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[发明专利]一种等温扩增的核酸检测实验方法-CN202110775548.3在审
发明人：黄震;贺洪飞;罗光成 -专利权人：纽奥维特（成都）生物科技有限公司;硒瑞恩特生物科技（成都）有限公司
申请日： 2021-07-08 - 公布日： 2021-10-08 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明公开一种等温扩增的核酸检测实验方法，采用四条扩增引物来进行靶DNA的第一次等温扩增；并基于杂交链式反应原理设计两条探针；这两条探针可以将信号提取‑转换探针的特异信号进行第二次放大；此外，这两条探针和转换探针触发器(Trigger)的3’‑端进行过磷酸化处理；本发明由信号提取—转换探针耦合的两个扩增反应组成，转换探针能提取特异性信号，并在高温下触发杂交链式反应进行第二次信号放大，通过特异性信号提取、转换和放大机制，突破常规等温检测技术特异性差的瓶颈问题，构建核酸特异性、超灵敏扩增体系，将核酸扩增中的特异性信号进行提取、筛选、转换和放大，从而大大提高检测的特异性和灵敏度。
一种等温扩增核酸检测实验方法

[发明专利]一种用于鉴别六堡茶中近缘微生物的特异性核酸序列筛选方法-CN202310720162.1在审
发明人：黄建安;王仲;金琦芳;李勤;欧行畅;李适;刘仲华 -专利权人：湖南农业大学
申请日： 2023-06-18 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： G16B30/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于鉴别六堡茶中近缘微生物的特异性核酸序列筛选方法，该方法采用目标微生物及其近缘微生物的基因组序列文件进行比对，再经过在线NCBI数据库比对，进一步删除非特异序列后，得到特异蛋白序列集；并设计鉴别PCR引物，将得到备选引物集中引物通过扩增，根据扩增结果删除其中存在非特异扩增的引物；提取目标微生物及其近缘微生物的基因组DNA分别作为模板，进行PCR扩增，删除备选引物集中无法有效扩增的引物，删除备选引物集中存在非特异扩增的引物对。本发明的筛选方法采用多次生物信息学比对和虚拟筛选技术，减少了PCR等实验筛选过程所需资源，高效地获得大量目标微生物的特异性核酸序列，缩短特异性核酸序列筛选时间。
一种用于鉴别六堡茶中近缘微生物特异性核酸序列筛选方法

[发明专利]一种以内标为基础的苹果锈果类病毒RT‑PCR检测技术-CN201510449388.8有效
发明人：王亚南;杨金凤;曹克强 -专利权人：河北农业大学
申请日： 2015-07-29 - 公布日： 2017-12-01 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：以带有叶芽苹果一年生枝条顶端0~5 cm皮层组织为试材，采用RNA提取改良法提取组织总RNA，以总RNA为模板，苹果锈果类病毒特异性引物和苹果内源基因引物进行RT‑PCR反应，根据琼脂糖凝胶电泳中扩增产物的有无和大小判断苹果组织是否携带苹果锈果类病毒判断标准为未扩增出内源基因特异性片段即代表实验失败；扩增出内源基因特异性片段即代表实验有效；扩增出内源基因特异性片段及苹果锈果类病毒特异性片段即代表苹果组织中携苹果带锈果类病毒；扩增出内源基因特异性片段，未扩增出苹果锈果类病毒特异性片段即代表组织中不携带苹果锈果类病毒。
一种以内基础苹果类病毒 rt pcr 检测技术

[发明专利]双歧杆菌的实时荧光PCR检测方法-CN201511022187.6在审
发明人：何宇平;杨捷琳;肖其胜;袁辰刚;杨惠琴;王敏;姚剑 -专利权人：上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心
申请日： 2015-12-30 - 公布日： 2016-04-13 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种双歧杆菌的实时荧光PCR检测方法，包括以下步骤：步骤一：以双歧杆菌标准菌株的DNA为模板，进行荧光定量PCR扩增，获得PCR扩增产物；步骤二：检测扩增产物的荧光信号；其中，用于PCR扩增的反应体系中含有扩增双歧杆菌的特异性引物对和双歧杆菌的特异性探针本发明的双歧杆菌的实时荧光PCR扩增的特异性引物对和探针不仅特异性好，而且灵敏度高，为快速准确地检测食品中是否按标示添加双歧杆菌提供了一种很好的方法，具有较好的应用前景。
杆菌实时荧光 pcr 检测方法

