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[发明专利]一种电喷雾质谱中多磷酸化位点肽段的检测和鉴定方法-CN200610134982.9无效
发明人：张丽华;王晖;段继诚;丛永正;张维冰;梁振;张玉奎 -专利权人：中国科学院大连化学物理研究所
申请日： 2006-12-22 - 公布日： 2008-06-25 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明涉及磷酸化肽的检测方法，具体地说是一种电喷雾质谱中多磷酸化位点肽段的检测和鉴定方法。利用磷酸酶对磷酸化肽进行处理，通过控制磷酸化肽的去磷酸化程度，将处理后的样品与未处理的样品分别进入电喷雾质谱中进行分析和比较。从而测定磷酸化肽段，并确定其磷酸化位点。本发明的优点为：可作为一种电喷雾质谱中初步判断多磷酸化肽段存在的方法；可提高多磷酸化肽段的质谱响应信号和检出率；通过控制反应条件能够推测多磷酸化肽段的磷酸化位点，并可作为一种多级质谱分析的验证方法；方法简单
一种喷雾质谱中多磷酸化位点肽段检测鉴定方法

[发明专利]生物信号通路中磷酸化系统的磷酸化活性预测方法及系统-CN202310601374.8有效
发明人：张瑞;蔺香运 -专利权人：山东科技大学
申请日： 2023-05-26 - 公布日： 2023-07-28 - 主分类号： G16B15/30 文献下载
摘要：本申请涉及一种生物信号通路中磷酸化系统的磷酸化活性预测方法及系统，属于生物信息计算领域，该预测方法采用实验测量和数学计算相结合的方式，对磷酸化系统进行拟合建模，利用实验测量数据与拟合模型的理论数据估计磷酸化系统的随机扰动，并以此计算磷酸化系统的信息熵作为信号通路中磷酸化系统的磷酸化活性的指标，该预测方法成本低且误差小，对磷酸化系统的磷酸化活性测定的准确度较高，该预测方法对与磷酸化相关的疾病研究以及药物设计具有重要的意义
生物信号通路磷酸化系统活性预测方法

[发明专利]高稳定型的蔗糖磷酸化酶突变体及其应用-CN202210717959.1在审
发明人：周伟;秦丽红;徐国霞 -专利权人：华熙生物科技股份有限公司;华熙生物科技（天津）有限公司
申请日： 2022-06-20 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明提供一种蔗糖磷酸化酶突变体，所述蔗糖磷酸化酶突变体基于参比蔗糖磷酸化酶通过以下位置的突变得到：在参比蔗糖磷酸化酶的自由能低的氨基酸残基处；在参比蔗糖磷酸化酶的不稳定的氨基酸残基处；在参比蔗糖磷酸化酶的与热稳定相关的氨基酸残基处本申请通过对参比蔗糖磷酸化酶突变得到的蔗糖磷酸化酶突变体与参比蔗糖磷酸化酶相比具有更高的热稳定性，在70℃下，所述蔗糖磷酸化酶突变体的热稳定性比参比蔗糖磷酸化酶的热稳定性提高10％‑98％。
稳定蔗糖磷酸化酶突变体及其应用

[发明专利]EGFR蛋白磷酸化的抑制试剂及抑制方法和用途-CN202310055904.3在审
发明人：万祎;杨辉;崔洪洋;张倩男 -专利权人：北京大学
申请日： 2023-01-18 - 公布日： 2023-07-11 - 主分类号： A61K33/18 文献下载
摘要：本发明涉及一种EGFR蛋白磷酸化的抑制试剂及抑制方法和用途。所述EGFR蛋白磷酸化的抑制试剂包含碘化钠。EGFR蛋白磷酸化的抑制方法包括：将碘化钠溶解于超纯水，制得碘化钠母液，作为EGFR蛋白磷酸化的抑制试剂；将碘化钠母液加入细胞培养基中，配制成EGFR磷酸化抑制培养基；对于NIS高表达细胞，直接利用含有碘化钠的EGFR磷酸化抑制培养基抑制EGFR蛋白的磷酸化；对于NIS低表达细胞，将NIS的激动试剂加入含有碘化钠的EGFR磷酸化抑制培养基，再用其抑制EGFR蛋白的磷酸化。本发明可应用于抗肿瘤药物的研发，抑制EGFR磷酸化激活可抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移和血管再生，诱导肿瘤细胞凋亡。
egfr 蛋白磷酸化抑制试剂方法用途

