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[发明专利]使用高通量测序技术对复杂基因组测序的改良策略-CN200680030607.8无效
发明人： M·J·T·范艾克;A·P·索兰森;R·C·J·霍格斯 -专利权人：科因股份有限公司
申请日： 2006-06-23 - 公布日： 2008-10-01 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：测定基因组序列的一种方法，其包含下述步骤：使用至少一个第一限制性核酸内切酶消化基因组，把至少一个接头连接到第一亚集的限制性片段上，使用第一引物组合选择性扩增接头连接的限制性片段的第一集合，其中第一引物在引物序列的3′末端含有具有1－10个选择性核苷酸的第一选择的序列，使用至少第二引物组合重复这些步骤，其中第二引物组合的引物含有不同的第二选择性序列，片段化扩增的接头连接的限制性片段的每一个亚集以产生测序库并确定片段的核苷酸序列，比对每个库中的片段序列以产生连接片段，对于第二和/或进一步的限制性核酸内切酶重复这些步骤，比对从每个第二和/或进一步的限制性核酸内切酶所获得的重叠群以提供基因组的序列。
使用通量技术复杂基因组改良策略

[发明专利]一种一次分离多个已知序列DNA片段的未知侧翼序列的方法-CN201811171982.5有效
发明人：常玉晓;刘可;赵胜;张会;汪泉 -专利权人：中国农业科学院深圳农业基因组研究所
申请日： 2018-10-09 - 公布日： 2022-05-27 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开了一种一次分离多个已知序列DNA片段的未知侧翼序列的方法。该方法巧妙利用了Tn5转座酶复合体可以在打断DNA的同时，将DNA接头连接到打断的DNA片段上的特性，理论上，基因组DNA只要能够被打断，其断点处都会被连接上DNA接头，连接DNA接头的效率近乎100%，远远高于反向PCR、接头PCR、TAIL‑PCR等同类技术，结合第二代高通量测序技术，可以同时分离一个样品中多个已知序列DNA片段的侧翼序列，而且可以从其左右两侧同时进行。对同一个已知序列DNA片段，同时从左右两端分离其侧翼序列，可以提高侧翼序列的分离效率，如果能够同时分离到其左右两侧的侧翼序列，它们可以互相验证，提高准确度。
一种一次分离已知序列 dna 片段未知侧翼方法

[发明专利]电场作用下用微孔阵列固液相捕获单分子模板DNA的方法-CN201210175408.3无效
发明人：杨楠;艾洪新;臧伯玮;何越 -专利权人：凯晶生物科技(苏州)有限公司
申请日： 2012-05-31 - 公布日： 2013-12-18 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种电场作用下用微孔阵列固液相捕获单分子模板的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：（1）构建具有微孔阵列的DNA电化学传感器，所述微孔阵列的微孔侧壁上的SiO2绝缘层通过羧基偶联固定P1接头DNA片段；（2）在模板DNA的单链末端连接有与P1接头DNA片段互补配对的P1接头互补DNA片段，对模板DNA进行PCR扩增；（3）通过电场作用使PCR扩增后的模板DNA进入微孔中与固定在微孔阵列的侧壁上P1接头DNA片段进行互补配对连接，完成单分子模板DNA的捕获。
电场作用微孔阵列固液相捕获分子模板 dna 方法

[发明专利]一种基于液相探针捕获的Y染色体测序方法-CN202011530843.4在审
发明人：文少卿;王凌翔;徐旭鼎;雷波 -专利权人：广州深晓基因科技有限公司
申请日： 2020-12-22 - 公布日： 2021-03-19 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：一种基于液相探针捕获的Y染色体测序方法，包括如下步骤：S1.提取基因组DNA并片段化；S2.对片段化的DNA进行末端修复；S3.在DNA片段两端加上测序接头并纯化连接产物；S4.PCR扩增连有接头的片段DNA进行文库扩增并纯化；S5.文库质量控制；S6.探针区域的挑选及优化，并设计局部密集式探针；S7.将DNA文库和探针进行文库杂交反应，捕获目标DNA片段；S8.将捕获的目标DNA片段进行分离；S9.对分离后的目标DNA片段进行高通量测序。
一种基于探针捕获染色体方法

[发明专利]一种DNA二代测序文库的构建方法-CN202110981921.0在审
发明人：梁志坤;蒋析文;温慧敏;吴轶兰 -专利权人：广州达安基因股份有限公司
申请日： 2021-08-25 - 公布日： 2021-10-19 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种DNA二代测序文库的构建方法，包括步骤：基因组DNA的酶切、末端修复和加A；DNA片段接头连接；接头连接后产物的磁珠纯化处理；DNA片段PCR扩增、PCR产物片段的选择与纯化处理。本发明提供的DNA二代测序文库构建方法，以双酶切和末端修复一步反应工艺，使用VVN和T7将片段进行片段化处理，再利用Taq DNA聚合酶的聚合作用将5’突出补平，然后再3’加上A(腺嘌呤)，整合一步反应的实现构建DNA二代测序文库，第一步反应结束无需进行磁珠纯化，使得构建工艺简单；该工艺制备中，两种限制性内切酶没有偏好性，可实现目标片段测序。
一种 dna 二代序文构建方法

