本发明涉及木聚糖酶AnXyn10C的T32R突变体、编码该突变体的多核苷酸、重组载体、重组菌、制备该突变体的方法及该突变体的用途。其中,通过对氨基酸序列为SEQ ID No.3的木聚糖酶进行T32R突变,获得木聚糖酶AnXyn10C的T32R突变体。与野生型的木聚糖酶AnXyn10C相比,木聚糖酶AnXyn10C的T32R突变体在保持木糖降解活性的同时,表现出良好的热稳定性。
本发明公开了I型普鲁兰酶的突变体酶,突变体酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明还公开了编码所述突变体酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明还公开了突变体酶的制备方法,包括根据I型普鲁兰酶的氨基酸序列进行同源建模,基于序列比对分析和蛋白结构分析,选取突变位点并设计对突变引物对;以携带I型普鲁兰酶基因的载体为模板,分别进行定点突变反应,得到突变质粒;于突变质粒转化工程菌中复制表达对应的突变体酶。本发明的突变体酶具有更优的耐热性能和比酶活。
本发明提供一种亮氨酸脱氢酶突变体的构建及其应用,属于基因工程领域。本发明提供了SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6及SEQ ID NO.8三个亮氨酸脱氢酶突变体,以及上述突变体或产生突变体的基因工程菌在氨化还原α‑酮酸制备光学纯手性L‑α‑氨基酸中的应用。本发明在于:所述亮氨酸脱氢酶突变体或含有突变体基因工程菌氨化还原制备L‑α‑氨基酸具有高催化活性及稳定性,能够合成高光学纯度L‑α‑氨基酸(ee>99%),如突变体酶催化L‑苯甘氨酸的转化速率提高了2.62