[发明专利]一种磷酸化多肽和截短蛋白的共价偶联方法及其应用-CN202010446568.1有效
发明人：周小进;缪志刚;庄光磊;陈卓友;孙欢欢 -专利权人：苏州仁端生物医药科技有限公司
申请日： 2020-05-25 - 公布日： 2020-10-02 - 主分类号： C07K14/47 文献下载
摘要：本发明公开了一种磷酸化多肽和截短蛋白的共价偶联方法及其应用，采用戊二醛将Tau截短蛋白和Tau磷酸化多肽共价偶联，形成重组磷酸化蛋白。本发明采用所述偶联方法制备重组pTau‑181、pTau‑231、pTau‑396磷酸化蛋白，并以此为磷酸化蛋白作为标准品定量检测样本中该磷酸化蛋白的含量。本发明提供的重组pTau‑181、pTau‑231、pTau‑396磷酸化蛋白，能够用于血液及脑脊液中pTau‑181、pTau‑231、pTau‑396磷酸化蛋白含量的检测，特异性强、灵敏度高，可用于阿尔茨海默症患者的辅助诊断
一种磷酸化多肽蛋白共价方法及其应用

[发明专利]一种用于识别蛋白质磷酸化位点的方法-CN202010335300.0有效
发明人：李凌海 -专利权人：首都医科大学附属北京胸科医院;北京市结核病胸部肿瘤研究所
申请日： 2020-04-24 - 公布日： 2022-03-01 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于识别蛋白质磷酸化位点的方法，涉及分子生物技术领域，具体地，该用于识别蛋白质磷酸化位点的方法包括将表达载体1表达的蛋白通过免疫沉淀实验分离，使用磷酸化抗体进行免疫印迹实验以检测待测磷酸化位点的修饰情况，表达载体1含具有待测位点的氨基酸序列片段，其在没有针对单个蛋白位点的磷酸化抗体的条件下，也能够有效准确地检测蛋白单个位点的磷酸化修饰情况，节省了针对特定位点的磷酸化抗体的制备成本，加快蛋白质磷酸化位点的研究进程
一种用于识别蛋白质磷酸化方法

[发明专利]一种磷酸化反应的检测方法及试剂盒-CN202111644238.4在审
发明人：朱穆真;姜锋;张介中;李志民;孙雪光;王娟 -专利权人：安诺优达基因科技（北京）有限公司
申请日： 2021-12-29 - 公布日： 2022-05-13 - 主分类号： C12Q1/48 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于检测T4 PNK磷酸化效率的方法及试剂盒，其包括：使用T4 PNK酶对dsDNA进行磷酸化，得到5′端磷酸化产物；使用具有识别5′端磷酸化的dsDNA并对其进行外切的酶对磷酸化产物进行酶切，得到酶切产物；最后测定酶切产物的量；该方法能够稳定而准确的检测出T4 PNK酶磷酸化效率。
一种磷酸化反应检测方法试剂盒

[发明专利]一种磷酸化反应的生产系统-CN201510482695.6在审
发明人：赵国良;朱坚毅;陆蕴菊 -专利权人：太仓市隆纺油剂有限公司
申请日： 2015-08-07 - 公布日： 2015-11-04 - 主分类号： B01J8/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种磷酸化反应的生产系统，包括磷酸化反应釜，所述磷酸化反应釜的上部设置有操作平台，所述操作平台上搭建有P₂O₅加料室。本发明的磷酸化反应的生产系统的P₂O₅加料室内安装有空调机和空气干燥机，可以控制加料时的温度和相对湿度，进而有效防止P₂O₅吸湿结块；磷酸化反应釜的加料口上安装有抖动机，可以有效控制加料的速度；磷酸化反应釜内采用螺旋螺带搅拌器，使得搅拌均匀和充分；磷酸化反应釜的夹套中设置有温度控制装置，可以有效控制磷酸化反应釜内的温度；磷酸化反应釜的外部设置有循环装置，反应物料能够在磷酸化反应釜的内部和外部进行循环，从而使得搅拌更加均匀，反应更加充分。
一种磷酸化反应生产系统

