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[发明专利]一种双核苷酸条码报告基因分析系统、分析方法及应用-CN202011313576.5有效
发明人：黄启来;任乃霞;李博;刘晴晴 -专利权人：山东大学;山东刀火基因科技有限公司
申请日： 2020-11-20 - 公布日： 2022-03-29 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明具体涉及一种双核苷酸条码报告基因分析系统、分析方法及应用。现有高通量报告基因分析方法中，核苷酸标签具有偏好性，影响检测准确性。本发明提供了一种新型的双核苷酸报告基因分析系统，该系统使用双核苷酸作为标签，能够在大大降低偏好性的同时实现高通量报告基因分析。同时，DiR系统还能通过定量PCR的方法，结合标签特异性的引物，在常规通量水平对单个标签的表达进行定量，与传统荧光素酶报告基因分析系统相比，具有更高的灵敏度和稳定性。本发明通过所述分析系统对前列腺癌风险SNP位点的基因调控功能进行了分析，经筛选确定了多个功能调控位点。该DiR报告基因分析系统在基因调控活性分析，尤其是疾病风险相关基因变异位点的功能研究方面拥有巨大的潜力。
一种核苷酸条码报告基因分析系统方法应用

[发明专利]评估USH2A外显子13剔除效率的MINI-REP基因及其表达载体和应用-CN202110884031.8在审
发明人：梁峻彬;欧家裕;徐辉 -专利权人：广州瑞风生物科技有限公司
申请日： 2021-08-03 - 公布日： 2023-02-17 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明涉及评估USH2A外显子13剔除效率的MINI‑REP基因及其表达载体和应用，涉及基因工程技术领域。该MINI‑REP基因包括报告基因和小基因，所述报告基因为行使报告功能的基因，所述小基因包括依次连接的USH2A内含子12、外显子13和内含子13的基因；所述小基因插入所述报告基因，将所述报告基因分割成断裂报告基因，所述断裂报告基因单独表达均不发挥报告功能，串联完整表达则发挥报告功能。所述MINI‑REP基因可应用于现有技术中所有用于诱导USH2A外显子13剔除的相关技术的效率评估，可用于新型技术的研发、效果检测盒高效筛选，可用于USH2A外显子13剔除效率的快速、直观、高效、高灵敏度的定性和定量分析
评估 ush2a 外显子 13 剔除效率 mini rep 基因及其表达载体应用

[发明专利]GLP1R报告基因稳转细胞株、构建方法、应用-CN202011512406.X在审
发明人：黄启宽;朱国振;余跃云 -专利权人：上海精翰生物科技有限公司
申请日： 2020-12-19 - 公布日： 2021-03-23 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本申请涉及生物制药技术领域，具体公开了GLP1R报告基因稳转细胞株、构建方法、应用。GLP1R报告基因稳转细胞株为2020年11月18日保藏于武汉大学的中国典型培养物保藏中心的GLP1R报告基因稳转的人胚肾293T细胞DG1‑6，保藏编号为CCTCC No.C2020221；所述GLP1R报告基因稳转细胞株包括有GLP1R受体基因表达体系以及报告基因表达体系，所述报告基因表达体系包括CREB结合区域、minipromoter以及报告基因。GLP1R报告基因稳转细胞株的构建方法，包括以下步骤：S1、转染CREB报告基因质粒；S2、转染GLP1R表达质粒；S3、细胞株筛选。本申请的GLP1R报告基因稳转细胞株应用于GLP1R激动剂或者拮抗剂生物学活性测定、GLP1R激动剂或者拮抗剂定量生物分析检测、GLP1R激动剂或者拮抗剂的中和抗体检测。
glp1r 报告基因细胞株构建方法应用

