本发明提供了热稳定性增加的单链结合蛋白突变体、核苷酸序列及应用,旨在解决现有的单链结合蛋白突变体热稳定性较差的问题。本发明提供了一种热稳定性增加的单链结合蛋白突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的单链结合蛋白突变体具有更好的的热稳定性,与野生型蛋白需保存在﹣20℃条件下不同,本发明的单链结合蛋白突变体可实现常温存储运输。此外,在60‑65℃恒温扩增反应条件下,该突变体蛋白相比野生型具有更好的反应性能。
本发明提供一种纤连蛋白突变体及其应用,涉及生物医药技术领域。所述纤连蛋白突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO .1,且纤连蛋白突变体为选取纤连蛋白与细胞增殖、迁移活性密切相关的结构域,构建纤连蛋白突变体D89,并对纤连蛋白突变体D89的核苷酸进行两步优化来获得本发明克服了现有技术的不足,通过纤连蛋白突变体制备的重组纤连蛋白D89具有良好的促细胞增殖和促细胞迁移的效果,便于后续对相应药物的开发,同时对本领域实验研究提供良好的导向。
本发明公开了聚磷酸盐激酶1突变体及其生产菌的构建与应用,属于基因工程技术领域。本发明对大肠杆菌聚磷酸盐激酶1进行了突变改造处理,将野生型聚磷酸盐激酶1第246位的L突变为P,第247位的M突变为V,获得了聚磷酸盐激酶1突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。与野生型聚磷酸盐激酶1相比,本发明的聚磷酸盐激酶1突变体的酶活、pH适应性和亲水性都有了显著提高。针对聚磷酸盐激酶1突变体,本发明还构建了聚磷酸盐激酶1突变体的生产菌。本发明的生产菌能够特异性外源表达高活性的聚磷酸盐激酶1突变体,极大丰富了聚磷酸盐激酶1突变体的来源。
本发明公开了一种L‑氨基酸脱氢酶突变体及其编码基因、基因工程菌及其在制备L‑草铵膦中的应用,该L‑氨基酸脱氢酶突变体包括:以SEQ ID NO.1所示野生型的L‑氨基酸脱氢酶为模板,第354位的V替换为G所得突变体;第152位的A替换为G所得突变体;第152位和第354位联合突变形成的突变体;第156位的N突变成A与第152位、第354位联合突变形成的突变体。本发明通过分子改造,获得了一类在催化2‑羰基‑4‑(羟甲基膦酰基)丁酸制备L‑草铵膦工艺中具有高酶活的L‑氨基酸脱氢酶突变体,使用全细胞对500mM底物PPO进行转化时,底物转化率在4小时内可以达到99
本发明公开了一种天冬氨酸酶突变体及其应用,所述天冬氨酸酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。利用本发明提供的天冬氨酸酶突变体能够催化制备β‑丙氨酸,本发明构建的天冬氨酸酶突变体的反应温度为15℃~30℃,避免了丙烯酸聚合反应。本发明提供的天冬氨酸酶突变体酶活力为3.28U/mg,与野生型酶活力0.023U/mg相比,酶活提高了143倍。