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[发明专利]一种DNA文库构建方法-CN201910874485.X有效
发明人：不公告发明人 -专利权人：北京博昊云天科技有限公司
申请日： 2019-09-17 - 公布日： 2022-09-30 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明提供了一种DNA文库构建方法，该方法包括如下步骤：(1)将DNA片段5’末端去磷酸化；(2)提供接头混合物，所述接头混合物包括平末端接头和带有不同长度粘末端的接头；(3)使所述接头混合物中接头的5’末端与去磷酸化的DNA片段3’末端连接；(4)通过切口平移法使接头混合中接头的3’末端与所述DNA片段5’末端相连。
一种 dna 文库构建方法

[发明专利]二代测序文库构建中接头连接效率的评估方法-CN202010656135.9在审
发明人：曹学彬;张燕军;黄秀;付亮剑 -专利权人：烟台海利士科技有限公司
申请日： 2020-07-09 - 公布日： 2020-09-15 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明公开了二代测序文库构建中接头连接效率的评估方法，该方法通过构建两端含接头序列的片段，该片段为L1‑A‑L2，其中，L1、L2为接头，A为DNA片段；检测获取上述构建的L1‑A‑L2的拷贝数；以L1、L2为接头对A片段进行文库构建，文库构建完成后，对文库构建的产物进行纯化回收得到文库a；以L1‑A‑L2为标准品采用qPCR法对文库a进行绝对定量，检测获取文库a中总A片段的分子个数n以及文库a中L1‑A‑L2的分子个数m，文库a中两端连接有接头的分子个数占总A片段分子个数的百分比即为文库构建中接头的连接效率。该方法能够准确获得二代测序文库构建中接头连接的具体百分比。
二代序文构建接头连接效率评估方法

[发明专利]一种用于Small RNA二代测序建库的接头处理方法-CN201410584267.X有效
发明人：赵鑫;周鑫兰;侯勇;吴逵 -专利权人：深圳华大基因股份有限公司
申请日： 2014-10-27 - 公布日： 2020-03-24 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本申请公开了一种应用于Small RNA二代测序建库的接头处理方法及其应用。本申请的接头处理方法包括：A.分别在Small RNA片段两端添加SE文库3’接头和5’接头；B.将连接好接头的Small RNA片段反转录成cDNA；C.在反转录的cDNA片段的3’末端加“A”；D.在步骤C的cDNA片段上连接PEI的“Y”型接头。本申请的接头处理方法，在SE接头基础上添加PEI接头，使构建的Small RNA文库测序时能使用PEI测序试剂，解决了SE文库和PEI文库测序试剂不相容问题，方便了Small RNA的测序，为基于Small
一种用于 small rna 二代测序建库接头处理方法

[发明专利]微量起始DNA的高通量测序文库构建方法及其所构建的高通量测序文库-CN201510369505.X有效
发明人：胡政;刘运超;王大伟;朱海浩;李明洲 -专利权人：天津诺禾医学检验所有限公司
申请日： 2015-06-29 - 公布日： 2017-04-12 - 主分类号： C40B40/06 文献下载
摘要：该构建方法包括对样本DNA进行物理打断，得到片段化DNA；对片段化DNA进行末端修复及加A，得到修复DNA；利用连接增强剂对修复DNA进行接头连接，得到带接头片段；以及对带接头片段进行扩增，得到高通量测序文库通过在接头连接的步骤中添加具有连接增强作用的DMSO、乙醇、乙二醇或甘油等小分子物质，利用这些小分子物质刺激连接酶的活性中心区域来增强连接活性，提高接头连接效率，使更多修复DNA片段连上接头序列，从而提高了微量起始量样本的测序成功率
微量起始 dna 通量序文构建方法及其

[发明专利]一种一次制备多个DNA大片段插入双末端测序文库的方法-CN201510430638.3有效
发明人：常玉晓;赵胜;刘可 -专利权人：中国农业科学院深圳农业基因组研究所
申请日： 2015-07-21 - 公布日： 2017-09-05 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明提供了一种一次制备多个DNA大片段插入双末端测序文库的方法，包括以下步骤将待测DNA打断后进行生物素接头标记处理；将生物素标记的DNA片段分选成N个不同大小的DNA片段，其中，10≤N≤12；将所述N个不同大小的DNA片段分别进行环化处理得到环状DNA，然后清除未环化的线性DNA片段，将所述环状DNA打断后连接上带有不同索引序列的Truseq接头；将带有Truseq接头的不同长度的DNA片段混合并与链霉亲和素磁珠反应，富集带有生物素标记的DNA片段；PCR扩增所述带有生物素标记的DNA片段并测序。
一种一次制备 dna 片段插入末端序文方法