[发明专利]基因组预定区域核酸测序文库的构建方法及装置-CN201410594702.7有效
发明人：陈晓丽;何诗阳;方东明;王晓雯;王勇斯;原辉 -专利权人：深圳华大基因科技有限公司
申请日： 2014-10-29 - 公布日： 2019-08-09 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开了基因组预定区域核酸测序文库的构建方法及装置，其中该方法包括：将基因组DNA进行片段化处理；将DNA片段进行片段选择；将经过片段选择的DNA片段依次进行去磷酸化、第一末端修复、与第一测序接头相连；利用探针对第一连接产物进行筛选；将目的片段依次进行双链环化处理、酶切处理；将酶切产物依次进行第二末端修复、第二测序接头相连和DNA双链分离处理，以便获得单链DNA，所述单链DNA构成所述基因组预定区域测序文库
基因组预定区域核酸序文构建方法装置

[发明专利]一种DNA高通量测序建库方法-CN201610031221.4有效
发明人：郑洪坤;刘慧;宋军;曹振龙 -专利权人：北京百迈客生物科技有限公司
申请日： 2016-01-18 - 公布日： 2018-11-27 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明提供了一种适用于复杂环境中生物DNA的高通量测序建库方法，包括以下步骤：(1)对待测生物的基因组DNA进行片段化处理，获得DNA片段化物料；(2)对所述DNA片段化物料进行琼脂糖凝胶电泳获得电泳胶块，切取所述电泳胶块中文库目的大小的片段至比所述文库目的大小的片段大40‑60bp的片段范围内的凝胶，回收凝胶内的DNA获得第一纯化DNA；(3)对所述第一纯化DNA进行末端修复，3`末端加A，连接接头序列获得连接产物本发明方法操作简单，能够解决复杂环境中生物DNA(如：海带DNA、贝类DNA、石榴DNA等)建库困难的问题，且能够降低接头使用量，为高通量测序提供一种疑难样品的建库方案。
建库高通量测序复杂环境连接产物生物DNA 电泳胶凝胶文库琼脂糖凝胶电泳基因组DNA 连接接头末端修复贝类DNA 片段化切取石榴海带回收中文

[发明专利]HPV 精确分型的生物信息学分析的方法及系统-CN201080070484.7有效
发明人：刘智盛;田仕林;潘荣 -专利权人：深圳华大基因健康科技有限公司
申请日： 2010-12-02 - 公布日： 2013-08-21 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开一种HPV精确分型的生物信息学分析的方法及系统，该方法包括：接收高通量测序技术得到的测序片段；将测序片段中的样本接头序列与样本接头序列库进行比对，实现分样本操作；将测序片段与参考基因组序列进行比对，对比对后的序列进行筛选，确定筛选后的序列片段的HPV型别或阴性；对确定型别的序列片段按样本进行合并，并根据合并后支持对应型别的序列片段数量和比例进行筛选；最终确认每个样本的HPV型别或者确定为阴性。
hpv 精确生物信息学分析方法系统

[发明专利]微量DNA甲基化高通量测序方法-CN201980092829.X在审
发明人：杨林;张艳艳;陈恬;杨贵芳;陈芳;蒋慧 -专利权人：深圳华大智造科技股份有限公司
申请日： 2019-05-21 - 公布日： 2021-10-08 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明提供的方法，依次包括如下步骤：(1)将双链DNA片段连接接头1，得到连接产物；接头1由两条单链DNA分子组成，命名为单链1‑1和单链1‑2；连接产物中，双链DNA片段的每条链的3’末端与单链1‑1的5’末端连接，双链DNA片段的每条链的5’末端与单链1‑2的3’末端相邻但不连接；(2)进行亚硫酸盐处理；(3)采用通用引物1进行DNA复制；(4)3’末端连接测序接头。
微量 dna 甲基化通量方法

[发明专利]用于构建检测染色体拷贝数变异的测序文库的方法和试剂盒-CN202210143977.3在审
发明人：侯丽敏;陈迪;张建光;张丽 -专利权人：北京贝瑞和康生物技术有限公司
申请日： 2022-02-17 - 公布日： 2022-03-18 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：所述方法包括以下步骤：1）提供基因组DNA或RNA/DNA杂合双链样品；2）向上述样品中加入核酸内切酶和DNA聚合酶，利用切口平移原理将DNA双链或RNA/DNA杂合双链随机打断得到DNA片段并在片段末端加A，以得到加A后的DNA片段；3）将所述加A后的DNA片段与测序接头连接获得连接产物；4）纯化所述连接产物，获得测序文库。所述试剂盒包括：1）随机打切口并进行切口平移和末端加A的试剂；2）将所述加A后的DNA片段与测序接头连接的试剂；和3）用于纯化所述连接产物的试剂。
用于构建检测染色体拷贝变异序文方法试剂盒