[发明专利]一种高电荷量磷酸化纳米纤维素及其制备方法-CN202310855709.9在审
发明人：苏荣欣;黄仁亮;高雪;崔美;刘朝辉 -专利权人：天津永续新材料有限公司;天津大学;宁波永续新材料有限公司
申请日： 2023-07-13 - 公布日： 2023-09-05 - 主分类号： C08B5/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种高电荷量磷酸化纳米纤维素及其制备方法，所述制备方法包括：纤维素原料、磷酸化试剂和尿素混合球磨，得到反应混合物；对反应混合物依次进行高温固化、洗涤和机械均质，得到所述磷酸化纳米纤维素。本发明提供的磷酸化纳米纤维素制备方法基于机械化学法的预磷酸化处理工艺，首先利用机械球磨将纤维素原料、磷酸化试剂和尿素均匀混合，球磨增加了反应原料之间的接触面积，有利于促进磷酸化反应的高效进行，进而促进更高效的机械均质过程，也有利于得到电荷量较高的磷酸化纳米纤维素。此过程降低了磷酸化纳米纤维素的生产成本和环境影响，可以制备得到功能性更强的复合材料，进一步提高了磷酸化纳米纤维素的生物利用度。
一种电荷磷酸化纳米纤维素及其制备方法

[实用新型]一种磷酸化反应的生产系统-CN201520593683.6有效
发明人：赵国良;朱坚毅;陆蕴菊 -专利权人：太仓市隆纺油剂有限公司
申请日： 2015-08-07 - 公布日： 2015-12-16 - 主分类号： B01J8/10 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种磷酸化反应的生产系统，包括磷酸化反应釜，所述磷酸化反应釜的上部设置有操作平台，所述操作平台上搭建有P₂O₅加料室。本实用新型的磷酸化反应的生产系统的P₂O₅加料室内安装有空调机和空气干燥机，可以控制加料时的温度和相对湿度，进而有效防止P₂O₅吸湿结块；磷酸化反应釜的加料口上安装有抖动机，可以有效控制加料的速度；磷酸化反应釜内采用螺旋螺带搅拌器，使得搅拌均匀和充分；磷酸化反应釜的夹套中设置有温度控制装置，可以有效控制磷酸化反应釜内的温度；磷酸化反应釜的外部设置有循环装置，反应物料能够在磷酸化反应釜的内部和外部进行循环，从而使得搅拌更加均匀，反应更加充分。
一种磷酸化反应生产系统

[发明专利]磷酸化酶的制造方法-CN200480015729.0有效
发明人：五十岚一晓;泷泽修一;桧垣纪彦;人见润 -专利权人：花王株式会社
申请日： 2004-06-04 - 公布日： 2006-07-12 - 主分类号： C12N9/12 文献下载
摘要：本发明提供一种以高纯度，且简便地从磷酸化酶生产菌制造磷酸化酶的方法。即，本发明的磷酸化酶制造方法是在磷酸类或其盐浓度为50mM以上的培养基中培养磷酸化酶生产菌，提取培养基中生成的磷酸化酶的制造方法。
磷酸化酶制造方法

[发明专利]一种淀粉磷酸化酶单克隆抗体及其制备方法-CN201610401822.X在审
发明人：欧文军;余厚美 -专利权人：中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所
申请日： 2016-06-08 - 公布日： 2016-11-09 - 主分类号： C07K16/40 文献下载
摘要：本发明公开了一种淀粉磷酸化酶单克隆抗体的制备方法，包括以下步骤：(1)扩增淀粉磷酸化酶基因，并将其克隆到原核表达载体中，经E.coli表达纯化淀粉磷酸化酶；(2)用纯化的淀粉磷酸化酶蛋白免疫小鼠，测定小鼠血清效价，取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，制备能产生淀粉磷酸化酶单克隆抗体的杂交瘤细胞株；(3)纯化淀粉磷酸化酶单克隆抗体并验证其特异性。通过本发明的方法制备的淀粉磷酸化酶单克隆抗体具有高效价、高稳定性和高特异性，可后期用于淀粉磷酸化酶的免疫学检测。
一种淀粉磷酸化酶单克隆抗体及其制备方法