[发明专利]长片段核酸测序的方法-CN201880098533.4在审
发明人：何琳;廖莎;徐崇钧;章文蔚;陈奥 -专利权人：深圳华大生命科学研究院
申请日： 2018-12-07 - 公布日： 2021-05-14 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明公开一种长片段核酸测序的方法。利用含有长插入片段以及第一测序接头和第二测序接头的核酸分子，构建测序文库，分段测序，获得长插入片段的核酸序列。
片段核酸方法

[发明专利]一种构建DNA大片段文库的方法及其应用-CN201611046464.1有效
发明人：梁峻彬;李小林;张介中;韩典昂;刘三阳;玄兆伶;李大为;陈重建 -专利权人：浙江安诺优达生物科技有限公司;安诺优达基因科技（北京）有限公司;安诺优达（义乌）医学检验有限公司
申请日： 2016-11-23 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明涉及一种DNA大片段文库的构建方法及其应用。本发明提供的DNA大片段文库的构建方法用于DNA大片段文库的构建，包括将DNA大片段的两端加上具有脱氧尿苷的接头，通过酶的消化得到具有黏性末端的大片段DNA；以及将具有黏性末端的大片段DNA进行环化，得到环化大片段通过本发明的文库构建方法可以提高大片段文库的有效数据率。此外本发明通过对接头进行特殊设计，还可以为构建的大片段DNA文库提供质控点。
一种构建 dna 片段文库方法及其应用

[发明专利]测序文库的构建方法及用于测序文库构建的试剂盒-CN201410606175.7在审
发明人：曹志生;王大伟;蒋智;李明洲;刘运超;朱海浩 -专利权人：天津诺禾致源生物信息科技有限公司
申请日： 2014-10-31 - 公布日： 2015-01-28 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：构建方法包括：对待测样本的基因组DNA进行酶切，得到具有粘性末端的酶切片段；在酶切片段的两端加P1接头，得到带P1接头片段；对带P1接头片段进行片段化，得到目标大小片段；以及在目标大小片段的两端加P2接头本发明通过识别序列中包括可变序列的酶进行酶切，使得固定接头碱基的类型和数量来实现不同捕获标记数量的效果，提高了灵活性。
序文构建方法用于试剂盒

[发明专利]使用AFLP的高通量物理作图-CN200780025146.X有效
发明人： M·J·T·范艾克;T·P·耶瑟 -专利权人：凯津公司
申请日： 2007-07-10 - 公布日： 2009-07-15 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及鉴定和检测分子标记的高通量方法，其中产生限制性片段并连接适当的包含(样品特异性的)鉴定因子的接头。该接头连接的限制性片段可用在其3’端带有选择性核苷酸的与接头相容的引物选择性扩增。扩增的接头连接的限制性片段至少部分地通过高通量测序方法进行测序，该限制性片段的序列部分和样品特异性鉴定因子一起用作分子标记。
使用 aflp 通量物理作图

[发明专利]一种环化文库的快速构建方法及成环接头-CN202080107392.5在审
发明人：于友钱;傅书锦;耿春雨;梁鑫明 -专利权人：深圳华大智造科技股份有限公司
申请日： 2020-12-29 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体公开了一种环化文库构建方法及成环接头。所述方法包括：1)将DNA序列打断成片段；2)使所述打断的片段的两端形成3’端突出；3)利用成环接头将所述3’端突出的片段环化形成环状文库，所述成环接头为不完全配对且两端具有5’端突出的双链，所述成环接头的5’端突出与所述打断的片段的3’端突出互补。本发明通过对打断DNA片段的末修复和加A处理形成末端的A粘性末端，在与特别设计的接头T粘性末端互补形成环化结构，在连接酶的作用下完成缝隙处的连接。
一种环化文库快速构建方法接头