[发明专利]用于体外筛选引起基因沉默药物的报告基因组、试剂盒及其应用-CN202210664175.7在审
发明人：白秀峰;傅新元 -专利权人：四川大学华西医院
申请日： 2022-06-14 - 公布日： 2022-08-19 - 主分类号： C12N15/65 文献下载
摘要：本发明公开用于体外筛选引起基因沉默药物的报告基因组、试剂盒及其应用，属于采用生物技术进行药物筛选技术领域。基于NGD过程，以及现有基因药物研发现状，将药物引起的NGD现象，构建一种报告基因组，其中，报告基因组包括：报告基因1：依次连接的泛素和报告基因A；报告基因2：依次连接的泛素、报告基因B、IRES和待降解蛋白编码区；报告基因A为荧光素酶基因、荧光蛋白基因或有色蛋白基因，报告基因B为荧光素酶基因、荧光蛋白基因或有色蛋白基因，报告基因A≠报告基因B。可实现体外筛选引起基因沉默的药物，最终达到治疗疾病的目的。
用于体外筛选引起基因沉默药物报告基因组试剂盒及其应用

[发明专利]CRY报告基因载体的构建方法及其应用-CN201410126537.2有效
发明人：张传茂;张博言 -专利权人：北京大学
申请日： 2014-03-31 - 公布日： 2014-07-23 - 主分类号： C12N15/65 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程领域，具体提供了一种CRY报告基因载体的构建方法及其应用。其是将Rabin8蛋白中与Rab8特异性结合的氨基酸序列RBD（如SEQ ID No.1所示）依次连入真核表达载体pECFP和pEYFP，构成CFP-RBD-YFP序列，得到报告基因载体CRY。本发明利用报告基因载体CRY的报告基因所编码的蛋白定位及识别Rab8^GDP，并对细胞内游离状态的Rab8^GDP进行半定量分析和定位分析，从而特异性追踪细胞内Rab8
cry 报告基因载体构建方法及其应用

[发明专利]一种病毒报告基因及其在抗SARS-CoV-2药物筛选中的用途-CN202010606598.4在审
发明人：白秀峰;傅新元 -专利权人：四川大学华西医院
申请日： 2020-06-29 - 公布日： 2022-01-14 - 主分类号： C12N15/65 文献下载
摘要：本发明公开了一种病毒报告基因，属于抗病毒效果检测领域。本发明的病毒报告基因，包括依次连接的报告基因A、‑1 PRF元件、报告基因B，‑1 PRF元件、报告基因B之间存在终止密码子序列。将该病毒报告基因用于体外抗SARS‑CoV‑2药物筛选时，若病毒被药物抑制时，其‑1 Frameshift效率会受到影响，进而报告基因B相对于报告基因A的表达会受到影响，进而可以根据两报告基因的信号相对强弱来反映病毒受抑制的情况本发明的病毒报告基因是全新的病毒报告基因，相比观察细胞病变更为省时，对于推进新型冠状病毒新药开发进程具有重要意义。
一种病毒报告基因及其 sars cov 药物筛选中的用途

[发明专利]一种非同源末端连接检测系统及其应用-CN202110294667.7有效
发明人：李帅;郭晓静;王怡;赵雁杰 -专利权人：天津市肿瘤医院（天津医科大学肿瘤医院）
申请日： 2021-03-19 - 公布日： 2022-02-11 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明提供了一种非同源末端连接检测系统，包括基于CRISPR系统的报告基因体系和报告基因检测体系，所述基于CRISPR系统的报告基因体系包括荧光素酶报告基因突变序列，所述荧光素酶报告基因突变序列使荧光素酶报告基因处于关闭状态；利用CRISPR系统在所述荧光素酶报告基因突变位点引入DNA双链断裂，经非同源末端连接使所述荧光素酶报告基因突变序列修复，荧光素酶报告基因读码框恢复正常，使荧光素酶报告基因打开。
一种同源末端连接检测系统及其应用

