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[发明专利]用于控制基因表达的单链核酸分子-CN201510226685.6有效
发明人：大木忠明;林宏刚;白水久男;滨崎智洋;伊藤彰浩;铃木宽 -专利权人：株式会社博纳克
申请日： 2011-07-08 - 公布日： 2020-12-11 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明提供用于控制基因表达的单链核酸分子。一种能够抑制基因表达的新的、能够容易且高效地制造的核酸分子。一种分子，其特征在于，其为包含抑制靶基因表达的表达抑制序列的单链核酸分子，从5’侧至3’侧依次包含5’侧区域(Xc)、内部区域(Z)以及3’侧区域(Yc)，上述内部区域(Z)由内部5’侧区域(X)和内部根据该单链核酸分子，能够抑制上述靶基因的表达。
用于控制基因表达核酸分子

[发明专利]具有含氮脂环式骨架的单链核酸分子-CN201410217071.7有效
发明人：大木忠明;林宏刚;白水久男;滨崎智洋;伊藤彰浩;铃木宽 -专利权人：株式会社博纳克
申请日： 2011-07-28 - 公布日： 2017-01-04 - 主分类号： C07D207/00 文献下载
摘要：本发明涉及具有含氮脂环式骨架的单链核酸分子。本发明的目的在于提供一种能够容易且高效地制造、能够抑制基因表达的新的核酸分子。所述分子的特征在于，其为包含抑制靶基因表达的表达抑制序列的单链核酸分子，包含区域(X)、连接子区域(Lx)和区域(Xc)，在上述区域(X)与上述区域(Xc)之间连结有上述连接子区域(Lx)，上述区域(Xc根据该单链核酸分子，能够抑制上述靶基因的表达。
具有含氮脂环式骨架核酸分子

[发明专利]靶核酸的定量方法和用于该方法的试剂盒-CN201680066232.4在审
发明人：星野辰彦;稻垣史生 -专利权人：国立研究开发法人海洋研究开发机构
申请日： 2016-11-17 - 公布日： 2018-07-17 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明的目的在于提供不实施连接反应、并且消除由PCR扩增效率引起的问题、兼顾靶核酸的测序和靶核酸的定量的方法。上述目的通过下述方法得以解决：(1)使用导入有对靶核酸的序列具有特异性的序列并且在其上游导入有随机序列和已知序列的引物，实施单引物延伸反应，由此得到具有随机序列和靶核酸的序列的双链核酸；(2)以所得到的双链核酸作为模板，使用对已知序列具有特异性的引物和具有靶核酸的序列的一部分的引物实施PCR，由此得到具有随机序列和靶核酸的序列的双链核酸的扩增物；(3)使用所得到的双链核酸的扩增物，进行测序，将随机序列与靶核酸的序列一同进行解读
靶核酸双链核酸随机序列引物已知序列扩增物测序连接反应延伸反应单引物试剂盒核酸对靶解读上游

[发明专利]一种快速检测玉米赤霉烯酮的方法-CN201610045201.2有效
发明人：易守军;曾云龙;任婕凤;刘婷;黄昊文;张起豪;邓克勤;唐春然 -专利权人：湖南科技大学
申请日： 2016-01-24 - 公布日： 2020-08-11 - 主分类号： C12Q1/6816 文献下载
摘要：本发明涉及一种快速检测玉米赤霉烯酮的方法，该方法包括如下步骤：（A）使玉米赤霉烯酮核酸适体（Apt）和可与玉米赤霉烯酮核酸适体杂交的单链信号探针ssDNA杂交，形成杂交链；（B）使该杂交链与待测样品接触，当待测样品中有玉米赤霉烯酮存在时，杂交链与玉米赤霉烯酮反应释放出单链信号探针ssDNA；（C）利用DNA扩增，使杂交链成双链DNA，然后用核酸外切酶选择性地催化双链DNA水解成单核苷酸，体系中单链信号探针
一种快速检测玉米赤霉烯酮方法

