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农业化学；冶金建筑机械工程区域搜索

主分类

B 作业；运输

C 化学；冶金

D 纺织；造纸

E 固定建筑物

F 机械工程、照明、加热

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公布日期

2023-10-24 公布专利

2023-10-20 公布专利

2023-10-17 公布专利

2023-10-13 公布专利

2023-10-10 公布专利

2023-10-03 公布专利

2023-09-29 公布专利

2023-09-26 公布专利

2023-09-22 公布专利

2023-09-19 公布专利

专利权人

国家电网公司

华为技术有限公司

中兴通讯股份有限公司

三星电子株式会社

中国石油化工股份有限公司

鸿海精密工业股份有限公司

松下电器产业株式会社

上海交通大学

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[发明专利]一种提高甲壳素酶表达量的方法-CN201811068554.X有效
发明人：刘龙;潘梦妍;吕雪芹;堵国成;李江华;陈坚 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-09-13 - 公布日： 2020-08-04 - 主分类号： C12N15/62 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高甲壳素酶表达量的方法，属于酶工程以及微生物工程技术领域。本发明的方法为先将信号肽NprB、AmyE、AprE、BglS、Bpr、Epr、LipA、Vpr、YweA或YclQ的基因融合至切除了自身信号肽基因的甲壳素酶基因N端，然后将融合有外源信号肽基因的甲壳素酶基因在表达宿主中进行表达，以提高甲壳素酶的表达量；将利用本发明的方法得到的重组菌发酵12h，可使得发酵上清液中的甲壳素酶酶活提高至20.62U/mL(胞外酶活)，是野生型菌株发酵的将近15倍。
一种提高甲壳素表达方法

[发明专利]一种高产L-苏氨酸的重组大肠杆菌及其构建方法-CN201811465330.2有效
发明人：刘龙;陈泰驰;李江华;堵国成;陈坚 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-12-03 - 公布日： 2020-08-04 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种高产L‑苏氨酸的重组大肠杆菌及其构建方法，属于遗传工程领域。本发明是以大肠杆菌CICC20905作为出发菌株，采用CRISPR‑Cas9基因编辑技术，替换高丝氨酸激酶编码基因thrB启动子为强启动子T7；敲除苏氨酸脱氢酶编码基因tdcB，减少发酵过程苏氨酸的代谢消耗；替换赖氨酸合成途径二氢吡啶二羧酸合成酶DHDPS编码基因dapA的起始密码子ATG为GTG，削弱赖氨酸的合成。最终得到积累L‑苏氨酸的大肠杆菌基因工程菌，产量达到30g/L，为进一步代谢工程改造大肠杆菌生产L‑苏氨酸奠定了基础。
一种高产苏氨酸重组大肠杆菌及其构建方法

[发明专利]一种底物特异性提高的角蛋白酶突变体及其制备方法-CN201710845163.3有效
发明人：张娟;方真;堵国成;陈坚;刘柏宏 -专利权人：江南大学
申请日： 2015-03-18 - 公布日： 2020-08-04 - 主分类号： C12N9/52 文献下载
摘要：本发明公开了一种底物特异性提高的角蛋白酶突变体及其制备方法，属于酶工程领域。本发明通过分析得出最佳突变点进行定点突变，获得角蛋白酶酶活和底物专一性提高的优秀突变体。该角蛋白酶及其突变体能够有效水解羽毛，羊毛等非水溶性角蛋白底物，可用于皮革纺织工业和饲料工业。
一种特异性提高角蛋白突变体及其制备方法

[发明专利]一种用于动物细胞培养的生物反应器-CN201910535312.5有效
发明人：李雪良;陈坚;堵国成;李江华;周景文;张国强;赵鑫锐;孙秀兰 -专利权人：江南大学
申请日： 2019-06-20 - 公布日： 2020-08-04 - 主分类号： C12M1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于动物细胞培养的生物反应器，属于细胞培养领域。本发明利用活塞的往复运动代替搅拌桨的旋转，直接推动反应器的液体流动，在极低剪切力的条件下满足快速混合的需求，同时又将碟式气体分布器安装在反应器最低处，使气流带动液体流动，保证细胞和微载体不发生沉积。此外，本发明使用连续离心浓缩细胞，排泄代谢废物，避免了错流过滤对细胞造成的危害。本发明将剪切力对动物细胞造成的损失最小化，能够提高细胞的活性、生长特性和产率。本发明所设计的生物反应器适用于连续运行、长时间运行和反复运行，降低了设备成本，减少固体工业垃圾的产生，不造成二次污染。
一种用于动物细胞培养生物反应器

