本发明属于基因工程技术领域，尤其涉及一种突变型信号肽及含有该突变型信号肽的重组载体和应用。所述突变型信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：2。本发明在野生型信号肽的基础上，将野生型信号肽第2位氨基酸由E突变为K、第4位氨基酸由D突变为K，得到突变型信号肽，该信号肽的N端区域所带正电荷明显增加，穿膜能力强，可实现核膜蛋白如TMEM176B的分泌表达
本发明涉及TERT基因启动子突变实时荧光定量PCR检测试剂及方法，其中引物包括序列如SEQ ID No.1的正向引物和序列如SEQ ID No.2的反向引物；探针包括序列如SEQ ID No.3的C250T位点野生型探针、序列如SEQID No.4的C250T位点突变型探针、序列如SEQ ID No.5的C228T位点野生型探针和序列如SEQ ID No.6的C228T位点突变型探针；C250T位点野生型探针和C228T位点野生型探针的5’端标记有FAM荧光基团，C250T位点野生型探针和C228T位点野生型探针的3’端标记有MGB淬灭基团；C250T位点突变型探针和C228T位点突变型探针的5’端标记有VIC荧光基团，C250T位点突变型探针和C228T位点突变型探针的3’端标记有MGB淬灭基团。本发明能够实现TERT基因启动子突变的实时荧光定量PCR检测，检测速度快，判断方便，检测敏感性好，对检测样本要求低。
所述引物探针组合包括用于检测T790M的突变型引物和突变型探针，以及野生型探针；所述突变型引物的序列包括如SEQ ID NO.1所示序列和SEQ ID NO.2所示序列；所述突变型探针的序列包括如SEQ本发明通过T790M突变型的探针和野生型的探针联合，能检测到T790M位点的单独分型，且灵敏度、准确性均比较高，能检测到肿瘤组织各处来源的T790M异常基因，提供了一种无创性肿瘤诊断的新方法，也为肿瘤早期诊断提供了新的希望
