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[发明专利]一种转基因鱼纯合子的快速鉴定方法及应用-CN201210047803.3无效
发明人：胡炜;朱作言;钟成容;宋焱龙;汪亚平 -专利权人：中国科学院水生生物研究所
申请日： 2012-02-28 - 公布日： 2012-07-04 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种转基因鱼纯合子的快速鉴定方法及应用，其步骤：A：剪取约0.5-1cm2的转基因鱼尾鳍组织，提取DNA；B：采用常规PCR技术检测转植基因阳性；C：采用SYBRGreenreal-timePCR的2−△△Ct方法分析转植基因为阳性的转基因鱼的基因型，比较纯合子和半合子转基因鱼中转植基因整合的相对拷贝数，鉴定和筛选出转基因纯合子，并通过测交试验进一步确证。鉴定和筛选的转基因鱼纯合子对于建立转基因鱼纯系，加快转基因鱼新品种培育进程具有重要意义。
一种转基因纯合子快速鉴定方法应用

[发明专利]制备IGF2b转基因鱼的慢病毒方法-CN201110356210.0无效
发明人：张成锋;董在杰;朱健;邴旭文;苏胜彦 -专利权人：中国水产科学研究院淡水渔业研究中心
申请日： 2011-11-11 - 公布日： 2012-02-29 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公布了一种制备IGF2b转基因鱼的慢病毒方法的方法，其特征在于：通过构建含有靶基因的慢病毒载体来进行转基因鱼的生产，其含有GFP报告基因可用于检测转基因的效果。本发明能够生产慢病毒转基因鱼，转基因鱼的成活率12.2%。
制备 igf2b 转基因病毒方法

[发明专利]带abcb4的转基因斑马鱼系及其建立方法-CN201610531446.6有效
发明人：舒莉萍;何志旭;孙琮杰;胡荣英;金璐;何思佳;吴西军 -专利权人：贵州医科大学
申请日： 2016-07-07 - 公布日： 2019-03-05 - 主分类号： C12N15/89 文献下载
摘要：本发明公开了一种转基因斑马鱼系及其建立方法，该转基因斑马鱼系是以不改变斑马鱼abcb4基因表达为前提，而通过增强型绿色荧光蛋白（EGFP）监测abcb4基因表达变化情况的转基因斑马鱼系。即该转基因斑马鱼系是以abcb4基因启动子来驱动EGFP表达的Tg(abcb4:EGFP)转基因斑马鱼系。本发明建立一个以不改变斑马鱼abcb4基因（同源于人类ABCB1基因）表达为前提，而通过增强型绿色荧光蛋白（EGFP）监测abcb4基因表达变化情况的转基因斑马鱼系。即以abcb4基因启动子来驱动EGFP表达的Tg(abcb4:EGFP)转基因斑马鱼系。为接下来的abcb4基因在多药耐药机制研究提供前期实验基础。
abcb4 转基因斑马及其建立方法

[发明专利]一种表达Cas9基因的转基因斑马鱼及其构建方法和应用-CN201810043624.X在审
发明人：崔恒宓;杨钰;杨哲;戴振清 -专利权人：扬州大学
申请日： 2018-01-17 - 公布日： 2018-07-06 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及一种表达Cas9基因的转基因斑马鱼及其构建方法和应用。所述的表达Cas9基因的转基因斑马鱼，是在斑马鱼Mitfα基因中插入了Cas9基因。本发明利用CRISPR/Cas9转基因技术在色素基因Mitfα定点靶向构建了可表达Cas9基因的转基因斑马鱼，并利用色素消退作为筛选纯合敲除品系的标志。通过使用该转基因斑马鱼对Tyr基因和ZFERV基因进行编辑，证实了该转基因斑马鱼在基因敲除中更加有效，并且在F0代即可获得纯合敲除个体。Cas9转基因斑马鱼与传统的CRISPR/Cas9技术在斑马鱼中的运用相比，具有更高的基因编辑效率；为大规模的基因筛选和疾病模型的建立提供了一个简单有效的工具。
转基因斑马鱼基因构建斑马鱼纯合敲除转基因技术基因敲除基因筛选疾病模型色素基因传统的色素靶向品系应用筛选

[发明专利]一种高效标记斑马鱼PGC的载体及转基因鱼的制备方法和用途-CN201310169181.6无效
发明人：孙永华;熊凤;魏志强;朱作言 -专利权人：中国科学院水生生物研究所
申请日： 2013-05-09 - 公布日： 2013-07-31 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种高效标记斑马鱼PGC的载体及转基因鱼的制备方法和用途。利用Gal4/UAS转录激活系统，以mRFP作为报告基因，实现斑马鱼原始生殖细胞中诱导基因表达调控技术。首先分别构建激活转基因品系Tg(kop:KalTA4)和效应转基因品系Tg(UAS:mRFP)。然后将Tg(kop:KalTA4)雌鱼与Tg(UAS:mRFP)雄鱼杂交就能获得高效标记斑马鱼原始生殖细胞的转基因鱼。这种高效标记斑马鱼原始生殖细胞的转基因鱼在鱼类生物工程具有广泛应用。
一种高效标记斑马 pgc 载体转基因制备方法用途

