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[发明专利]一种微滴式数字PCR荧光信号处理方法-CN202210025123.5在审
发明人：刘斌剑;刘杰;钟要齐;邓新萍;吕才树;王海;吴林涛 -专利权人：深圳麦科田生物医疗技术股份有限公司
申请日： 2022-01-10 - 公布日： 2022-04-01 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明公开了一种微滴式数字PCR荧光信号处理方法，包括：对原始荧光信号进行滤波得到第一荧光信号；基于第一荧光信号识别微滴参数；基于微滴参数和预设微滴过滤条件过滤微滴；对过滤后的微滴进行聚类从而得到第一阈值；基于第一阈值统计阴性微滴和阳性微滴的个数，并计算待测物的浓度。本发明提出的一种微滴式数字PCR荧光信号处理方法，可以准确地从荧光信号中提取出微滴信号、并准确的区分阴性微滴和阳性微滴，从而实现了样品浓度的准确计算。
一种微滴式数字 pcr 荧光信号处理方法

[发明专利]离心式高通量微滴制备芯片-CN202010161493.2有效
发明人：周武平;黎海文;刘聪;张涛;蒋克明;张志强 -专利权人：中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
申请日： 2020-03-10 - 公布日： 2022-01-25 - 主分类号： B01L3/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种离心式高通量微滴制备芯片，包括芯片本体，以及设置在所述芯片本体上的装夹结构和一个或多个高通量微滴制备单元；所述高通量微滴制备单元包括依次连通的样品腔体、缓冲腔体、微滴收集腔体和废液腔体；所述缓冲腔体和微滴收集腔体之间通过微孔阵列连通。本发明提供了一种离心式高通量微滴制备芯片，利用在离心力的驱动下，微孔阵列中各个孔同时并行制备微滴的特点，能实现高通量微滴的制备，制备速率达现有技术的50~100倍；并同时保持简单易实现和一致性高的优势。本发明的离心式高通量微滴制备芯片，对于提高微滴制备技术和其在微滴数字PCR等技术领域中的应用具有积极意义。
离心通量制备芯片

[发明专利]微滴式进样荧光检测控制系统-CN201711407907.X在审
发明人：何关金;梁帅;廖丽敏;古晓奎 -专利权人：广东顺德墨赛生物科技有限公司
申请日： 2017-12-22 - 公布日： 2018-03-30 - 主分类号： G01N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种微滴式进样荧光检测控制系统，包括进样模块、微滴检测模块以及主控制系统，所述进样模块用于抽取微滴样本并推送所述微滴至微滴检测模块；所述微滴检测模块用于对所述微滴进行信号检测以得到信号检测数据；所述主控制系统电连接于所述进样模块以及所述微滴检测模块，用于控制进样模块抽取微滴样本并推送所述微滴至微滴检测模块，控制微滴检测模块进行信号检测，获得检测结果并将所述检测结果数据发送给计算机系统进行处理和分析本发明采用微滴式荧光检测方法，与目前国内市场上使用较多的孔板式或芯片式检测方法相比，具有单个反应器体积更小，通量大，成本低，精度高等优点。
微滴式进样荧光检测控制系统

[实用新型]微滴式进样荧光检测控制系统-CN201721845246.4有效
发明人：何关金;梁帅;廖丽敏;古晓奎 -专利权人：广东顺德墨赛生物科技有限公司
申请日： 2017-12-22 - 公布日： 2018-09-11 - 主分类号： G01N15/10 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种微滴式进样荧光检测控制系统，包括进样模块、微滴检测模块以及主控制系统，所述进样模块用于抽取微滴样本并推送所述微滴至微滴检测模块；所述微滴检测模块用于对所述微滴进行信号检测以得到信号检测数据；所述主控制系统电连接于所述进样模块以及所述微滴检测模块，用于控制进样模块抽取微滴样本并推送所述微滴至微滴检测模块，控制微滴检测模块进行信号检测，获得检测结果并将所述检测结果数据发送给计算机系统进行处理和分析本实用新型采用微滴式荧光检测方法，与目前国内市场上使用较多的孔板式或芯片式检测方法相比，具有单个反应器体积更小，通量大，成本低，精度高等优点。
微滴检测模块进样模块荧光检测本实用新型主控制系统检测结果控制系统信号检测进样推送抽取样本信号检测数据处理和分析单个反应器计算机系统电连接孔板式数据发芯片式通量国内市场检测

