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[发明专利]利用单拷贝核基因检测食品和饲料中山羊源性成分的实时荧光PCR检测方法-CN201710335321.0有效
发明人：蔡一村;王强;谌鸿超;潘良文 -专利权人：上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心
申请日： 2017-05-12 - 公布日： 2020-01-10 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用单拷贝核基因检测食品和饲料中山羊源性成分的实时荧光PCR检测方法，包括以下步骤：第一步，以待测样品的DNA为模板，进行荧光定量PCR扩增，获得PCR扩增产物；第二步，检测扩增产物的荧光信号；第三步，以检测结果的Ct值判定样品中是否含有山羊源性成分；其中，用于PCR扩增的反应体系中含有扩增山羊源性成分的特异性引物对和山羊源性成分的特异性探针。本发明的山羊源性成分的实时荧光PCR扩增的特异性引物对和探针不仅特异性好，而且灵敏度高，为快速准确地检测食品和饲料中是否含有山羊源性成分提供了一种定量检测方法，具有较好的应用前景。
山羊扩增特异性引物实时荧光PCR检测检测扩增产物实时荧光PCR 荧光定量PCR 特异性探针饲料待测样品定量检测检测结果荧光信号单拷贝核基因灵敏度检测探针判定应用

[发明专利]一种长吻鮠雄性性别特异性分子标记及其扩增引物和遗传性别鉴定方法-CN202111232187.4有效
发明人：叶欢;阮瑞;李创举;岳华梅;宋信华 -专利权人：中国水产科学研究院长江水产研究所;湖北省长吻鮠良种场
申请日： 2021-10-22 - 公布日： 2022-06-17 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明公开了一种长吻鮠雄性性别特异性分子标记及其扩增引物和遗传性别鉴定方法。所述长吻鮠雄性特异性分子标记的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，其扩增引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示。利用扩增引物对长吻鮠基因组DNA进行PCR扩增，产物进行电泳检测，若扩增出特异性条带，则长吻鮠鉴定为雄性个体，若未扩增出特异性目的条带，则为雌性个体，该遗传性别鉴定方法简单、快速、直接，且准确率高，对鱼体伤害小
一种长吻鮠雄性性别特异性分子标记及其扩增引物遗传鉴定方法

[发明专利]一种快速特异扩增差异表达基因长片段的方法-CN200610135246.5无效
发明人：王艺磊;张子平;谢芳靖 -专利权人：集美大学
申请日： 2006-11-24 - 公布日： 2007-07-11 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：一种快速特异扩增差异表达基因长片段的方法，涉及一种表达基因的克隆。提供一种重复性高、假阳性低、快速实惠和获得的基因片段较长的快速特异扩增差异表达基因长片段的方法。步骤为：以总RNA或mRNA为模板，dT－RSL为引物，在逆转录酶的作用下合成第一条cDNA链；PCR扩增：第一条cDNA链经稀释后，与dT－RSL引物和RSL随机引物混合于PCR管中退火，进行一个PCR循环反应，合成第二条cDNA链，随后将PCR反应体系中的dT－RSL和RSL随机引物分别与cDNA第二条链特异结合，经PCR循环，扩增出特异的DNA片段；取扩增产物溶解于上样缓冲液中，用琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增的产物。
一种快速特异扩增差异表达基因片段方法

[发明专利]重组依赖的核酸滚环扩增方法-CN201410168939.9在审
发明人：俞国华 -专利权人：俞国华
申请日： 2014-04-25 - 公布日： 2014-08-06 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种依赖DNA重组的核酸滚环扩增方法，整个扩增过程包括：1）设计4个可与靶序列结合的引物；2）通过具有链置换功能的DNA聚合酶的作用，产生单链DNA，该单链DNA的一端或两端含有拓扑异构酶或者位点特异性重组酶特异识别位点；3）由拓扑异构酶或位点特异性重组酶介导该单链DNA的环化；4）环状单链DNA的滚环扩增。本发明具有许多优点：比如可以简化等温扩增引物的设计、进行大片段核酸的扩增、可以在多个不同温度下实现等温核酸扩增等。
重组依赖核酸扩增方法

[发明专利]一种新的基因定位方法及试剂盒-CN99124134.7无效
发明人：黄海 -专利权人：中国科学院上海植物生理研究所
申请日： 1999-11-29 - 公布日： 2001-06-06 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提供了一种新的确定基因型和基因定位方法,它包括确定DCT标记;合成序列对应于标准序列的第一对PCR引物A1和A1′,它们可特异地扩增出对应于标准序列的扩增产物;合成序列对应于变异序列的第二对PCR引物B1和B1′,它们可特异地扩增出对应于变异序列的扩增产物;在特异性PCR条件下,用第一对引物和第二对引物分别对样品进行PCR,并电泳检测扩增结果;分析扩增结果,确定样品基因型和/或基因定位。
一种基因定位方法试剂盒

