本发明公开了一种不受甘油和葡萄糖抑制的可诱导启动子及利用该启动子构建的毕赤酵母表达载体。所述启动子为FDH1基因启动子,所述FDH1基因启动子的序列如SEQ ID NO:1所示。利用FDH1基因启动子驱动外源基因转录的毕赤酵母表达载体包括胞内表达和胞外分泌型表达两种。本发明获得的FDH1基因启动子以及所构建的表达载体可以有效的提高外源蛋白在毕赤酵母中的表达,同时可以满足更多启动子的选择。
本发明涉及生产透明质酸的方法,包括:(a)在有助于生产透明质酸的培养基中培养芽孢杆菌宿主细胞,其中芽孢杆菌细胞包含含有三联启动子的核酸构建体,三联启动子包含具有对应于SEQ ID NO:1的位置590的突变的变体amyL启动子,“-35”区域具有TTGACA序列和“-10”区域具有TATAAT序列的共有启动子和cryIIIA启动子,其中三联启动子的每个启动子序列可操作地与一个或多个涉及透明质酸生物合成的编码序列相连本发明也涉及包含核酸构建体的芽孢杆菌细胞,其中核酸构建体包含(i)含有具有对应于SEQ ID NO:1的位置590的突变的变体amyL启动子,“-35”区域具有TTGACA序列和“-10”区域具有TATAAT序列的共有启动子和cryIIIA启动子的三联启动子,其中三联启动子的每个启动子序列可操作地与该个或多个涉及透明质酸生物合成的编码序列相连。