本发明公开了一种甘蓝型油菜BnGLABRA2启动子及制备方法和应用,其步骤是:A、基因组步移克隆启动子序列:利用SDS裂解法提取基因组DNA,进行基因组步移,每次步移扩增两轮PCR克隆油菜。B、启动子序列生物信息学分析:将所克隆序列用BLASTN进行同源比对。启动子核心元件和上游顺式作用元件用启动子预测软件,得到启动子序列和上游启动子元件;C、全长启动子、缺失启动子的扩增以及pMD18-T-GP载体的构建:以基因组DNA为模板,根据前期得到的启动子序列,设计扩增各缺失片段的引物进行一种甘蓝型油菜BnGL2基因全长启动子SEQ ID NO:1在叶片表皮毛、种子、根部、整个叶脉、中柱叶脉中的应用,操作简单,结果稳定可靠。具有生物安全性和开发应用价值。
本发明公开了一种紫花苜蓿MsNAP基因启动子及其应用,涉及生物技术领域中的豆科牧草。紫花苜蓿MsNAP基因启动子,其序列含有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列;其特异性引物包括:SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3;其表达载体为双酶切切除35S启动子后连接MsNAP的启动子序列的紫花苜蓿MsNAP基因启动子的应用是紫花苜蓿MsNAP的启动子序列或所述表达载体在调控植物的基因表达中的应用。本发明提供了MsNAP基因的启动子序列,并通过转基因技术对其功能进行验证,结果表明MsNAP启动子在衰老叶片中活性较强;为进一步探索调控紫花苜蓿衰老基因的表达,调控紫花苜蓿衰老奠定了基础。
本发明涉及马铃薯pinⅡ基因启动子及其应用,该启动子的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,或该序列经取代、缺失和/或添加一个或几个核苷酸且同等功能的由其衍生的核苷酸序列。本发明从克隆马铃薯pinⅡ基因启动子入手,通过对马铃薯pinⅡ基因启动子结构和序列的分析,验证了马铃薯pinⅡ基因启动子的功能。将本发明的启动子构建成GUS融合表达载体,转化烟草和拟南芥。GUS组织化学染色和GUS酶活性测定结果均表明,本发明提供的启动子能启动GUS基因的表达,具有强启动子活性,为植物抗逆基因工程研究提供了新的启动子元件,也为下一步植物遗传改良和产业化研究奠定了基础。
本发明涉及盐芥COR15a基因启动子及其应用,该启动子具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,或该序列经取代、缺失和/或添加一个或几个核苷酸且同等功能的由其衍生的核苷酸序列。本发明特别涉及该启动子序列中的2个低温应答特异性元件C-repeat/DRE。本发明从克隆盐芥COR15a基因启动子入手,通过对盐芥COR15a基因启动子结构和功能序列的分析,验证了盐芥COR15a基因启动子的低温诱导性。从盐芥中获得的该低温诱导型启动子,为植物抗逆基因工程研究提供了新的逆境胁迫诱导型启动子元件,也为下一步植物抗冻转基因研究奠定基础。