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- [发明专利]酿酒酵母的高表达或低表达位点-CN201610458496.6有效
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元英进;武晓乐;李炳志;张文政;齐浩
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天津大学
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2016-06-22
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2019-12-27
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C12N15/81
- 本发明属于基因技术领域，具体涉及酿酒酵母的位点效应的测定，以及基因高表达或低表达位点的筛选，特别是涉及一系列在酿酒酵母中基因高表达或低表达位点以及在高表达位点和低表达位点插入基因的载体。本发明从全基因组尺度上研究酿酒酵母的位点效应，揭示位点效应在酿酒酵母基因组上的分布规律，筛选获得酿酒酵母的高表达位点如YBR128C、YDR448W、YGR240C、YHR142W、YML059C、YPL014W和YPR028W位点，和酿酒酵母的低表达位点如YBR001C、YGR038W、YIL092W、YLR371W和YPL241C位点，为以酿酒酵母细胞为底盘细胞表达外源代谢产物和副产物提供了理性设计的依据。
- 酿酒酵母表达
- [发明专利]一种重组表达载体及其构建方法和应用-CN201810303668.1有效
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徐根兴
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点斗基因科技（南京）有限公司
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2018-04-03
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2023-05-12
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C07K19/00
- 本发明涉及一种高表达的重组蛋白载体pRELPN，是由9聚精氨酸(R9)‑类弹性蛋白多肽(ELP)n‑10聚天冬酰胺(N10)组成的人工合成的ELP融合蛋白(RELPN)，当克隆在原核或真核表达载体(p)的多克隆位点不是作为外源基因直接表达，而是作为起第二启动子的作用。pRELPN载体促进克隆在ELP融合蛋白后起始密码ATG后的外源目的基因独立高表达，该融合蛋白本身极少表达，并且轻微抑制大肠杆菌或真核细胞等宿主自身蛋白的表达，促进外源目的基因的重组蛋白积聚和高表达，这类含双启动子的高表达载体pRELPN适合于表达包括抗体、抗原、酶、重组蛋白、多肽、及ELP融合蛋白等的外源基因的独立高表达，从而有助于解决普通表达载体对外源基因或外源基因与ELP组成的融合基因的低表达或不表达导致不能产业化的问题
- 一种重组表达载体及其构建方法应用
- [发明专利]midkine蛋白稳定高表达肿瘤细胞系的构建和鉴定方法-CN201711314570.8有效
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朴海龙;夏天
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中国科学院大连化学物理研究所
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2017-12-12
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2022-11-08
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C12N5/10
- 本发明公开了一种midkine蛋白稳定高表达肿瘤细胞系的构建和鉴定方法，其特征在于：将编码midkine的DNA序列融合到表达载体pCDNA3.1，转染肿瘤细胞，通过geneticin筛选建立midkine高表达细胞系，使用Western Blot检测确认midkine蛋白表达水平提高；通过增殖曲线测定，发现高表达midkine细胞增殖速度明显加快；提取正常和低糖条件培养细胞的蛋白，进行Western Blot实验，证明高表达midkine的细胞中AMPK磷酸化激活收到抑制，符合midkine蛋白的功能特征。上述结果证明midkine高表达细胞系构建成功，并可以正调控细胞增殖，抑制AMPK通路活性。本方法的建立提供了midkine蛋白稳定高表达细胞系的构建和鉴定方法，研究midkine蛋白的功能，揭示其影响细胞增殖和AMPK通路的机制提供条件，为实现midkine的临床转化应用提供了新的思路。
- midkine蛋白稳定表达肿瘤细胞系构建鉴定方法
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