本发明涉及基因工程领域,具体涉及提高比活的α‑淀粉酶BasAmy突变体及其编码基因和应用。所述突变位点为:氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示的α‑淀粉酶BasAmy发生以下突变:S267Q,L269F,S270P,K274S,A275Y,Q278S,S279Q和L412C。本发明获得的突变体的比活较原酶提高。
本发明属于基因工程和发酵工程技术领域,具体涉及一种耐热α‑半乳糖苷酶基因和应用,其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明的α‑半乳糖苷酶的活性高,来源于嗜热拟青霉,耐热性能良好。α‑半乳糖苷酶最高表达量达到10g/L,发酵液酶活达到10000U/mL,是公开报道的最高水平。而且α‑半乳糖苷酶分泌表达于发酵上清液中,不需要破碎细胞,只需简单过滤除去菌体,即可得到纯度很高的α‑半乳糖苷酶粗酶液,降低下游蛋白分离纯化成本。
本发明涉及基因工程领域,具体涉及高酶活的过氧化氢酶、基因以及高产过氧化氢酶的重组菌株和应用。所述过氧化氢酶CatR的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明提供了高酶活的过氧化氢酶及其基因,并且得到高效表达过氧化氢酶的重组菌株。通过发酵生产的重组菌株,能够高效地生产过氧化氢酶。本发明的过氧化氢酶在葡萄糖酸钠生产中得到广泛应用。
本发明涉及生物技术领域,具体涉及高热稳定性的植酸酶突变体KsPHY9及其基因和应用。所述植酸酶突变体KsPHY9的氨基酸序列为氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的植酸酶KsPHY包含以下突变位点:A73P,A80P,D107K,N203D,G211S,Q224E,Q252V,T326Y,K379P。与亲本植酸酶KsPHY的23.7%残留酶活相比,所述植酸酶突变体KsPHY9的残余酶活为56.9%,耐热性大大提高。
本发明涉及基因工程技术领域,具体涉及葡萄糖氧化酶突变体GOx‑MUT1~6及其编码基因和应用。本发明提供葡萄糖氧化酶突变体,与亲本SEQ ID NO:7所示的葡萄糖氧化酶相比,其热稳定性不下降的情况下,比活有了显著的提升,在75℃处理5min后,酶活保留率都在70%以上。有利于该酶在工业化生产中应用。
本发明涉及基因工程技术领域,特别是涉及一种热稳定性和比活提高的葡萄糖氧化酶突变体GOx1‑MUT、其编码基因和应用。本发明的经过多次突变和高通量筛选获得的热稳定性和比活提高的葡萄糖氧化酶突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。与SEQ ID NO:1所示的亲本葡萄糖氧化酶相比,其热稳定性和比活有了显著的提升,有利于该酶在工业化生产中应用。
本发明公开了一种二糖海藻糖酶的基因和应用。该二糖海藻糖酶基因TH3155的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,该基因可以生产海藻糖酶TH3155,由1056个氨基酸组成,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,该酶能够将海藻糖降解成葡萄糖。在发酵制酒精过程中添加一定量的本发明海藻糖酶,能将代谢过程中产生的海藻糖水解为葡萄糖,供酒精酵母利用,提高酒精产量,同时也降低了酒精发酵废水中海藻糖的残留,降低酒精发酵废水的处理成本。
本发明涉及基因工程与发酵工程领域,本发明公开了一种葡萄糖葡萄糖氧化酶GOD及其基因、制备与应用,其具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。本发明的技术方案利用基因工程等技术手段生产性质优良的葡萄糖氧化酶,通过3L发酵罐验证发酵酶活可达1600U/mL,比活力为296U/mg,在70度处理5min还有70%以上的酶活力,同时对沙门氏杆菌,猪巴氏杆菌,副猪嗜血杆菌,致病大肠杆菌,铜绿假单胞菌,金黄色葡萄球菌的生长可产生明显抑制作用,在养殖过程中适当添加本产品可降低料肉比,节约原料,可广泛应用于饲料,食品,医药等工业。
本发明通过对植酸酶ExAppA和植酸酶CxAPPA通过大片段组合方式,对植酸酶结构带来较大变化,获得了比两个亲本热稳定性显著性提高的组合体。然后通过突变的方法获得了一种新型的耐高温植酸酶突变体,所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3或4所述,该突变体在耐温性及pH适应性方面表现出良好的特性,具有较好的应用前景。耐温性能大大提升,在90℃‑95℃处理热稳定性高。
本发明首次公开了一种嗜热真菌Thermothelomyces中的海藻糖酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述海藻糖酶在pH4.0~5.5的区间都具有较好的酶活,在发酵制酒精过程的酶活维持较高水平,所述海藻糖酶经密码子优化后的海藻糖酶基因,选用毕赤酵母作为表达菌株,重组优化的海藻糖酶毕赤酵母菌株能明显地提高海藻糖酶的表达水平。重组后的TreT酶的温度适用性更广,应用的范围更我广泛。尤其在高温条件反应的酶促反应中具有显著优势。在发酵制酒精过程中添加一定量的所述海藻糖酶,能将代谢过程中产生的海藻糖水解为葡萄糖,供酒精酵母利用,提高酒精产量,增加了转化率。