[发明专利]一种天然酵母面包发酵剂-CN201710897568.1有效
发明人：张娟;吴佳静;堵国成;陈坚;李志斌;傅贵华 -专利权人：福建省麦都食品发展有限公司;江南大学
申请日： 2017-09-28 - 公布日： 2020-08-04 - 主分类号： C12N1/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种天然酵母面包发酵剂，属于食品微生物技术领域。所述天然酵母发酵剂由添加了冻干保护剂制备而成的酿酒酵母WJ‑03、乳酸明串珠菌WJ‑01、植物乳杆菌WJ‑02冻干菌粉，三种微生物的比例为1:1.5:1.5。本发明提供的天然酵母发酵剂使用方便、活菌数高、发酵能力强、风味浓郁，其制作的面包品质稳定，风味独特且天然健康，营养价值全面，适合各种人群。
一种天然酵母面包发酵剂

[发明专利]一种检测粽子中微生物的方法-CN202010467038.5在审
发明人：张国强;李江华;陈坚;堵国成 -专利权人：江南大学
申请日： 2020-05-28 - 公布日： 2020-07-24 - 主分类号： C12Q1/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种检测粽子中微生物的方法，属于微生物检测领域。本发明的方法包括以下步骤：(1)菌落总数的测定；(2)霉菌和酵母计数；(3)大肠菌群计数。本发明的检测方法，具备一定操作经验的技术人员、或具备实验室均可进行操作。可将固体中不同的菌株快速分离并检测出来，操作简便、快速、误差小，可用于多种场景的菌株分离检测及数量检测，具有良好的应用前景。
一种检测粽子微生物方法

[发明专利]一种热稳定性提高的谷氨酰胺转氨酶-CN201910171525.4有效
发明人：刘松;童理明;陈坚;堵国成 -专利权人：江南大学
申请日： 2015-12-31 - 公布日： 2020-07-03 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：一种谷氨酰胺转氨酶，特别是一种热稳定性提高的谷氨酰胺转氨酶。通过在成熟酶的N端的融合表达双亲短肤实现酶热稳定性的提高。
一种热稳定性提高谷氨酰胺转氨酶

[发明专利]一种适用于枯草芽孢杆菌的非天然氨基酸利用工具-CN202010124554.8在审
发明人：刘延峰;堵国成;田荣臻;陈坚 -专利权人：江南大学
申请日： 2020-02-27 - 公布日： 2020-06-19 - 主分类号： C12N15/75 文献下载
摘要：本发明公开了一种适用于枯草芽孢杆菌的非天然氨基酸利用工具，属于基因工程领域。本发明是以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)作为表达宿主，通过在胞内表达特定tRNA和相应的特异性识别非天然氨基酸的氨酰tRNA合成酶，使枯草芽孢杆菌能够利用非天然氨基酸翻译终止密码子TAG。同时，通过调节非天然氨基酸浓度，使枯草芽孢杆菌内形成了一个严密的蛋白表达开关，达到定向调控基因表达强度或蛋白表达量的效果。本发明为枯草芽孢杆菌表达带有非天然氨基酸的高活性酶，降低工程菌逃逸概率等方面的应用奠定了基础。
一种适用于枯草芽孢杆菌天然氨基酸利用工具

[发明专利]一种增强L-天冬酰胺酶耐酸性的方法-CN201811609742.9有效
发明人：刘松;李岑;陈坚;堵国成 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-12-27 - 公布日： 2020-06-16 - 主分类号： C12N1/15 文献下载
摘要：本发明公开了一种增强L‑天冬酰胺酶耐酸性的方法，属于酶工程技术领域。本发明通过将黑曲霉来源的L‑天冬酰胺酶与糖化酶催化区域进行融合表达，改变糖基化程度，以改变L‑天冬酰胺酶的酶学性质。本发明获得的重组L‑天冬酰胺酶的最适pH从7.5改变至5，由碱性变至酸性，且在pH为3的条件下仍能保持60％的酶活，这些性质有利于其在食品加工领域的进一步应用。
一种增强天冬酰胺酶耐酸方法

[发明专利]一种酶活提高的甲壳素酶突变体-CN201811484682.2有效
发明人：刘龙;潘梦妍;吕雪芹;堵国成;李江华;陈坚 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-12-06 - 公布日： 2020-06-09 - 主分类号： C12N9/42 文献下载
摘要：本发明公开了一种酶活提高的甲壳素酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过定点突变的方式，将甲壳素酶分子催化结构域附近的第43位半胱氨酸突变为天冬氨酸，第273位苯丙氨酸突变为色氨酸、第336位谷氨酸突变为精氨酸，显著提高了菌株表达甲壳素酶的酶活力，其中单突变株F273W和E336R较出发菌株酶活分别提高了1.37倍和1.22倍。改造后的菌株产酶能力和催化效率都得到了提高，通过HPLC检测纯化后突变体中几丁寡糖的含量发现，催化3h，F273W突变株产糖量为1.65g/L，其中GlcNAc为0.12g/L，(GlcNAc)2为1.53g/L，相比野生菌株提高了49.7％。
一种提高甲壳素突变体