[发明专利]一种单链DNA快速制备技术及试剂盒-CN02125767.1无效
发明人：赵翀 -专利权人：赵翀
申请日： 2002-08-16 - 公布日： 2004-02-18 - 主分类号： C12P19/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种单链DNA快速制备技术及试剂盒的制备方法。该技术快速、灵敏、纯度高，制备方法简便、成本低，适合各种规模不同核酸样品的DNA测序和探针制备。主要特征在于将一条引物通过固相合成或化学偶联等方法固定在固相基质微粒的表面获得固相引物，以靶核酸为模板在固相基质的表面进行固相PCR扩增，产物经加热变性，使DNA双链解链，而由固相引物延伸获得的DNA单链仍然保留在固相基质的表面；分离固/液相获得两条互补的DNA单链。运用本发明制备的单链DNA和RNA可用于核酸的测序，反义寡核苷酸药物的合成、单链探针的制备以及SELEX分子文库的构建等，可广泛地用于生物学、医药学、疾病预防、农牧业、食品与卫生、能源与化工、环境监测以及医学诊断与检测等领域
一种 dna 快速制备技术试剂盒

[发明专利]一种用于检测核酸酶的试剂、试剂盒、核酸酶检测方法及应用-CN202211738932.7在审
发明人：乔洁;刘奕;王馨萍;陈一川;吴克 -专利权人：武汉轻工大学;武汉博沃生物科技有限公司
申请日： 2022-12-30 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12Q1/34 文献下载
摘要：本申请公开了一种用于检测核酸酶的试剂、试剂盒、核酸酶检测方法及应用，所述试剂、所述试剂盒以及所述核酸酶检测方法是基于CRISPR‑Cas系统进行检测，具体为：互补结合的CRISPR RNA与单链核酸可激活Cas蛋白的切割活性，从而剪切探针而产生检测信号，当待测样品包含核酸酶时，互补结合的CRISPR RNA与单链核酸可被核酸酶选择性降解，从而无法激活Cas蛋白的切割活性，待测样品中核酸酶的浓度越高，检测信号越弱，从而实现核酸酶的定性/定量分析，所述试剂、所述试剂盒以及所述核酸酶检测方法能够应用于制备以核酸酶作为检测靶点的疾病诊断试剂、制备以核酸酶作为靶标的药物、筛选核酸酶抑制剂等技术领域。
一种用于检测核酸酶试剂试剂盒方法应用

[发明专利]一种变性巢式硫代磷酸化等温核酸扩增方法-CN202210792976.1在审
发明人：丁雄;王雅茹 -专利权人：东南大学
申请日： 2022-07-05 - 公布日： 2022-11-04 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明公开了一种变性巢式硫代磷酸化等温核酸扩增方法，该方法包括硫代磷酸化外引物、硫代磷酸化双链内引物、线性引物、核苷酸聚合酶、核酸嵌合染料、目标核酸序列、变性剂尿素，所述变性剂尿素可辅助引物退火和延伸产物自匹配，所述硫代磷酸化序列由硫代磷酸化核苷酸组成且可发生自匹配，所述硫代磷酸化双链内引物其内部为硫代磷酸化双链结构、两侧为可识别目标核酸序列的单链结构，所述硫代磷酸化外引物序列、硫代磷酸化双链内引物的两侧单链序列能与内外巢式分布的目标核酸序列位点特异性结合并被延伸本发明方法在低温条件下利用核酸嵌入染料即可实现高特异性核酸扩增检测，有望降低便携式等温核酸检测装置的设计难度和能量消耗。
一种变性硫代磷酸等温核酸扩增方法

[发明专利]一种检测双链DNA形成过程的荧光方法-CN202210559275.3在审
发明人：王承克;李江宇 -专利权人：鲁东大学
申请日： 2022-05-23 - 公布日： 2022-09-16 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明一种检测双链DNA形成过程的荧光方法，属于生物传感领域。利用建立的方法设计出能够灵敏检测DNA双链结构的荧光探针。特点在于利用核酸碱基互补配对原理，形成双链结构，导致探针与硫黄素T的结合力增加，荧光检测信号增强。首先将所设计检测探针与待测单链核酸分子结合，形成分子间双链结构，再加入硫黄素T分子，通过测定混合物的荧光信号强度，能够对待测单链核酸分子浓度进行检测。
一种检测 dna 形成过程荧光方法