[发明专利]FFPE样本建库的方法及其应用-CN202110506226.9在审
发明人：胡玉刚;汪彪;郑文莉;吴强 -专利权人：纳昂达（南京）生物科技有限公司
申请日： 2021-05-10 - 公布日： 2021-06-22 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：该方法包括：通过利用内切酶进行酶切片段化，对片段化DNA依次进行末端修复加A及接头连接，对连上接头的DNA片段进行PCR扩增，得到测序文库，其中内切酶具有如下功能：a)在DNA缺口处切割；b)保留双链末端突出碱基部分由于FFPE在固定的过程中和固定之前都有带来降级和部分碱基的脱落，该方法充分利用FFPE的本身的缺口问题，能够在缺口处断裂DNA片段的酶打断DNA后结合正常的补平加A、连接接头和PCR扩增的方式进行建库
ffpe 样本方法及其应用

[发明专利]DNA5-甲基胞嘧啶与5-羟甲基胞嘧啶基因图谱测序方法-CN201610119096.2有效
发明人：陆星宇;宋艳群 -专利权人：上海易毕恩基因科技有限公司;上海易毕恩生物技术有限公司
申请日： 2016-03-02 - 公布日： 2018-06-29 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明提供一种DNA5‑甲基胞嘧啶与5‑羟甲基胞嘧啶基因图谱测序方法，包括以下步骤：(1)DNA的提纯与片段化预处理：将目的DNA提取后将其打断至平均50个核苷酸长度到10000个核苷酸长度的片段；(2)微量DNA的修复与接头引物连接：将预处理的DNA片段修复并与二代测序需要的测序接头引物连接；(3)共价标记5‑甲基胞嘧啶与5‑羟甲基胞嘧啶；(4)固相富集含有标记的5位修饰胞嘧啶的DNA片段，在固相上，用对应接头引物的PCR扩增引物进行扩增。
测序胞嘧啶甲基胞嘧啶接头引物预处理基因图谱核苷酸羟甲基修饰修复共价标记固相表面微量DNA 基因组片段化提纯富集碱基扩增打断图谱

[发明专利]包含抗人MUC1抗体Fab片段、肽接头和/或配体的复合物-CN201980032860.4在审
发明人：浅野亨;佐野赖方;森中绍文;白井宏树;平山和德;赤岩路则;山田弘美;白石宜之 -专利权人：安斯泰来制药株式会社
申请日： 2019-05-17 - 公布日： 2020-12-25 - 主分类号： C07K16/28 文献下载
摘要：本发明提供包含抗人MUC1抗体Fab片段、肽接头和/或配体的复合物、包含所述复合物的诊断用组合物和/或药物组合物、以及使用该复合物对癌症进行诊断和/或治疗的方法等。使用借助肽接头等使抗人MUC1抗体Fab片段与配体结合而得到的复合物。
包含 muc1 抗体 fab 片段接头复合物

[发明专利]DNA测序文库的制备方法及试剂盒-CN202110510000.6在审
发明人：贺晓燕;吴珍芳;谈成;陈丽;吴丹 -专利权人：温氏食品集团股份有限公司
申请日： 2021-05-11 - 公布日： 2021-10-01 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明提供一种适用于华大智造MGISeq二代测序平台的DNA测序文库的制备方法及试剂盒，包括以下步骤：提供Tn5转座酶、第一接头和至少两种第二接头；将各第二接头分别与第一接头混合得到至少两种接头试剂，然后将各接头试剂分别与Tn5转座酶进行包埋，得到至少两种转座酶复合体试剂；将各转座酶复合体试剂分别与不同DNA样品混合进行片段化反应，然后将不同DNA样品的片段化产物混合，进行切口修复，并利用DNA磁珠分选纯化DNA片段化产物
dna 序文制备方法试剂盒

[发明专利]基于高通量测序的DNA甲基化检测方法-CN201910639369.X在审
发明人：施小龙;唐超;吴永忠;王颖;綦俊 -专利权人：重庆大学附属肿瘤医院
申请日： 2019-07-18 - 公布日： 2019-10-08 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明公开一种基于高通量测序的DNA甲基化检测方法，通过用亚硫酸氢盐处理DNA片段，通过末端转移酶延伸单链DNA片段的3’末端引入核苷酸同聚物序列，通过与核苷酸同聚物序列互补的引物延伸产生双链并引入测序公共接头序列，通过5’端生物素修饰将延伸的序列结合到链霉亲合素包被的磁珠上以及第二次3’末端引入核苷酸同聚物序列，通过第二条带有公共接头序列的引物延伸引入第二公共接头序列，通过用公共PCR引物扩增延伸的DNA产物制备出基因组甲基化特异的DNA测序文库，然后对DNA测序文库进行测序确定DNA片段的序列。本发明具有高通量、高特异性、高灵敏度的优点，能很好地适用于片段化的血液游离DNA和石蜡包埋组织DNA，尤其是短片段DNA的甲基化检测。
公共接头核苷酸同聚物引入高通量测序测序文库引物延伸测序延伸亚硫酸氢盐处理基因组甲基化石蜡包埋组织单链DNA片段甲基化检测链霉亲合素末端转移酶生物素修饰短片段DNA 高灵敏度序列互补游离DNA 高通量片段化包被磁珠扩增双链制备血液