[发明专利]一种发酵小分子透明质酸的重组兽疫链球菌-CN201710390552.1有效
发明人：康振;陈坚;堵国成;张琳培;韦朝宝 -专利权人：江南大学
申请日： 2017-05-27 - 公布日： 2020-06-09 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种发酵小分子透明质酸的重组兽疫链球菌，属于生物工程技术领域。本发明将水蛭来源的透明质酸酶在兽疫链球菌中进行异源表达，选取9种信号肽与透明质酸酶N端融合，并采用Pspac诱导型启动子和链球菌RBS，通过比较酶活，筛选合适的信号肽，实现了透明质酸酶在兽疫链球菌中的高效分泌表达，同时通过降解兽疫链球菌自身所产大分子透明质酸，获得了活性小分子透明质酸，并有一定的产量提升。本发明为微生物系统高效发酵制备小分子透明质酸奠定了基础，适合于工业化生产应用。
一种发酵分子透明重组链球菌

[发明专利]一种体外快速组装非磷酸化DNA片段的方法-CN201610543258.5有效
发明人：康振;陈坚;堵国成;丁雯雯;金鹏 -专利权人：江南大学
申请日： 2016-07-11 - 公布日： 2020-06-09 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种体外快速组装非磷酸化DNA片段的方法，属于基因工程技术领域。本发明在需要组装构建的目标片段两末端引入同源臂序列，采用热循环进行变性‑退火‑切割‑连接的方式，实现快速体外DNA组装构建。在1.5h内一次可以实现2‑4个非磷酸化DNA片段的高效快速的无缝组装。本发明可用于常规的DNA重组构建，并实现高通量操作，特别适合于对酶基因和合成途径的体外高效组装上，可引入丰富的组合突变多样性，进行快速定向进化和合成生物学操作。
一种体外快速组装磷酸化 dna 片段方法

[发明专利]一种基于CRISPRi的共利用葡萄糖和木糖生产N-乙酰氨糖的方法-CN201810036701.9有效
发明人：刘龙;陈坚;堵国成;李江华;武耀康;陈泰驰 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-01-15 - 公布日： 2020-06-09 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于CRISPRi的共利用葡萄糖和木糖生产N‑乙酰氨糖的方法，属于遗传工程领域。本发明以枯草芽孢杆菌BSGNY‑Pveg‑glmS‑P43‑GNA1为出发菌株，在基因组上整合了受木糖诱导的dCas9以及三个可分别作用于zwf，pfkA和glmM三个基因的sgRNA表达片段，并利用该菌株在摇瓶发酵，使N‑乙酰氨基葡萄糖产量达到20.5g/L，N‑乙酰氨基葡萄糖得率为0.612g/g葡萄糖，同时实现了重组枯草芽孢杆菌对于葡糖糖和木糖的高效共利用，并为进一步代谢工程改造枯草芽孢杆菌生产氨基葡萄糖及其工业化奠定了基础。
一种基于 crispri 利用葡萄糖生产乙酰方法

[发明专利]一株耐热亚罗解脂酵母及其应用-CN201910348888.0有效
发明人：张娟;邱学良;李江华;堵国成;陈坚;朱政明 -专利权人：江南大学
申请日： 2019-04-28 - 公布日： 2020-06-09 - 主分类号： C12N1/16 文献下载
摘要：本发明公开了一株耐热亚罗解脂酵母及其应用，属于工业生物技术领域。所述耐热亚罗解脂酵母已于2019年3月18日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2019163，保藏地址为中国武汉武汉大学。本发明的亚罗解脂酵母(Yarrowia Lipolytica)BBE‑18，可以在35℃下发酵生产赤藓糖醇，且在发酵时间为80h，耐热亚罗解脂酵母BBE‑18的赤藓糖醇的产量达到68.1g/L，葡萄糖对赤藓糖醇转化率为67％。具有一定的产业化潜力，为发酵冷却成本降低，避免夏季停产提供了可能性。
耐热亚罗解脂酵母及其应用

[发明专利]一种改造蛋白折叠分泌途径增强葡萄糖氧化酶分泌的方法-CN201710975230.3有效
发明人：张娟;陈坚;顾磊;堵国成 -专利权人：江南大学
申请日： 2014-10-22 - 公布日： 2020-06-09 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种改造蛋白折叠分泌途径增强葡萄糖氧化酶分泌的方法，属于基因工程技术领域。本发明采用基因重组技术将毕赤酵母中KAR2、CNE1、ERO1、SSA4、SSO2、SEC53、BMH2、HRD1、UBC1、GCN4等基因分别克隆连接到毕赤酵母表达载体pGAPZ等系列衍生质粒连接，并与GOD共表达转化入Pichia pastoris GS115菌株中，考察其效果，并通过模块化组合优化，经筛选鉴定得到一株较原有菌株增强分泌表达葡萄糖氧化酶的菌株。该菌株表达的葡萄糖氧化酶在3L发酵罐上酶活1972.9U/mL。这为葡萄糖氧化酶的大规模生产奠定了良好的基础。
一种改造蛋白折叠分泌途径增强葡萄糖氧化酶方法

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