本发明涉及基因工程领域,具体涉及热稳定性提高的脂肪酶TTL突变体TTL‑Arg59Ser/Gly60Glu/Ser61Asn/Ile62Val及其基因和应用。其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示,突变体TTL‑Gly60Glu在80℃水浴5min后剩余酶活为31.2%,提高至亲本脂肪酶的1.70倍。
本发明涉及基因工程领域,具体涉及活性提高的α‑淀粉酶AmyL突变体及其编码基因和应用。突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的经过改良的α‑淀粉酶菌株在180小时的发酵酶活达到36900U/mL,比改造前的α‑淀粉酶生产菌提高41.5%。因此,本发明的突变α‑淀粉酶BsaAmy6及重组工程菌,大大降低了发酵生产成本,为其进一步工业化应用奠定基础。
本发明涉及基因工程领域,具体涉及优化改良的植酸酶突变体及其编码基因和应用。基于SEQ ID NO.2植酸酶的第10位,第70位,第142位,第159位和第255位中至少一个氨基酸被替换。本发明利用基因工程手段对大肠杆菌来源的植酸酶衍生体和毕赤酵母表达载体进行改良,以得到耐高温、高酶活植酸酶的毕赤酵母生产菌。本发明的经过改良的植酸酶在热稳定方面更优势。同时,该菌株生产植酸酶的产量也得到了大幅度的提高,其在180小时的发酵酶活达到25400U/mL,比改造前的植酸酶生产菌提高59.8%。因此,本发明的优化改良的植酸酶可在饲料工业中显示出巨大的应用潜力。
本发明涉及基因工程领域,具体涉及优化的谷氨酰胺转氨酶基因、信号肽及发酵方法。所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述信号肽的核苷酸序列如SEQ ID NO.2~8所示。本发明通过密码子优化技术优化了来源于吸水链霉菌(Streptomyce hygroscopicus)的谷氨酰胺转氨酶基因tg,将优化后的基因tg转化至毕赤酵母获得产TG酶的重组菌,接着,通过筛选比较了不同信号肽对重组菌胞外分泌TG酶的能力,最后,优化了发酵TG酶重组工程菌的工艺参数,实现了TG酶的高效表达,为其产业化应用奠定基础。
本发明涉及基因工程领域,具体地,本发明涉及优化的β-甘露聚糖酶基因MAN及其毕赤酵母表达载体。本申请对核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的β-甘露聚糖酶基因进行改造,得到优化基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。构建了优化β-甘露聚糖酶基因的重组毕赤酵母表达载体并将其转化到毕赤酵母感受态细胞X33中筛选得到高效表达β-甘露聚糖酶的转β-甘露聚糖酶毕赤酵母菌株;酶学性质测定表明,优化的β-甘露聚糖酶基因能在毕赤酵母中稳定、高效的表达及遗传,所表达的β-甘露聚糖酶酶活性以及稳定性显著高于原始β-甘露聚糖酶基因毕赤酵母中所表达的β-甘露聚糖酶的酶活性及稳定性。
本发明涉及基因工程领域,具体地,本发明涉及一种脂肪酶及其基因和应用,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明是为了解决现有技术的不足,从黑曲霉中克隆得到一种脂肪酶基因。该脂肪酶在毕赤酵母中的高效表达,可达到比现有技术更高的表达水平。因此,本发明的重组脂肪酶在工业生产中可大大降低生产成本,使其在洗涤、造纸、食品等工业中显示出更大应用潜力。
本发明涉及基因工程领域,具体地涉及一种角蛋白酶及其编码基因和应用。所述角蛋白酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。高效表达本发明的重组角蛋白酶,可达到20000U/mL以上的发酵水平,同目前已有的生产技术相比,本发明的角蛋白酶通过表达后能够达到较高的发酵水平,在工业生产中可大大降低生产成本,使其在饲料、皮革脱毛鞣制等工业中显示出更大的应用潜力。
本发明涉及基因工程领域,具体地,本发明涉及一种新型酸性果胶酶PEC2及其基因和应用。本发明提供了一种新型酸性果胶酶PEC2,其具有如SEQ ID NO.1所示氨基酸序列,且本发明还提供了编码上述新型酸性果胶酶PEC2的基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,以及包含该基因的重组载体和重组菌株及其应用。本发明的新型酸性果胶酶PEC2具有比活高、耐高温、pH作用范围广等优点,可以广泛应用于各种工业生产,具有良好的应用前景。
本发明涉及基因工程领域,具体地,本发明涉及一种优化改良的中性纤维素酶MEG1及其基因和应用。本发明提供了一种优化改良的中性纤维素酶MEG1,其具有如SEQ ID NO.2所示氨基酸序列,且本发明还提供了编码上述优化改良的中性纤维素酶MEG1的基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,以及包含该基因的重组载体和重组菌株及其应用。本发明的优化改良的中性纤维素酶MEG1在中性条件下酶活有很大的提高,并且,通过高拷贝外源基因菌株的筛选,得到能够在反应器中高效表达的生产菌株,进一步满足工业化生产的要求,因此,本发明的优化改良的MEG1可在纺织、洗涤、造纸、饲料中显示出巨大的应用潜力。
本发明涉及基因工程领域,具体地,本发明涉及一种新型糖化酶VGA及其基因和应用。本发明提供了一种新型糖化酶VGA,其具有如SEQ ID NO.1所示氨基酸序列,且本发明还提供了编码上述新型糖化酶VGA的基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,以及包含该基因的重组载体和重组菌株及其应用。本发明的新型糖化酶VGA在pH 2.0~7.5的条件下酶活稳定,对淀粉的水解效果显著,另外,该糖化酶的耐高温性能较好,在85℃水溶液中处理10min,其酶活损失低于15%,完全符合各种工业需求,适合作为一种新型耐高温糖化酶进行应用。