[发明专利]转基因斑马鱼系在评价药物耐药性上的应用-CN201610530359.9在审
发明人：舒莉萍;何志旭;孙琮杰;胡荣英;金璐;何思佳 -专利权人：贵州医科大学
申请日： 2016-07-07 - 公布日： 2016-08-31 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种转基因斑马鱼系在评价药物耐药性上的应用，该转基因斑马鱼系是以不改变斑马鱼abcb4基因表达为前提，而通过增强型绿色荧光蛋白（EGFP）监测abcb4基因表达变化情况的转基因斑马鱼系。即该转基因斑马鱼系是以abcb4基因启动子来驱动EGFP表达的Tg(abcb4:EGFP)转基因斑马鱼系。本发明建立一个以不改变斑马鱼abcb4基因（同源于人类ABCB1基因）表达为前提，而通过增强型绿色荧光蛋白（EGFP）监测abcb4基因表达变化情况的转基因斑马鱼系。本发明为abcb4基因在多药耐药机制研究提供前期实验基础，以解决抗肿瘤新药在筛选中耐药性评估的问题。
转基因斑马评价药物耐药性应用

[发明专利]可特异性清除T细胞的转基因斑马鱼的制备方法及应用-CN202010756545.0有效
发明人：李崇勇;何明芳;蔡阳 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2020-07-31 - 公布日： 2023-03-03 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了可特异性清除T细胞的转基因斑马鱼的制备方法和应用，其中制备方法包括：将重组质粒pTol2‑lck‑NTR‑mVenus与Tol2转座酶mRNA共同导入野生型斑马鱼胚胎中；以及培养获得稳定遗传的转基因斑马鱼品系，所述稳定遗传的转基因斑马鱼品系即为可特异性清除T细胞的转基因斑马鱼，其中，所述重组质粒pTol2‑lck‑NTR‑mVenus中携带斑马鱼lck基因启动子序列和大肠杆菌NTR基因序列。利用该方法能够有效制备获得在T细胞特异性表达NTR基因且能够稳定遗传的转基因斑马鱼，并且在甲硝唑的作用下，该转基因斑马鱼的少T细胞可以被特异性清除，使其出现免疫功能缺陷，进而，该转基因斑马鱼能够为活体研究免疫细胞发育
特异性清除细胞转基因斑马制备方法应用

[发明专利]新的转基因斑马鱼、基因片段和转基因斑马鱼的生产方法-CN03157925.6无效
发明人：蔡怀桢 -专利权人：邰港科技股份有限公司
申请日： 2003-08-29 - 公布日： 2005-03-09 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明涉及一种生产转基因金色斑马鱼(goldenzebra danio)的重组DNA方法。本发明也涉及用于生产转基因金色斑马鱼的新的基因片段。本发明还涉及新的转基因金色斑马鱼。
转基因斑马基因片段生产方法

[发明专利]产生新荧光鱼的方法及由该方法所产生的新荧光鱼-CN200410039961.X无效
发明人：林学廉;陈盈村 -专利权人：邰港科技股份有限公司
申请日： 2004-03-15 - 公布日： 2005-08-03 - 主分类号： A01K67/027 文献下载
摘要：本发明涉及利用将转基因鱼与具有不同表型或行为模式的鱼进行配种而生产新观赏鱼的方法。所获得的新的转基因鱼具有与任一亲代不同的表型或行为模式。本发明同时提供由此方法生产的新的转基因鱼。
产生荧光方法

[发明专利]可特异性清除髓鞘组织的转基因斑马鱼及其制备方法和应用-CN201410109257.0有效
发明人：魏世辉;李玉皓;方杨武 -专利权人：中国人民解放军总医院;南开大学
申请日： 2014-03-21 - 公布日： 2014-08-06 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了可特异性清除髓鞘组织的转基因斑马鱼及其制备方法和应用，其中制备方法包括：将重组质粒mbp-nfsB-EGFP与Tol2转座酶mRNA共同导入野生型斑马鱼中；以及培养获得稳定遗传的转基因斑马鱼品系，所述稳定遗传的转基因斑马鱼品系即为可特异性清除髓鞘组织的转基因斑马鱼，其中，所述重组质粒mbp-nfsB-EGFP中携带的mbp基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。利用该方法能够有效制备获得可特异性清除髓鞘组织、引起髓鞘脱失且能够稳定遗传的转基因斑马鱼，并且在甲硝唑的作用下，该转基因斑马鱼幼鱼的少突胶质细胞可以被特异性清除，使其出现髓鞘脱失的病理改变，并伴有运动功能下降，进而，该转基因斑马鱼能够为活体研究髓鞘损伤与再生的调控机制，以及相关药物筛选提供有力的动物模型。
特异性清除髓鞘组织转基因斑马及其制备方法应用