[发明专利]环介导恒温扩增结合纳米生物传感检测肺炎支原体的方法-CN201910021799.5在审
发明人：申阿东;王亚翠;王毅;焦伟伟;孙琳;李洁琼 -专利权人：首都医科大学附属北京儿童医院
申请日： 2019-01-10 - 公布日： 2019-04-12 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明公开了一种环介导恒温扩增结合高分子纳米生物传感检测肺炎支原体特异基因P1的方法，本发明还提供了用于上述扩增的一组引物序列。所述方法在环介导恒温扩增中的内引物FIP的5’端标记荧光素(FITC)，在环引物LF的5’端标记生物素(biotin)，所述方法针对肺炎支原体特异基因P1的扩增产物能被纳米生物传感器可视化检测。所述方法便捷、快速、敏感、特异，灵敏度范围为60ng～600fg，并能准确地鉴别肺炎支原体，具有优异的特异性。
肺炎支原体环介导恒温扩增特异基因纳米生物传感器高分子纳米可视化检测内引物FIP 标记生物标记荧光传感检测环引物LF 扩增产物纳米生物生物传感引物序列灵敏度扩增鉴别敏感检测

[发明专利]一种用于扩增解淀粉芽孢杆菌的特异性引物及其应用-CN201910650849.6在审
发明人：崔京春;杨湘黔;曾诗娴;胡晓红;成丽;张珂彬 -专利权人：大连民族大学
申请日： 2019-07-18 - 公布日： 2020-06-16 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，公开了一种用于扩增解淀粉芽孢杆菌的特异性引物及其应用。本发明要解决的技术问题是针对目前检测解淀粉芽孢杆菌一般采用16S rDNA基因通用引物进行PCR扩增以及耗时长、操作复杂、易产生假阳性的生理生化鉴定方法的现状，本发明提供一种用于扩增解淀粉芽孢杆菌的特异性引物，提供利用这对引物对待测菌株进行特异PCR扩增鉴定解淀粉芽孢杆菌的方法，该测解淀粉芽孢杆菌的方法检测速度快、灵敏度高、特异性强、成本低。
一种用于扩增淀粉芽孢杆菌特异性引物及其应用

[发明专利]口蹄疫病毒核酸免提取荧光等温扩增检测试剂盒-CN201911406995.0在审
发明人：不公告发明人 -专利权人：北京森康生物技术开发有限公司
申请日： 2019-12-31 - 公布日： 2021-07-16 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明选择口蹄疫病毒高度保守的3D基因片段作为检测靶基因，设计特异性引物建立FMDV特异性的荧光等温扩增检测方法。本发明采用Bst DNA聚合酶，具有扩增效率高、特异性好的优点；采用荧光染料指示反应结果，便于准确判定；无需提取样品DNA,简化了检测操作；整个检测过程速度快，只需50min。所用的荧光恒温扩增仪器成本低；具有扩增效率高、特异性好的优点；可以用于动物血液和组织中的口蹄疫病毒检测。
口蹄疫病毒核酸提取荧光等温扩增检测试剂盒

[发明专利]一种基于mNGS的病原微生物快速检测方法及其应用-CN202310446143.4在审
发明人：马立明;陈林柳;李亚兵;郭现超;刘珍 -专利权人：哈尔滨因极科技有限公司
申请日： 2023-04-24 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：对提取的总核酸进行扩增，得到扩增产物；所述扩增是指使用一种或多种特异性引物对总核酸进行靶向扩增；所述特异性引物是指能够与感染性微生物的特征序列或保守序列特异性结合的核酸片段。该方法能够在保证检测速度、灵敏度、特异性和覆盖范围的同时，降低检测成本、数据量和分析难度，提高检测准确性和可靠性。
一种基于 mngs 病原微生物快速检测方法及其应用

[发明专利]一种高效的大片段DNA合成与扩增的PCR引物、方法及应用-CN202111051247.2在审
发明人：刘耀光;陈乐天;赵哲;谢先荣;刘伟智;祝钦泷;谭健韬 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2021-09-08 - 公布日： 2021-12-24 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明公开了一种高效、特异地合成与扩增大片段DNA的PCR引物、方法及应用。本发明通过特别设计扩增引物，在正向引物和反向引物5'端添加相同的任意短序列，使扩增序列的单链DNA末端形成反向重复序列并配对产生发夹结构，对引物二聚体和短小的非特异DNA片段的扩增有良好的抑制效果；而较大的目标DNA片段末端难以相互配对不产生发夹结构，因而可避免非特异产物的竞争而被高效地特异性扩增。进一步，本发明使用嵌套式交错变温内循环，可优化目标序列的不同GC含量区间的有效延伸，与上述抑制效果的倍加效应最终提高PCR的扩增效率和特异性；本发明可提高大片段DNA序列从头合成的能力，从不同物种的基因组等各种模板扩增大片段目标DNA，扩增的DNA片段可应用于载体克隆、表达和基因组测序等目的，在分子生物学、合成生物学和生物技术领域具有重要的应用价值。
一种高效片段 dna 合成扩增 pcr 引物方法应用