[发明专利]微滴式数字PCR荧光检测系统和荧光检测装置-CN201610298481.8有效
发明人：关烨锋;张道森 -专利权人：广东顺德工业设计研究院(广东顺德创新设计研究院)
申请日： 2016-05-05 - 公布日： 2018-05-22 - 主分类号： C12M1/36 文献下载
摘要：本发明公开一种微滴式数字PCR荧光检测系统和荧光检测装置，其中，微滴式数字PCR荧光检测系统包括微滴成像模块、荧光检测模块、样品传送模块以及控制模块，微滴成像模块和荧光检测模块与控制模块连接。微滴样品在所述样品传送模块中依次经过微滴成像模块以及荧光检测模块。微滴成像模块测量每一个微滴样品的直径的大小，当微滴样品的直径满足预设值时，记为有效微滴样品，统计有效微滴样品的总数量发送至控制模块。荧光检测模块收集荧光探针产生的荧光信号，将有效微滴样品的荧光信号转换成数字信号发送至控制模块。控制模块结合数字信号和有效微滴样品的总数量进行运算分析，得到目标核酸的浓度。本发明技术方案使微滴样品的数量能够被精确统计。
微滴式数字 pcr 荧光检测系统装置

[发明专利]微滴式数字PCR油相组合物、微滴式数字PCR组合物及其应用和试剂盒-CN202210771786.1在审
发明人：周鑫鑫;沈敏杰;高琪;王虹军;陈芝娟;贺贤汉 -专利权人：杭州博日科技股份有限公司
申请日： 2022-06-30 - 公布日： 2022-08-26 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明提供了一种微滴式数字PCR油相组合物、微滴式数字PCR组合物及其应用和试剂盒，涉及生物技术领域。本发明提供的微滴式数字PCR油相组合物，包括特定配比的氟化油和PFPE‑PEG‑PFPE，该油相组合物与水相形成的微滴大小均匀，稳定性好，对于PCR扩增的影响小，能够作为油相应用于微滴式数字PCR中。本发明提供的微滴式数字PCR组合物，包括上述微滴式数字PCR油相组合物和水相组合物，其中水相组合物含有特定浓度的热启动Taq酶、MgCl2、KCl、Tris‑HCl、BSA、dNTP、PEG2000、甜菜碱、DMSO、甘油、鱼精DNA和Proclin‑300，该组合物形成的液滴更稳定。
微滴式数字 pcr 组合及其应用试剂盒

[发明专利]一种用于制备微滴式数字PCR液滴的油相组合物及其应用-CN201811182357.0有效
发明人：段小红;李曼曼;承康平;丁蕊;张磊;王东亮;周启明 -专利权人：南京求臻基因科技有限公司
申请日： 2018-10-11 - 公布日： 2021-05-25 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于制备微滴式数字PCR液滴的油相组合物及其应用。一种用于制备微滴式数字PCR液滴的油相组合物，所述的组合物由92～96％白油及1～3％NP‑10、2～5％L548组成，各组分之和为100％。本发明所述的油相组合物在制备微滴式数字PCR检测试剂中的应用。本发明提供了用于制备微滴式数字PCR液滴的油相组合物以及在微滴式数字PCR中的应用，最终使用本发明来制备的液滴具有大小均一、热稳定性好、不易产生气泡，不融合，且对PCR扩增无抑制作用等优点。
一种用于制备微滴式数字 pcr 组合及其应用

[发明专利]微滴式数字聚合酶链式反应芯片-CN202110373887.9有效
发明人：蒋克明;黎海文;周武平;张涛;刘聪;张志强 -专利权人：季华实验室
申请日： 2021-04-07 - 公布日： 2021-07-06 - 主分类号： C40B40/06 文献下载
摘要：本发明公开一种微滴式数字聚合酶链式反应芯片，其中，微滴式数字聚合酶链式反应芯片包括微滴结构、微滴收集结构以及流道结构，微滴结构形成有间隔的样品腔和储油腔，微滴收集结构包括安装于微滴结构下方的微滴收集管，微滴收集管内形成有收集腔，流道结构设于微滴结构，流道结构的出口连通收集腔，流道结构的入口包括第一入口和第二入口，第一入口连通储油腔的下端，第二入口连通样品腔的下端，流道结构的入口分别连通样品腔的下端和储油腔的下端，有助于样品和油品在重力的作用下进入流道结构，以在流道结构的作用下形成包裹有样品的微滴，流道结构的出口连通的收集腔，以使微滴通过流道结构流入收集腔，整个过程无需移液。
微滴式数字聚合链式反应芯片