[发明专利]含有核酸的复合物制剂的制备方法-CN99806563.3无效
发明人：杉原胜広;关纯造;平林加寿子 -专利权人：日本新药株式会社
申请日： 1999-05-24 - 公布日： 2004-09-15 - 主分类号： A61K31/70 文献下载
摘要：一种制备高质量的、均一的含核酸复合物的制剂的方法，该制剂能进行过滤除菌，该制剂的特征是不含被认为对人体不安全的7微米或更大的粗颗粒。含有阳离子载体与核酸聚合物的复合物的该制剂的制备方法，其特征在于，在阳离子载体或形成阳离子载体的材料中分别加入处于单链状态的、能至少部分形成双链的两个单链核酸聚合物，并对所有组分进行分散处理。
含有核酸复合物制剂制备方法

[发明专利]用于核酸特异性分析的探针-CN201080042740.1有效
发明人：奥洛夫·艾瑞克森;马格纳斯·伊萨克森;亨瑞克·约翰森;阿勒弗·兰德恩 -专利权人：哈罗基因公司
申请日： 2010-07-23 - 公布日： 2012-07-11 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提供了用于检测或富集核酸样品中存在的靶标脱氧核糖核酸(DNA)的方法，所述方法包括：(a)使核酸样品片段化，产生包括靶标片段在内的核酸片段，所述靶标片段含有所述靶标DNA；(b)使得包括所述靶标片段在内的所述片段至少部分被单链化，其中单链化的部分包括末端部分，并且其中所述单链化部分的长度足以允许所述靶标片段单链化部分的至少一部分与步骤(c)的探针杂交；(c)将步骤(b)的至少部分单链化的片段与单个靶标特异性核酸探针的寡核苷酸A和B接触，其中(i)寡核苷酸A是下述单链寡核苷酸，所述单链寡核苷酸在一端包含含有与所述靶标片段的所述单链化部分的至少一部分在序列上互补的至少10个核苷酸的第一靶标特异性部分，并且在另一端包含含有与探针的寡核苷酸B的至少一部分(包括一端)互补的核苷酸序列的第二非靶标特异性部分，和(ii)寡核苷酸B是下述单链寡核苷酸，所述单链寡核苷酸可含有或带有用于检测和/或富集所述靶标片段的至少一种元件，并且其至少一部分(包括一端的第二非靶标特异性部分在序列上互补，使得所述靶标片段通过与寡核苷酸A的第一靶标特异性部分杂交而变得与所述探针退火，导致每个靶标片段仅发生一次靶标特异性探针结合事件；(d)将所述探针的寡核苷酸B与所述靶标片段的单链化部分中与所述探针寡核苷酸
用于核酸特异性分析探针

[发明专利]基于CRISPR技术检测基因编辑水稻的方法-CN202211318163.5在审
发明人：付伟;王智;张永江;魏霜;李非凡;李一鸣 -专利权人：中国检验检疫科学研究院
申请日： 2022-10-26 - 公布日： 2023-03-24 - 主分类号： C12Q1/6827 文献下载
摘要：本发明提供了一种检测基因编辑水稻wx突变基因的方法，所述方法包括将待测核酸与Cas12a蛋白、gRNA和单链DNA报告子接触，检测由Cas12a蛋白切割单链DNA报告子产生的可检测信号，所述gRNA包括与Cas12a蛋白结合的区域和与靶核酸杂交的导向序列，从而检测所述基因编辑水稻wx突变基因，所述单链DNA报告子不与所述gRNA杂交；所述gRNA的序列如SEQ ID No.10或SEQ ID No.11
基于 crispr 技术检测基因编辑水稻方法