[发明专利]一种儿童癫痫的诊断试剂盒及其检测方法-CN201811364911.7在审
发明人：张接军;张鹏飞;张艺飞 -专利权人：昆明新开源暾秀生物科技有限公司
申请日： 2018-11-14 - 公布日： 2019-02-15 - 主分类号： C12Q1/6848 文献下载
摘要：本发明公开了一种儿童癫痫的诊断试剂盒及其检测方法，其中，所述诊断试剂盒包括SNP位点的两对上下游扩增引物及扩增模板提取试剂、DNA聚合酶、dNTPs和缓冲液，所述SNP位点为miR‑146a的SNP位点，第一轮扩增产物长于第二轮扩增产物且包含第二轮扩增产物，第二轮扩增以第一轮扩增产物为模板进行。采用两轮扩增的方法对同一段片段进行重复扩增，第二轮引物结合在第一次PCR产物内部，使得第二次PCR扩增片断短于第一次扩增，由于第二次能在错误片段上进行引物配对并扩增的概率极低，因此两轮扩增可以很好地修正第一次扩增中产生的错误片断，扩增的特异性非常高，基本杜绝了引物配对特异性不强造成的非特异性扩增的污染。
扩增扩增产物诊断试剂盒儿童癫痫引物配对片断非特异性扩增模板扩增引物提取试剂缓冲液检测引物修正概率重复污染

[发明专利]甲基化位点的检测方法及检测试剂盒-CN202210711630.4在审
发明人：廖端芳;齐捧;曾娅玲;罗晶晶;肖莉;张佳;李凯 -专利权人：江门市灿明生物科技有限公司
申请日： 2022-06-22 - 公布日： 2022-09-06 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明涉及一种甲基化位点的检测方法及检测试剂盒，检测方法：提供待测DNA样本，用甲基化依赖性内切酶进行酶切；将所得酶切产物与接头片段连接，制备扩增模板；采用扩增引物对扩增模板进行扩增，收集扩增产物检测；接头片段为发夹型接头或者双链接头，接头片段为发夹型接头，扩增引物的数量为一条，且扩增引物与待测DNA样本上甲基化依赖性内切酶的酶切位点的上游序列特异性结合，接头片段为双链接头，扩增引物包括甲基化位点特异性引物和接头引物，甲基化位点特异性引物的数量为一条或者多条，接头引物的数量为一条，且双链接头的反链包含接头引物对应的片段，甲基化位点特异性引物包含接头引物对应的片段。
甲基化检测方法试剂盒

[发明专利]一种高特异性等温核酸扩增方法-CN202310361186.2在审
发明人：申洪杰 -专利权人：广州迪澳基因科技有限公司
申请日： 2023-04-06 - 公布日： 2023-08-04 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明涉及一种高特异性等温核酸扩增方法，包括以下成分的扩增体系：模板、引物组合、dNTPs、具有链置换活性的DNA聚合酶、核糖核酸酶H II。靶标核酸中，M2’和N2是位于靶序列两端的特异性序列，M1’和N1为分别位于M2’序列和N2序列内侧的特异性序列。引物组合含扩增引物组和可选的加速引物组；扩增引物中，上游扩增引物KF包含M1’序列和与M2’互补的m2序列，即5’‑M1’‑m2‑3’，且m2序列中至少有一个RNA碱基；下游扩增引物KR包含N1’序列和与该扩增体系可提高扩增的特异性和灵敏度。
一种特异性等温核酸扩增方法

[发明专利]一种结合多交叉置换扩增和金纳米检测的检测技术及应用-CN201910805561.1在审
发明人：胡守奎;闫琳琳;赵帆;牛莉娜;蔡煜;吴蕾;朱晓雪;高乃姝;农金轻;邢喆 -专利权人：北京大学首钢医院
申请日： 2019-08-28 - 公布日： 2020-02-21 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种结合多交叉置换扩增和金纳米检测的检测技术及其在基因检测中的应用，本发明提供的一种结合多交叉置换扩增和金纳米检测的检测技术，通过在多交叉置换扩增中的扩增引物C1的5’端标记标记物，所述方法针对鲍曼不动杆菌特异基因pgaD(标记异硫氰酸荧光素FITC)及其碳青霉烯耐药基因blaOXA‑23‑like(标记异羟基洋地黄毒苷Dig)的扩增产物能被金纳米生物传感器可视化检测，所述方法便捷、快速、敏感、特异，适宜于推广应用于各种特异核苷酸片段的检测，及应用于该特异核苷酸片段对应的病原菌的检测。
一种结合交叉置换扩增纳米检测技术应用

[发明专利]一种降低PCR非特异性扩增的核苷酸及其设计方法与应用-CN202110006795.7在审
发明人：尚午;王友祥;杨志劼 -专利权人：南京普济生物有限公司
申请日： 2021-01-05 - 公布日： 2021-06-04 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明提供一种降低PCR非特异性扩增的核苷酸及其设计方法与应用，所述的降低PCR非特异性扩增的核苷酸，包括序列A和序列B，所述序列A包括至少6个核苷酸，所述序列A中的核苷酸从A、T、C和G中选取三种碱基作为其构成本发明提供一种降低PCR非特异性扩增的核苷酸及其设计方法与应用，可在完成聚合酶链式反应，检测到目标基因序列，明显地控制住PCR扩增过程存在的非特异性扩增。
一种降低 pcr 非特异性扩增核苷酸及其设计方法应用