[发明专利]一种矫正微滴式数字PCR通道间微滴位置的方法-CN201910099548.9有效
发明人：程标;夏江 -专利权人：领航基因科技（杭州）有限公司
申请日： 2019-01-31 - 公布日： 2021-07-13 - 主分类号： G06T7/00 文献下载
摘要：本发明涉及体外DNA扩增检测领域，具体地说是涉及一种矫正微滴式数字PCR通道间微滴位置的方法。所述矫正微滴式数字PCR通道间微滴位置的方法，包括以下步骤：S1、特征匹配检测：采集待检测子图与模板图的灰度，计算二者之间的匹配程度；S2、方向特征提取：通过提取方向特征进行初步矫正；S3、运动趋势识别：通过对所有液滴的运动趋势进行进一步的矫正，得到矫正后的微滴位置。本发明公开的矫正微滴式数字PCR通道间微滴位置的方法能够精准定位和精准匹配每个通道下每个液滴的位置，大大降低了每个通道中每个液滴荧光值的误差，使得检测得到的核酸靶分子的拷贝数更加精确，且该方法操作简单易实现
一种矫正微滴式数字 pcr 通道间微滴位置方法

[发明专利]微滴式数字PCR分析所需最少微滴数量的确定方法-CN202210592904.2在审
发明人：杨智;赵云鹏;高琪;李冬;贺贤汉 -专利权人：杭州博日科技股份有限公司
申请日： 2022-05-27 - 公布日： 2022-08-02 - 主分类号： G16B40/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种微滴式数字PCR分析所需最少微滴数量的确定方法，涉及PCR检测技术领域，包括：获取目标要求参数，该目标要求参数包括基因拷贝数、理论微滴数、目标置信度和目标误差；根据预先建立的微滴数量与置信度、误差之间的理论模型，确定与目标要求参数对应的最少微滴数量；其中，微滴数量与置信度、误差之间的理论模型是基于n重伯努利分布理论和切比雪夫不等式建立的。如此从理论上确定了微滴式数字PCR分析所需最少微滴数量，缓解了目前仅从经验上确定最少微滴数量的问题，易于理解，容易实现，从而提高了分析结果的一致性及可信度。
微滴式数字 pcr 分析最少数量确定方法

[发明专利]一种微液滴发生及收集反应系统-CN201710068834.X有效
发明人：程晓宇;徐进 -专利权人：上海小海龟科技有限公司
申请日： 2017-02-08 - 公布日： 2021-06-01 - 主分类号： B01L3/00 文献下载
摘要：本发明涉及生物芯片技术领域，公开了一种微液滴发生及收集反应系统，包括：微液滴发生器、微液滴收集反应器和连接管道，所述连接管道可拆式连接在所述微液滴发生器的微液滴输出接口和所述微液滴收集反应器的微液滴输入接口上，用于连通所述微液滴出口和所述微液滴进口。本发明实施方式相对于现有技术而言，不仅可以将微液滴发生器和微液滴收集反应器分离，分别对二者进行选材制造，还可直接将该微液滴发生器所产出的微液滴进行收集反应。
一种微液滴发生收集反应系统

[发明专利]一种基于微滴式数字PCR的空肠弯曲菌重组质粒标准品定量检测方法-CN201810220821.4在审
发明人：邵景东;祝长青;崔思宇;吴瑜凡;扶庆权;王毅谦;吴福平;郭旸 -专利权人：张家港出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心;南京晓庄学院
申请日： 2018-03-16 - 公布日： 2018-06-29 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明提供一种基于微滴式数字PCR的空肠弯曲菌重组质粒标准品定量检测方法，涉及重组质粒标准品量化定标方法领域。一种基于微滴式数字PCR的空肠弯曲菌重组质粒标准品定量检测方法，包括如下步骤：配制含有ddPCR™Supermix for Probes、引物、探针和模板的反应体系；采用微滴发生器将反应体系进行微滴化处理；将微滴化处理后的反应体系转移至PCR仪上，进行PCR扩增反应；使用微滴读取仪读取结果数据，计算重组质粒标准品浓度。本发明定量检测方法准确性高、灵敏度高、重复性好、适用性广的、基于微滴式数字PCR的空肠弯曲菌重组质粒标准品定量检测方法。
微滴重组质粒定量检测标准品空肠弯曲菌数字PCR 标准品浓度微滴发生器读取结果读取仪灵敏度定标探针引物配制量化