[发明专利]一种富集棉花磷酸化蛋白质的方法-CN201010290327.9无效
发明人：刘康;郝佩佩 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2010-09-21 - 公布日： 2011-02-09 - 主分类号： C07K1/22 文献下载
摘要：本发明涉及一种富集棉花组织中磷酸化蛋白质的方法，属于生物技术领域。包括棉花总蛋白的提取和利用Al(OH)3亲和层析法(MOAC)富集棉花磷酸化蛋白质。本发明从1mg棉花总蛋白质中富集得到12μg磷酸化蛋白质，富集效率是进口Qiagen试剂盒富集的6倍以上。用这种方法富集的磷酸化蛋白质经双向电泳和磷酸化蛋白质特异性染料ProQ diamondTM(Invitrogen)染色检验，未发现非磷酸化蛋白质混杂。该方法可以取代昂贵的进口试剂盒，高效、专一富集磷酸化蛋白质，广泛应用于磷酸化蛋白质组学、细胞信号等研究。
一种富集棉花磷酸化蛋白质方法

[发明专利]磷酸化川牛膝多糖、其灌肠液及其制备方法-CN201710509737.X在审
发明人：封海波;樊静 -专利权人：西南大学
申请日： 2017-06-28 - 公布日： 2017-10-20 - 主分类号： C08B37/00 文献下载
摘要：本发明提供一种磷酸化川牛膝多糖，其灌肠液，及其制备方法。磷酸化川牛膝多糖灌肠液的制备方法包括，步骤一，提取川牛膝多糖，步骤二，制备磷酸化川牛膝多糖，以及步骤三，配制磷酸化川牛膝多糖灌肠液。磷酸化川牛膝多糖的制备方法为将川牛膝多糖加入蒸馏水和硝酸，加热后加入磷酸钠和氯化钡，调整pH值后，过滤，滤液加入无水硫酸钠，震荡离心，离心物复溶后，透析袋中透析得到磷酸化川牛膝多糖。磷酸化川牛膝多糖灌肠液包含2％～6％质量浓度的磷酸化川牛膝多糖，0.7～2.1％的氯化钠，0.1％～0.3％的酸碱度缓冲液。本发明制备的磷酸化川牛膝多糖灌肠液能够直接杀灭犬细小病毒，对幼犬感染犬细小病毒具有良好的治疗作用，可有效的提高感染细小病毒犬的生存率。
磷酸化川牛膝多糖灌肠及其制备方法

[发明专利]一种利用功能纳米通道实时监测磷酸化的方法-CN202010939496.4在审
发明人：卿光焱;李闵闵;熊雨婷;王东东 -专利权人：中国科学院大连化学物理研究所
申请日： 2020-09-09 - 公布日： 2022-03-25 - 主分类号： G01N27/31 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用功能纳米通道实时监测磷酸化的方法。首先合成具备识别磷酸根功能的聚合物，然后利用偶联反应将功能聚合物接枝到人工纳米通道内表面。通道内聚合物与磷酸化产物磷酸化肽具有特异性相互作用，并会造成聚合物层发生不同程度的收缩，导致在施加电压下流经通道的离子电流发生相应的变化，进而实现对磷酸化的检测。并随着磷酸化反应的进行(即磷酸化产物——磷酸化肽的量逐渐增多)，该功能纳米通道的电流也发生随时间的相应变化，因此实现实时的磷酸化监测。该功能纳米通道方法操作简单、成本低、无需标记，能够实时监测激酶磷酸化发生，为小分子激酶抑制剂的筛选提供了一种新手段。
一种利用功能纳米通道实时监测磷酸化方法

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