本发明公开一种猪细小病毒的病毒样颗粒、其制备方法及应用。本发明的猪细小病毒的病毒样颗粒的制备方法是对猪细小病毒VP2基因进行优化，得到优化的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的猪细小病毒VP2基因，将优化的VP2基因插入到插入载体pSMK中得重组pSMK‑VP2质粒，将重组质粒转化到大肠杆菌中得重组菌，经IPTG诱导表达，收集菌体，纯化重组蛋白，再将纯化后的重组蛋白进行体外组装，得猪细小病毒病毒样颗粒。本发明的猪细小病毒病毒样颗粒可在制备用于预防猪细小病毒引起疾病的疫苗中的应用，也可在制备用于检测猪细小病毒的检测试剂中的应用。
本发明公开了一种同时检测猪圆环病毒III型、猪伪狂犬病毒、猪细小病毒的多重荧光定量专用引物组，其中，猪圆环病毒III型的正向引物核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，猪圆环病毒III型的反向引物核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，猪伪狂犬病毒的正向引物核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，猪伪狂犬病毒的反向引物核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示，猪细小病毒的正向引物核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示，猪细小病毒的反向引物核苷酸序列如SEQ ID NO：6所示。本发明还提供了能够同时检测猪圆环病毒III型、猪伪狂犬病毒、猪细小病毒的试剂盒及其用途。本发明能够同时灵敏、准确检测猪圆环病毒III型、猪伪狂犬病毒、猪细小病毒。