[发明专利]数字PCR微滴生成芯片-CN202110493052.7在审
发明人：顾大勇;季明辉;庄添驰;何建安 -专利权人：深圳市第二人民医院（深圳市转化医学研究院）;深圳市检验检疫科学研究院;南京医科大学
申请日： 2021-05-07 - 公布日： 2021-08-20 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种数字PCR微滴生成芯片，其包括，芯片本体，所述芯片本体包括样本供液池、至少两个独立的微滴生成单元和微滴收集池；微滴生成单元分别与所述样本供液池和所述微滴收集池连通；微滴生成单元包括依次连通的微通道和微滴生成部；微滴生成部的入口端至出口端的横截面面积逐渐增大，微通道的出口端与所述微滴生成部的入口端相交处围设成一液滴溢出区，至少两个所述微滴生成单元中液滴溢出区的面积不同。通过在芯片本体上集成多个微滴生成单元，至少两个微滴生成单元具有不同面积的液滴溢出区，使得样本溶液进入微滴生成部的体积不同，从而收集到不同体积的液滴，为微滴式数字PCR扩增后的样本检测提供较大的动态检测范围
数字 pcr 生成芯片

[发明专利]基于微滴式数字PCR的绿色魏斯氏菌快速检测方法-CN201911103305.4在审
发明人：刘云国;纪艳青;隋智海;季慧;魏东 -专利权人：临沂大学
申请日： 2019-11-13 - 公布日： 2020-01-10 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于微滴式数字PCR的绿色魏斯氏菌快速检测方法，首先提取待测样品增菌液的基因组DNA并稀释备用；再利用绿色魏斯氏菌基因组保守性DNA序列设计特异性引物和探针；然后使用该引物和探针对待测样品增菌液的基因组DNA进行微滴式数字PCR扩增和检测。经PCR扩增后，采用微滴分析仪逐个对每个微滴进行检测，有荧光信号的微滴判读为1，没有荧光信号的微滴判读为0，最终根据泊松分布原理以及阳性微滴的比例，计算出待检靶分子的浓度或拷贝数。微滴式数字PCR可以直接得出DNA分子的个数，能对样品中的绿色魏斯氏菌进行绝对定量。具有灵敏高、定量精确、检测的线性范围宽、特异性好、费用适中的优点。
微滴数字PCR 斯氏基因组DNA 荧光信号增菌液判读探针检测特异性引物保守性DNA 泊松分布待测样品快速检测序列设计靶分子分析仪基因组拷贝数再利用扩增稀释引物备用灵敏

[发明专利]一种赫氏埃希氏菌的微滴式数字PCR快速检测方法-CN201911103331.7在审
发明人：刘云国;扈晓杰;王芳芳;彭善丽;康大成 -专利权人：临沂大学
申请日： 2019-11-13 - 公布日： 2020-01-10 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明公开了一种赫氏埃希氏菌的微滴式数字PCR快速检测方法，首先提取待测样品增菌液的基因组DNA并稀释备用；再利用赫氏埃希氏菌基因组保守性DNA序列设计特异性引物和探针；然后使用该引物和探针对待测样品增菌液的基因组DNA进行微滴式数字PCR扩增和检测。经PCR扩增后，采用微滴分析仪逐个对每个微滴进行检测，有荧光信号的微滴判读为1，没有荧光信号的微滴判读为0，最终根据泊松分布原理以及阳性微滴的比例，计算出待检靶分子的浓度或拷贝数。微滴式数字PCR可以直接得出DNA分子的个数，能对样品中的赫氏埃希氏菌进行绝对定量。具有灵敏高、定量精确、检测的线性范围宽、特异性好、费用适中的优点。
微滴数字PCR 基因组DNA 荧光信号增菌液判读探针检测特异性引物保守性DNA 泊松分布待测样品快速检测序列设计靶分子分析仪基因组拷贝数再利用扩增稀释引物备用灵敏

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