[发明专利]一种评价抗虫转基因玉米对斑马鱼饲用安全性的方法-CN201910485145.8在审
发明人：董姗姗;章嫡妮;刘燕;于赐刚;张振华;王长永;郭晓平 -专利权人：生态环境部南京环境科学研究所
申请日： 2019-06-05 - 公布日： 2019-08-02 - 主分类号： C12Q1/26 文献下载
摘要：本发明公开了一种评价抗虫转基因玉米对斑马鱼饲用安全性的方法，通过配制含有抗虫转基因玉米和对照非转基因玉米的人工饲料，喂养斑马鱼98天，调查斑马鱼的各项生长指标、组织病理、脏器组织中的酶活及敏感蛋白mRNA表达水平等参数，从而系统地评估抗虫转基因玉米对斑马鱼的饲用安全性。
斑马鱼转基因玉米抗虫非转基因玉米敏感蛋白人工饲料脏器组织酶活病理配制喂养生长评估调查

[发明专利]利用实时荧光定量PCR技术检测动物制品中转基因三文鱼外源基因成分的检测方法-CN201811230048.6在审
发明人：蔡一村;王强;林颖峥;吕蓉;潘良文 -专利权人：上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心
申请日： 2018-10-22 - 公布日： 2019-01-18 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用实时荧光定量PCR技术检测动物制品中转基因三文鱼外源基因成分的检测方法，包括以下步骤：第一步，以待测样品的DNA为模板，进行荧光定量PCR扩增，获得PCR扩增产物；第二步，检测扩增产物的荧光信号；第三步，以检测结果的Ct值判定样品中是否含有转基因三文鱼外源基因成分；其中，用于PCR扩增的反应体系中含有扩增转基因三文鱼外源基因成分的特异性引物对和转基因三文鱼外源基因成分的特异性探针。本发明的转基因三文鱼外源基因成分的特异性引物对和探针不仅特异性好，而且灵敏度高，为快速准确地检测动物制品中是否含有转基因三文鱼外源基因成分提供了一种定量检测方法，具有较好的应用前景。
外源基因三文鱼转基因动物制品实时荧光定量PCR 特异性引物技术检测扩增检测检测扩增产物荧光定量PCR 特异性探针待测样品定量检测检测结果荧光信号灵敏度探针判定应用

[发明专利]一种用于检测水体有机污染物的转基因斑马鱼的培育方法-CN202210061378.7在审
发明人：谢少林;杨冰;李思颖;邹记兴;周爱国;冯永永 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2022-01-19 - 公布日： 2022-05-31 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于检测水体有机污染物的转基因斑马鱼的培育方法。本发明使用表达食蚊鱼cyp1a基因启动子、同时表达绿色荧光蛋白和荧光素酶的质粒和无体色斑马鱼制备得到转基因斑马鱼。在实际的水质监测工作中，本领域技术人员既可通过直接观测转基因斑马鱼的荧光来定性评估水体有机物的污染情况，又可通过测定转基因斑马鱼的荧光素酶的活性对水体中的污染物进行定量分析。
一种用于检测水体有机污染物转基因斑马培育方法

[发明专利]培育转基因斑马鱼的方法及其专用质粒-CN200310100450.X无效
发明人：孟安明;苏颖;赵知行;黄慧哲 -专利权人：清华大学
申请日： 2003-10-16 - 公布日： 2005-04-20 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明公开了一种培育转基因斑马鱼的方法及其专用质粒，本发明培育转基因斑马鱼的方法，包括以下步骤：(1)构建apoaequorin重组表达载体，所述apoaequorin重组表达载体包含apoaequorin编码基因、斑马鱼的actin调控序列和由非洲爪蟾EF－1α基因调控序列引导的GFP表达框；(2)用步骤(1)中的重组表达载体转化斑马鱼受精卵，得到F0代；(3)将F0代与野生型的斑马鱼交配，得到可表达apoaequorin的转基因斑马鱼。本发明的apoaequorin转基因斑马鱼将在生物发育研究、斑马鱼活体钙像研究等方面中起到重要的作用，具有重要的理论意义和实际意义。
培育转基因斑马方法及其专用质粒

[发明专利]一种培育转基因斑马鱼的方法及其专用质粒-CN200310100452.9无效
发明人：孟安明;赵知行;苏颖;黄慧哲 -专利权人：清华大学
申请日： 2003-10-16 - 公布日： 2005-04-20 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明公开了一种培育转基因斑马鱼的方法及其专用质粒，本发明提供的培育apoaequorin转基因斑马鱼的方法，包括以下步骤：(1)构建apoaequorin重组表达载体，所述apoaequorin重组表达载体包含apoaequorin编码基因、斑马鱼的GATA2调控序列和由非洲爪蟾EF－1α基因调控序列引导的GFP表达框；(2)用步骤(1)中的重组表达载体转化斑马鱼受精卵，得到F0代；(3)将F0代与野生型的斑马鱼交配，得到可表达apoaequorin的转基因斑马鱼。本发明的apoaequorin转基因斑马鱼将在生物发育研究、斑马鱼活体钙像研究等方面中起到重要的作用，具有重要的理论意义和实际意义。
一种培育转基因斑马方法及其专用质粒

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