[发明专利]氯吡格雷用药相关基因分型的检测试剂盒和检测方法-CN201811098786.X在审
发明人：周连群;李金泽;张芷齐;李传宇;姚佳;张威;郭振 -专利权人：中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
申请日： 2018-09-20 - 公布日： 2019-03-19 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本发明属于基因扩增检测的技术领域，具体涉及纳米二氧化硅在基因扩增检测中的用途，以及利用纳米二氧化硅的核酸扩增试剂、个体化用药相关基因分型的检测试剂盒、检测方法，首创性的发现在基因扩增检测中使用纳米二氧化硅，可以显著提高基因扩增的反应效率和反应特异性，解决了现有技术中基因扩增检测速率低、特异性差，进一步解决了基因分型特异性差、检测速度慢，不能满足对大量样本的快速的、特异性高的检测的问题。
基因扩增检测纳米二氧化硅检测检测试剂分型个体化用药相关基因核酸扩增试剂反应效率基因分型基因扩增氯吡格雷相关基因首创性样本发现

[发明专利]罂粟成分的实时荧光PCR检测方法-CN201510797053.5在审
发明人：杨捷琳;高琴;宗凯 -专利权人：上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心
申请日： 2015-11-18 - 公布日： 2016-03-02 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种罂粟成分的实时荧光PCR检测方法，包括以下步骤：步骤一：以罂粟种子的DNA为模板，进行荧光定量PCR扩增，获得PCR扩增产物；步骤二：检测扩增产物的荧光信号；其中，用于PCR扩增的反应体系中含有扩增罂粟成分的特异性引物对和罂粟成分的特异性探针本发明的罂粟成分的实时荧光PCR扩增的特异性引物对和探针不仅特异性好，而且灵敏度高，为快速准确地检测食品添加剂或调味品中是否非法添加罂粟成分提供了一种很好的方法，具有较好的应用前景。
罂粟成分实时荧光 pcr 检测方法

[发明专利]用于验证测序结果的系统和方法-CN201580023686.9有效
发明人： D·布林扎 -专利权人：生命科技股份有限公司
申请日： 2015-05-13 - 公布日： 2020-12-08 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：用于验证测序结果的系统和方法可以在包括目标特异性和变异体特异性引物的引物池存在下使核酸样品的目标区扩增。变异体特异性引物可以包括变异体特异性条码和变异体特异性序列。可以对扩增子进行测序以确定变异体特异性条码的序列。可以基于变异体特异性条码的序列来鉴别变异体，并且可以通过相对于参考序列定位扩增子来确定变异体的位置。
用于验证结果系统方法

[发明专利]制备HIV抗原特异性CTL的试剂盒与方法-CN201610865040.1在审
发明人：王福生;徐若男;张纪元;金磊;施明 -专利权人：王福生
申请日： 2016-09-29 - 公布日： 2016-12-21 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明公开了一种制备HIV抗原特异性CTL的试剂盒以及扩增HIV抗原特异性CTL的方法。本发明使用促进HIV抗原特异性CTL扩增和激活的试剂刺激培养去除了Tregs细胞的艾滋病患者外周血单个核细胞，获得了大量的HIV抗原特异性CTL。本发明的方法大大提高了HIV抗原特异性CTL的扩增效率同时增强了HIV抗原特异性CTL的杀伤功能。
制备 hiv 抗原特异性 ctl 试剂盒方法

[发明专利]一种环状RNA hsa_circKPNA2_002及其特异性扩增引物和应用-CN201811508139.1在审
发明人：王立斌;田进海;王丹妮 -专利权人：宁夏医科大学总医院
申请日： 2018-12-11 - 公布日： 2019-02-22 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种环状RNA hsa_circKPNA2_002及其特异性扩增引物和应用，其中，所述环状RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其在结直肠癌组织中高表达，可以作为筛查结直肠癌的分子标志物；本发明还提供一种用于扩增所述环状RNA的特异性扩增引物，所述特异性扩增引物包括上游引物和下游引物，其中，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；本发明还公开了所述特异性扩增引物在制备用于结直肠癌筛查的试剂盒中的应用及包括所述特异性扩增引物的试剂盒。
特异性扩增引物环状RNA 核苷酸序列结直肠癌上游引物下游引物试剂盒应用分子标志物直肠癌高表达扩增筛查制备

[发明专利]一种环状RNA hsa_circPDE4D_033及其特异性扩增引物和应用-CN201811508499.1在审
发明人：田进海;王立斌;王丹妮 -专利权人：宁夏医科大学总医院
申请日： 2018-12-11 - 公布日： 2019-02-22 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种环状RNA hsa_circPDE4D_033及其特异性扩增引物和应用，其中，所述环状RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其在结直肠癌组织中低表达，可以作为筛查结直肠癌的分子标志物；本发明还提供一种用于扩增所述环状RNA的特异性扩增引物，所述特异性扩增引物包括上游引物和下游引物，其中，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；本发明还公开了所述特异性扩增引物在制备用于结直肠癌筛查的试剂盒中的应用及包括所述特异性扩增引物的试剂盒。
特异性扩增引物环状RNA 核苷酸序列结直肠癌上游引物下游引物试剂盒应用分子标志物直肠癌低表达扩增筛查制备

