了一种抗甲萘威单克隆抗体的轻链和重链可变区及其应用，单克隆抗体轻链可变区分别为CDR‑L1、CDR‑L2、CDR‑L3，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7所示；单克隆抗体重链可变区分别为CDR‑H1、CDR‑H2、CDR‑H3，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10所示。本发明提供的一种对甲萘威具有较高亲和力和检测灵敏度的单克隆抗体具有特异性强、亲和力和检测灵敏度高、检测方便快捷的优点，可以作为酶联免疫检测和胶体金免疫检测的原料，可以为间接竞争ELISA试剂盒以及胶体金试纸条的研发推广奠定基础。
本发明公开了新型北美萤火虫荧光素酶的变体及应用其的ATP荧光检测试剂。具有北美萤火虫荧光素酶活性的蛋白质变体，其中，SEQ ID NO.1中的第354位的谷氨酸被除谷氨酸以外的氨基酸取代，和/或第405位的脯氨酸被除脯氨酸以外的氨基酸取代，和/或第436位的天冬氨酸被除天冬氨酸以外的氨基酸取代。本发明的ATP荧光检测试剂具有作简便、灵敏、特异、快速且可低温长时间保存的优点，荧光素酶氨基酸突变导致荧光素酶蛋白质空间结构发生改变，增加其热稳定性；并在此基础上摸索糖和一些大分子蛋白对其保护力，进一步提高了该试剂的稳定性。
本发明实施例公开了一种特异性结合口蹄疫病毒O型的单克隆抗体在制备检测口蹄疫病毒O型试剂盒中的应用，所述单克隆抗体为1B8单克隆抗体；其中，所述1B8单克隆抗体含有名称为VH的重链可变区和名称为VL的轻链可变区，所述VH和VL均由互补决定区和框架区组成；所述互补决定区由CDR1、CDR2和CDR3组成；所述1B8单克隆抗体的VH的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；所述1B8单克隆抗体的VH的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示；所述1B8单克隆抗体的VH的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示；所述1B8单克隆抗体的VL的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。试验证明，本发明提供的1B8单克隆抗体制备的检测试剂中，在检测FMD‑O型毒株中，具有很好的灵敏度和特异性。
本发明提供一种抗孕酮的单克隆抗体、试剂盒及应用，抗孕酮的单克隆抗体，包括轻链和重链，轻链可变区包括CDR1、CDR2、CDR3；重链可变区包括CDR1、CDR2、CDR3；轻链CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，轻链CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，轻链CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；重链CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，重链CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，重链CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。该单克隆抗体与孕酮结合力强，灵敏度好；该试剂盒的检测限更低，可作为酶联免疫检测和胶体金免疫检测的原料。
本发明公开了一种狂犬病病毒糖蛋白抗原、截短体及其应用。如下M1）所示的蛋白质：M1）狂犬病病毒糖蛋白自N端起第20‑69位氨基酸残基和狂犬病病毒糖蛋白自N端起第210‑415位氨基酸残基连接形成，所述狂犬病病毒糖蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明根据已有的蛋白质三维结构，对狂犬病病毒糖蛋白与抗体的结构进行了分析，选择与抗体直接相互作用的稳定性较好的抗原片段，使用真核昆虫表达系统进行表达，该蛋白经过免疫学实验验证，可以很好地结合抗体，该截短体蛋白抗原与抗体的亲和力强，可用于制备高敏感性的诊断试剂盒。
本发明实施例公开了犬传染性肝炎病毒六邻体蛋白抗原、截短体及其应用。如下M1）所示的蛋白质：M1）犬传染性肝炎病毒六邻体蛋白自N端起第118‑481位氨基酸；所述犬传染性肝炎病毒六邻体蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明实施例根据已有和预测的蛋白质三维结构，对犬传染性肝炎病毒蛋白的结构进行了分析，选择稳定性较好的片段，使用原核表达系统进行表达，经过免疫学实验验证，该抗原蛋白可以很好地结合犬传染性肝炎病毒蛋白抗体，利用该抗原制备的抗体检测试剂盒效果好、成本更低、特异性和稳定性强。
本发明提供一种抗壬基酚聚氧乙烯醚的单克隆抗体、试剂盒及应用，抗壬基酚聚氧乙烯醚的单克隆抗体，包括轻链和重链，轻链可变区包括CDR1、CDR2、CDR3；重链可变区包括CDR1、CDR2、CDR3；轻链CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，轻链CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，轻链CDR3的氨基酸残基为LKI；重链CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，重链CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，重链CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。该单克隆抗体与壬基酚聚氧乙烯醚结合力强，灵敏度好；该试剂盒的检测限更低。