[发明专利]包含UTR的双荧光报告基因系统、鉴定sRNA-UTR相互作用的方法-CN201910114652.0在审
发明人：杨世辉;杨永富;李闰霞;马立新 -专利权人：湖北大学
申请日： 2019-02-14 - 公布日： 2019-05-21 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明属于生物信息学和基因工程技术领域，公开了一种包含UTR的双荧光报告基因系统、鉴定sRNA‑UTR相互作用的方法，确定5’UTR序列；获取靶UTR序列；获取双荧光报告基因系统骨架；构建含UTR的双荧光报告基因系统；将质粒电转到野生型运动发酵单胞菌及对应sRNA敲除或过表达菌株中，通过PCR及测序确定最终菌株；用流式细胞术分析相互作用关系，进行荧光强度定量分析。本发明操作十分简单；能快速确定sRNA与靶UTR之间是否存在相互作用关系，便于批量操作利用的双荧光报告基因系统可用于定量分析相互作用的强度，也可以移植到除运动发酵单胞菌以外其他物种中使用。
荧光报告基因运动发酵单胞菌定量分析流式细胞术分析基因工程技术生物信息学表达菌株快速确定批量操作野生型荧光测序电转构建菌株可用敲除质粒物种移植

[发明专利]一种CSF-1R报告基因细胞株及其制备方法和应用-CN201910859898.0在审
发明人：甄滢滢;李文英;殷伟;邵喆;黄应峰 -专利权人：宝船生物医药科技(上海)有限公司;白帆生物科技(上海)有限公司
申请日： 2019-09-11 - 公布日： 2019-11-26 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明提供了一种CSF‑1R报告基因细胞株及其构建方法和应用，所述报告基因细胞株包括NFκB报告基因质粒；所述NFκB报告基因质粒上包括荧光素酶报告基因；所述报告基因细胞株还包括CSF‑1R表达质粒。本发明的报告基因细胞株，在细胞膜上表达人源CSF‑1R，胞内表达响应NFκB信号的荧光素酶，CSF‑1/IL‑34能够剂量依赖地特异性激活报告基因细胞株的荧光素酶的表达，同时靶向CSF‑1R的抗体药物能够阻断CSF‑1/IL‑34与报告基因细胞株表面CSF‑1R的结合，在抗体药物活性检测中具有重要应用。
报告基因细胞株报告基因质粒抗体药物荧光素酶荧光素酶报告基因细胞膜特异性激活胞内表达表达质粒活性检测剂量依赖重要应用靶向构建人源响应应用

[发明专利]一种用于启动子分析的慢病毒T载体及其构建方法和应用-CN201110419778.2有效
发明人：潘建治;于福先;朱志伟;陈晓宇;黄菁 -专利权人：浙江省农业科学院
申请日： 2011-12-15 - 公布日： 2012-06-27 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：一种用于启动子分析的慢病毒T载体及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。该T载体基于慢病毒穿梭载体设计而成，将荧光素酶报告基因与绿色荧光蛋白报告基因通过内部核糖体进入位点相连接，可在同一顺反子中，表达两种不同的报告基因。该构建方法包括从慢病毒穿梭载体CSⅡ-EF-MCS-IRES2-Venus，使用AgeⅠ进行酶切，去除本身的EF启动子序列，加入荧光素酶报告基因及酶切位点NheⅠ、SwaⅠ和BamHⅠ，使用SwaⅠ酶切后该载体可直接通过TA克隆策略将基因5’调控区PCR扩增产物连接入载体中，进行启动子的活性分析，具有操作简单、制备成本低等特点。
一种用于启动子分析病毒载体及其构建方法应用

[发明专利]链置换聚合酶链反应-CN200810117606.8无效
发明人：江洪;江必胜;张辉 -专利权人：北京泰格瑞分子检验有限公司
申请日： 2008-08-01 - 公布日： 2010-02-03 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种“链置换聚合酶链反应”，其特征在于将待测靶基因链置换成带探针的序列不同的报告基因链间接扩增，所述探针序列为选择靶基因相邻的两小段保守或特异序列作为双探针的互补序列，所述序列不同的报告基因链指与靶基因链同源最小，或种系较远的基因序列，其首尾加上预设的双探针序列作为线性带探针报告基因。待测靶基因与报告基因预设的首尾探针序列互补杂交，从而线性报告基因首尾靠近衔接，杂交体单链缺口被连接酶连接，靶链置换为报告基因环，反向PCR扩增报告基因环。通过监测反向PCR扩增的不同大小(两端)或带不同编码的报告基因，就可间接指示多重靶分子。一套以上的报告基因可以轮换使用。
置换聚合反应