[发明专利]一种环状RNA hsa_circTGFBI_001及其特异性扩增引物和应用-CN201811508137.2在审
发明人：王立斌;田进海;李晓菡 -专利权人：宁夏医科大学总医院
申请日： 2018-12-11 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种环状RNA hsa_circTGFBI_001及其特异性扩增引物和应用，其中，所述环状RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其在结直肠癌组织中高表达，可以作为筛查结直肠癌的分子标志物；本发明还提供一种用于扩增所述环状RNA的特异性扩增引物，所述特异性扩增引物包括上游引物和下游引物，其中，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；本发明还公开了所述特异性扩增引物在制备用于结直肠癌筛查的试剂盒中的应用及包括所述特异性扩增引物的试剂盒。
特异性扩增引物环状RNA 核苷酸序列结直肠癌上游引物下游引物试剂盒应用分子标志物直肠癌高表达扩增筛查制备

[发明专利]一种环状RNA hsa_circSCD_004及其特异性扩增引物和应用-CN201811508147.6在审
发明人：王立斌;田进海;王嘉 -专利权人：宁夏医科大学总医院
申请日： 2018-12-11 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种环状RNA hsa_circSCD_004及其特异性扩增引物和应用，其中，所述环状RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其在结直肠癌组织细胞中高表达，可以作为筛查结直肠癌的分子标志物；本发明还提供一种用于扩增所述环状RNA的特异性扩增引物，所述特异性扩增引物包括上游引物和下游引物，其中，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；本发明还公开了所述特异性扩增引物在制备用于结直肠癌筛查的试剂盒中的应用及包括所述特异性扩增引物的试剂盒。
特异性扩增引物环状RNA 核苷酸序列结直肠癌上游引物下游引物试剂盒应用分子标志物直肠癌组织细胞高表达扩增筛查制备

[发明专利]一种环状RNA hsa_circTGFBI_007及其特异性扩增引物和应用-CN201811508535.4在审
发明人：王立斌;田进海;李晓菡 -专利权人：宁夏医科大学总医院
申请日： 2018-12-11 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明公开了一种环状RNA hsa_circTGFBI_007及其特异性扩增引物和应用，其中，所述环状RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其在结直肠癌组织高表达，可以作为筛查结直肠癌的分子标志物；本发明还提供一种用于扩增所述环状RNA的特异性扩增引物，所述特异性扩增引物包括上游引物和下游引物，其中，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；本发明还公开了所述特异性扩增引物在制备用于结直肠癌筛查的试剂盒中的应用及包括所述特异性扩增引物的试剂盒。
特异性扩增引物环状RNA 核苷酸序列结直肠癌上游引物下游引物试剂盒应用分子标志物直肠癌高表达扩增筛查制备

[发明专利]检测恶性疟原虫k13基因突变位点的特异性引物组及其应用-CN201910145380.0在审
发明人：石莹;王俊贤;田绿波;樊学军 -专利权人：四川国际旅行卫生保健中心
申请日： 2019-02-27 - 公布日： 2019-06-18 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测恶性疟原虫k13基因突变位点的特异性引物组，该特异性引物组包括针对恶性疟原虫k13基因的四个抗性突变位点设计的四对特异性引物；上述四对特异性引物在进行PCR扩增实际上是将多对特有异性引物的扩增转化为一对通用引物的扩增，使得各模板的扩增效率趋于一致，而不影响各特有异性引物的扩增效率，从而达到真正的高通量检测鉴别多种病原体的目的，且上述四对特异性引物在进行PCR扩增后得到的PCR产物的大小具有明显的区别，用于准确判定突变位点
特异性引物组恶性疟原虫特异性引物基因突变位点扩增效率突变位点扩增引物异性高通量检测通用引物病原体种检测抗性判定鉴别基因检测转化应用

[发明专利]唐菖蒲伯克霍尔德氏菌LAMP恒温快速检测方法-CN202111502774.0有效
发明人：肖剑;梁美丹;宋安华;孙雪奇;戚平;雷燕;曹霞飞;胡雯艳;黄铁城;叶春嫦 -专利权人：广州市食品检验所（广州市酒类检测中心）
申请日： 2021-12-10 - 公布日： 2022-09-16 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明提出唐菖蒲伯克霍尔德氏菌LAMP恒温快速检测方法，步骤有：1、准备待测DNA样品及LAMP恒温扩增特异性引物；其中LAMP恒温扩增特异性引物是选取唐菖蒲伯克霍尔德氏菌特异性基因序列进行合成得到，该基因采用唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)水解酶cayF基因；所述LAMP恒温扩增特异性引物为：外引物F3、外引物B3、内引物FIB、内引物BIP、环引物LF、环引物LB；2、采用LAMP恒温扩增反应体系对待测DNA样品进行LAMP恒温扩增，检测扩增产物的荧光信号，得到检测结果。本发明对唐菖蒲伯克霍尔德氏菌特异性好、灵敏度高，可用于食品中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的快速检测。
唐菖蒲霍尔德氏菌 lamp 恒温快速检测方法