[发明专利]一种利用核酸外切酶反应产生引物结合树枝状滚环扩增可视化检测miRNA的方法-CN201710154441.0有效
发明人：周翔;刘奕侬;王少儒;田沺;张小娥;黄俊捷;杨伊文;朱子睿 -专利权人：武汉大学
申请日： 2017-03-15 - 公布日： 2020-03-10 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用核酸外切酶反应产生引物结合树枝状滚环扩增可视化检测miRNA的方法。本发明方法包含三部分，第一部分引物的产生，发卡探针I被靶标miRNA打开后，被核酸外切酶I降解单链部分，而后核糖核酸酶H降解DNA：RNA杂合链中的RNA，留下一段短链DNA；第二部分是树状滚环扩增，上一步产生的单链DNA连接长单链DNA探针成环作为模板，然后以该单链DNA为引物进行一级滚环扩增，在滚环扩增体系中引入的发卡茎环结构II，被一级滚环扩增产物打开，从而多级树枝状滚环扩增；第三部分是根据滚环扩增产物中含有的G‑四链体进行检测。
一种利用核酸外切酶反应产生引物结合树枝状滚环扩增可视化检测 mirna 方法

[发明专利]甲基化检测方法-CN201580015644.0有效
发明人：巴纳比·巴姆福思;安娜·路易莎·布拉斯·道斯·桑托斯·里贝罗·达·席尔瓦 -专利权人：贝斯4创新公司
申请日： 2015-02-13 - 公布日： 2019-11-26 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：(a)使所述单一核苷酸与一种或多种杂交探针类型接触，每种所述杂交探针类型在其未使用形式包含：(1)连接一个或多个处于基本不可检测状态的第一可检测元件的第一寡核苷酸，并且所述第一寡核苷酸还包含：(i)双链和单链区，和(ii)连接在所述双链区邻近所述单链区的末端的耐受核酸外切降解的区域，和(2)连接一个或多个也处在基本不可检测状态的第二可检测元件的第二单链寡核苷酸，并且改变所述第二单链寡核苷酸为至少部分是所述第一寡核苷酸的单链区的核苷酸序列互补物；(b)对于引起(i)所述单一核苷酸与所述耐受核酸外切降解的区域和所述单链区结合，和(ii)所述第二寡核苷酸与所述单一核苷酸和所述单链核苷酸区结合，以产生基本上双链的使用的探针的相关的探针类型；(c1)将所述使用的探针用甲基化依赖性限制性内切核酸酶在如果所述单一核苷酸被甲基化，则所述使用的探针在邻近耐受核酸外切降解的区域处被切割成两个双链寡核苷酸产物的条件下处理，或者(c2)将所述使用的探针用甲基化敏感性限制性内切核酸酶在如果所述单一核苷酸未被甲基化，则所述使用的探针在邻近耐受核酸外切降解的区域处被切割成两个双链寡核苷酸产物的条件下处理；并且，然后(d1)将步骤(c1)的产物用外切核酸酶或展现出外切核酸酶活性的聚合酶处理，使得如果所述单一核苷酸被甲基化
甲基化检测方法

[发明专利]一种基于CRISPR技术检测目标突变的方法-CN202011467264.X在审
发明人：梁亚峰;段志强;孙洁;刘锐恒 -专利权人：山东舜丰生物科技有限公司
申请日： 2020-12-14 - 公布日： 2022-01-11 - 主分类号： C12Q1/6827 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于CRISPR技术检测靶核酸是否存在目标突变的方法，其特征在于，所述方法包括将样品与V型CRISPR/CAS效应蛋白、gRNA(指导RNA)和单链核酸检测器接触，所述gRNA包括与所述CRISPR/CAS效应蛋白结合的区域和与突变型靶核酸杂交的导向序列；检测由CRISPR/CAS效应蛋白切割单链核酸检测器产生的可检测信号，所述目标突变设置于gRNA导向序列从5’端第10位、第11位、
一种基于 crispr 技术检测目标突变方法

[发明专利]超热稳定的赖氨酸-突变型ssDNA/RNA连接酶-CN201780016918.7在审
发明人：郑钰;洪曼青 -专利权人： R基因股份有限公司
申请日： 2017-03-14 - 公布日： 2019-03-15 - 主分类号： C12P19/30 文献下载
摘要：在某些实施方案中，使用此类超热稳定的赖氨酸‑突变型ssDNA/RNA连接酶来将具有5'腺苷酸化端的第一单链核酸序列连接至第二单链核酸序列(例如，在至少75℃的温度下)以形成连接的核酸序列。在其他实施方案中，对所述连接的核酸序列进行测序。
连接酶赖氨酸热稳定突变型单链核酸序列核酸序列连接酶活性腺苷酸测序