[发明专利]双报告基因骨架载体、四质粒假病毒包装系统、包装新冠肺炎假病毒-CN202010191574.7有效
发明人：吴飞;秦晓峰;韦治明;杜晓红;杨仁祥 -专利权人：睿丰康生物医药科技（浙江）有限公司
申请日： 2020-03-18 - 公布日： 2022-03-08 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：双报告基因骨架载体，包括双报告基因骨架载体，其双报告基因选自荧光素酶和荧光蛋白，荧光蛋白报告基因优选mGFP基因，荧光素酶报告基因优选Fluc基因；双报告基因四质粒假病毒包装系统包括双报告基因骨架载体以及分别整合慢病毒gag‑pol基因、慢病毒rev基因以及含有目的病毒的包膜蛋白基因的3种真核表达包装质粒；包装新冠肺炎假病毒包括双报告基因四质粒假病毒包装系统、宿主细胞，所述宿主细胞优选自293T‑hACE2细胞。
报告基因骨架载体质粒病毒包装系统肺炎

[发明专利]GIPR报告基因稳转细胞株构建和应用-CN202111358444.9在审
发明人：黄启宽;朱国振;余跃云;杨雨生 -专利权人：宁波熙宁检测技术有限公司;上海精翰生物科技有限公司
申请日： 2021-11-16 - 公布日： 2022-03-25 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了GIPR报告基因稳转细胞株构建，使用CRE报告基因质粒转染293T细胞，通过加入真核抗生素筛选和单克隆挑选，经过功能学评价，挑选得到合适的CRE报告基因稳转细胞株单克隆；使用GIPR慢病毒感染含CRE报告基因稳转细胞株单克隆细胞，通过加入真核抗生素筛选和单克隆挑选，经过功能学评价得到合适的GIPR报告基因稳转细胞株。本申请利用该细胞株开发出不限于GIPR激动剂类药物的生物活性测定方法，生物分析定量方法和中和抗体测定方法。
gipr 报告基因细胞株构建应用

[发明专利]调节胰岛再生基因相关蛋白表达的因子的检测分析法-CN03802145.5无效
发明人： D·泰勒－费希维克;A·I·维尼克 -专利权人： GMP内治疗学股份有限公司
申请日： 2003-01-10 - 公布日： 2005-05-11 - 主分类号： A61K38/24 文献下载
摘要：报告基因包含哺乳动物的INGAP 5′端调控区或其片段、哺乳动物INGAP的启动子元件或异源启动子以及报告基因。所述报告基因可用作试剂的筛选，这些试剂以单独或组合方式上调或下调报告基因表达。可供选择地，可将报告基因用作与仓鼠INGAP 5′端调控区或序列结合的试剂的筛选。
调节胰岛再生基因相关蛋白表达因子检测分析

[发明专利]一种报告基因重组在染色体目的基因上的方法、位点及用途-CN201310327687.5无效
发明人：赵营;翟德胜;武俊芳;宋向凤;许重洁;赵德安;李嵩箕;谷争;袁会峰;赵繁荣;王小引 -专利权人：新乡医学院
申请日： 2013-07-31 - 公布日： 2014-01-01 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供了一种建立报告基因重组在染色体目的基因上的方法，重组位点是目的基因的最后一个外显子的终止密码子后，把IRES-报告基因重组在目的基因的最后一个外显子的终止密码子后。重组后，目的基因和报告基因一起转录成融合的mRNA，目的基因mRNA各外显子剪接正确，并分别翻译成报告基因蛋白和目的基因蛋白，报告基因蛋白可以定时检测，通过报告基因的表达变化反映目的基因表达调控。该重组方法为目的基因的表达调控研究提供完全天然染色体环境。
一种报告基因重组染色体目的方法用途

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