[发明专利]基于AFLP和高通量测序的对分子标记的高通量检测-CN200780010416.X无效
发明人： M·J·T·范艾吉克;R·C·J·赫格思 -专利权人：凯津公司
申请日： 2007-04-04 - 公布日： 2009-05-13 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种鉴别和检测分子标记的高通量方法，其中限制性片段被生成，合适的包含(样品特异性)鉴别子的接头被连接。与接头相连的限制性片段可通过在3’端携带选择性核苷酸的、接头兼容性引物进行选择性扩增。经扩增的与接头相连的限制性片段经高通量测序方法(至少部分)测序，限制性片段的序列部分和样品特异性鉴别子作为分子标记。该高通量方法将AFLP(扩增片段长度多态性)方法和高通量测序技术结合起来。
基于 aflp 通量分子标记检测

[发明专利]一种快速高效的构建二代测序文库的试剂盒-CN202011124075.2在审
发明人：曾志鹏;张鹏;邢宽;谢珍;何志健;何贵伦;安雪茹 -专利权人：南京实践医学检验有限公司
申请日： 2020-10-20 - 公布日： 2021-01-22 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速高效的构建二代测序文库的试剂盒，包括R1、R2和R3，R1包括DNA片段化末端修复加尾缓冲液、DNA片段化酶和末端修复加尾酶，R2包括连接缓冲液、连接酶和接头，R3包括扩增酶、USER该试剂盒采用序列非特异性的核酸酶，可以在DNA上随机打断；在片段化、末端修复和加尾中添加非离子型去污剂做为增强剂，促进加尾酶的活性，使更多的末端修复片段加上A碱基，提高了片段的利用率；接头使用U型接头，减少了接头二聚体的产生，使更多的接头用于连接DNA片段，提高了文库的转化率。
一种快速高效构建二代序文试剂盒

[发明专利]检测融合基因的方法-CN202111013330.0在审
发明人：肖莉;廖端芳;李凯 -专利权人：廖端芳
申请日： 2021-08-31 - 公布日： 2022-02-08 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：本发明利用对线性核酸片段的末端进行修复使其形成平末端，同时进行加A尾反应加高通量测序接头引物序列，对添加了一种接头的线性核酸片段采用5端带有高通量测序另一接头的针对病毒序列的引物组合进行多循环单向引物延伸，和随后采用接头一与接头二的成对引物的双向核酸扩增制备高通量测序文库，达到富集病毒基因与宿主基因所形成的融合基因片段的效果。因此，新的策略对序列未知的融合基因可以进行富集，富集后的核酸片段可以达到高通量测序的可靠性范围。
检测融合基因方法

[发明专利]风力涡轮机转子叶片接头-CN201110179803.4有效
发明人： D·J·库特斯特拉 -专利权人：通用电气公司
申请日： 2011-06-16 - 公布日： 2011-12-21 - 主分类号： F03D1/06 文献下载
摘要：本发明涉及一种风力涡轮机转子叶片接头。具体而言，公开了一种用于连接转子叶片(22)中的第一叶片段(100)与第二叶片段(100)的叶片接头(125)，第一叶片段(100)和第二叶片段(100)各自具有空气动力轮廓。叶片接头(125)包括第一接头段(130)和第二接头段(130)，其各自具有外表面(132)、内表面(134)以及其之间的厚度(136)。各接头段(130)的外表面(132)具有空气动力轮廓。第一接头段(130)和第二接头段(130)各自还具有接头对接端(142)、叶片对接端(144)以及其之间的长度(146)。第一接头段(130)的接头对接端(142)以及第二接头段(130)的接头对接端(142)设置为用以将第一接头段(130)和第二接头段(130)联接在一起。
风力涡轮机转子叶片接头

[发明专利]从两端对多核苷酸片段进行测序的方法-CN202080107855.8在审
发明人：大卫·陶西格;伊斯雷尔·斯坦菲尔德;N·M·桑帕斯;B·J·皮特 -专利权人：安捷伦科技有限公司
申请日： 2020-12-10 - 公布日： 2023-09-01 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明涉及接头标记片段的测序文库的制备、测序和分析，其中所述片段相对于测序接头具有不同的方向。
两端多核苷酸片段进行方法