本发明公开了一种乙酰化调控的乳酸脱氢酶突变体及其在提高乳酸的合成中的应用，该突变体是乳酸脱氢酶LdhA蛋白的第9位赖氨酸突变为精氨酸形成的，命名为K9R突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了一种乙酰化调控的乳酸脱氢酶双突变体及其在抑制乳酸的合成中的应用，该突变体是乳酸脱氢酶LdhA蛋白的第154位和248位的赖氨酸突变为谷氨酰胺形成的，命名为K154Q‑K248Q双突变体，其氨基酸序列如实验证实K9R突变体使得LdhA的酶活提高了2.5倍，过表达K9R突变体的菌株乳酸产量比过表达野生型LdhA提高1.67倍；K154Q‑248Q双突变体的活性降低至野生型的12.6％，基因组上ldhA基因原位突变为K154Q‑K248Q的双突变菌株在抑制乳酸合成方面可以实现与目前常用的ldhA基因敲除法类似的效果。
本发明提供了一种亚胺还原酶突变体及其编码基因和应用，亚胺还原酶突变体氨基酸序列如SEQ ID NO 3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31所示；亚胺还原酶突变体基因核苷酸序列如SEQ ID NO 4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32所示；重组载体包含亚胺还原酶突变体基因；用于生产亚胺还原酶突变体的基因工程菌包含重组载体。亚胺还原酶突变体的制备方法，包括培养基因工程菌，获得重组的亚胺还原酶突变体。本发明提供了一种反转亚胺还原酶的突变方式，可同时提高酶对于式Ⅰ所示化合物的活力，可用于式b结构的环状亚胺合成反应。
本发明涉及一种基于分子动力学的酶柔性分析提高肝素酶I热稳定性的突变体，所述突变体为突变体BtHepIQ198R和/或突变体BtHepIK247W，所述突变体BtHepIQ198R的氨基酸序列为SEQ ID NO.1，所述突变体BtHepIK247W突变体为热稳定性能优良的肝素酶I突变株，具有较大的工业应用潜力以及经济价值，同时热稳定性的肝素酶I对延长肝素酶I的货架周期，提高其在催化工艺中的操作稳定性和重复利用批次，降低生产成本等，具有重要的意义
本发明涉及玉米IPE1突变体及其检测方法与应用，本发明提供的玉米IPE1突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的玉米IPE1突变体能够导致玉米雄性的完全不育，而且仅影响玉米的雄性育性性状，对雌性育性性状以及各种农艺性状均没有影响；同时，IPE1突变体为基因内部点突变，不会影响IPE1基因两侧相邻基因的功能因此，玉米IPE1突变体能够直接用于杂交玉米选育、不育系改良等玉米的遗传育种和种质改良，具有极大的推广应用潜力和经济价值。本发明还提供了的IPE1突变体的检测方法，能够实现快速准确的IPE1突变体和玉米雄性育性性状的检测。
本发明提供一种具有高热稳定性的黄递酶突变体、基因及其制备方法，其中，黄递酶突变体是将野生型黄递酶氨基酸序列的第122位氨基酸由甘氨酸突变为天冬氨酸获得的，黄递酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：1该黄递酶突变体的酶学性质与野生型黄递酶相同，且其热稳定性显著高于野生型黄递酶，pH的稳定范围较广；该黄递酶突变体的制备方法采用基因工程手段，将黄递酶突变体基因克隆到表达载体，转化宿主细胞进行原核表达，可获得大量高稳定性黄递酶突变体
本发明属于酶工程领域，具体涉及一种几丁质酶突变体ChiM‑SS及其应用。本发明提供的几丁质酶突变体ChiM‑SS是以几丁质酶ChiM为出发模板，通过理性设计二硫键突变体以及组合突变获得热稳定性提升的突变体ChiM‑SS，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明突变体ChiM‑SS在60℃、65℃和70℃热处理60分钟后的剩余酶活分别为59.6%、45.8%和33.2%，分别是出发模板ChiM的2.71倍，5.1倍和4.7倍。本发明通过结合基因拷贝数、分子伴侣共表达，以毕赤酵母为重组表达宿主，实现突变体ChiM‑SS的高效表达，可用于制备突变体ChiM‑SS，进一步为其广泛应用奠定基础。
本发明公开了一种海洋链霉菌磷脂酶D突变体及其重组表达菌株的制备方法，所述的磷脂酶D突变体是在氨基酸序列为SEQ ID NO:1的亲本序列基础上发生如下突变：P343A；或Y383L；或P343A，Y383L相比于野生型，本发明突变体1的酶活力是野生型的1.3倍，突变体2的酶活是野生型的1.46倍，突变体3的酶活是野生型的3.9倍，突变体4的酶活是野生型的11.6倍。本发明获得的磷脂酶突变体活力得到显著提高。
本发明公开了漆酶突变体及其应用。SEQ ID No.1所示的野生型漆酶13B22分别进行D511E、V435I、I88L、H436E、G430S、V378I、I424F、N367D、I129L、W502F、H439Y或S248A单位点突变获得了12个单位点突变体，所得到的突变体酶活较野生型漆酶有不同提升，其中，突变体D511E较野生型漆酶的最适温度以及酶活有明显提升并且对于有毒化合物的降解效果有显著改善。本发明进一步提供了突变体的编码基因，含有所述突变体的编码基因的重组表达载体、宿主细胞以及制备重组漆酶突变体的方法。本发明所提供的漆酶突变体降解毒性化合物中具有应用前景。
