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[发明专利]一种通用型安全简单高效的植物花粉萌发方法及应用-CN202111346744.5在审
发明人：陈新龙;何光华;杨广;李玲依;韦佳欣;张梓睿;刘一帆 -专利权人：西南大学
申请日： 2021-11-15 - 公布日： 2022-01-11 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明提供一种通用型安全简单高效的植物花粉萌发方法，该方法中采用了一种可以实现多种植物花粉体外萌发的花粉萌发培养基，花粉萌发培养基由如下成分组成：10～20％(w/v)的蔗糖、0.7～1.2％(w/v)的琼脂粉、0.01～0.02％(w/v)的KH2PO4或0.02～0.03％(w/v)的NH4H2PO4、0.001～0.5％(w/v)的Na2B8O13·4H2O、0.02～0.1％(w/v)的MgSO4·7H2O、0.02～0.05％(w/v)的CaCl2、pH为7.0～8.5的纯水，花粉萌发培养基的配制过程中无需调节pH值，花粉萌发培养基为固体培养基，培养条件为在80％以上的相对湿度和20～28℃温度下避光培养，培养时间为3～24h。本发明克服了现有技术中存在的诸多问题，为研究花粉活力、花粉管伸长、花粉管离子通道、花粉管信号转导及花粉精细胞核和营养细胞核特征等方面提供了新的技术。
一种通用型安全简单高效植物花粉萌发方法应用

[发明专利]一种硼酸盐的新用途-CN202111348268.0在审
发明人：陈新龙;何光华;徐海玲;王孟轩 -专利权人：西南大学
申请日： 2021-11-15 - 公布日： 2022-01-11 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明提供一种硼酸盐的新用途，具体硼酸盐为四水八硼酸二钠，新用途为首次将四水八硼酸二钠作为植物花粉萌发促进剂应用于植物花粉离体培养方法中。本发明提供的硼酸盐的新用途，具体为提供一种安全、高效、适用性广和快速溶解的花粉萌发促进剂，用四水八硼酸二钠代替硼酸来提供硼元素，克服了现有花粉萌发技术中存在的多个不足，拓宽了四水八硼酸二钠在植物发育中的应用范围，为实现安全快速检测花粉活力、加速植物新品种育种进程等方面提供了新方法。
一种硼酸盐用途

[发明专利]一种提高花青素含量的花楸干细胞、培养基及培养方法-CN202111211460.5在审
发明人：张宗申;郝宽胜;刘文 -专利权人：大连工业大学
申请日： 2021-10-18 - 公布日： 2022-01-11 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：一种提高花青素含量的花楸干细胞、培养基及培养方法，培养基可以应用在花楸干细胞合成花青素培养中，培养方法包括以下具体步骤：(1)干细胞组织的制备；(2)花青素的诱导和积累。本发明利用魔芋制成天然培养基，利用魔芋本身的营养物质为所要培养的干细胞提供大量元素、微量元素及碳源；魔芋所含的物质对于干细胞诱导具有促进作用，3‑5d外植体出现膨大，7‑10d干细胞明显增加；魔芋培养基还具有促进花青素合成的作用，花青素含量明显提高；另外，利用魔芋葡甘聚糖的特性使其自身具有良好的凝固性减少琼脂的加入，节约了培养成本，天然的培养基也使其培养的目标产物更加安全可信。
一种提高花青素含量干细胞培养基培养方法

[发明专利]一种诱导彩色马蹄莲产生愈伤组织的培养基及其在建立彩色马蹄莲再生体系中的应用-CN201910992841.8有效
发明人：郑玉红;顾永华;韩福贵;杨军;傅力;束晓春 -专利权人：江苏省中国科学院植物研究所
申请日： 2019-10-18 - 公布日： 2022-01-11 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明提供了一种诱导彩色马蹄莲产生愈伤组织的培养基及其在建立彩色马蹄莲再生体系中的应用，涉及植物组培快繁技术领域。本发明所述培养基以MS培养基为基本培养基，还包括：蔗糖30g/L、琼脂7.5g/L、6‑BA 2.4～2.8mg/L、NAA 0.5～1.0mg/L和碳纳米管0.5～1.5mg/L。本发明所述培养基可以诱导彩色马蹄莲产生愈伤组织，由愈伤组织诱导出丛生芽，建立起彩色马蹄的再生体系，约需要9～10个月的时间；经由愈伤组织诱导出的丛生芽数量多，芽生长速度快，可大幅度的提高其繁殖系数，同时加快了其繁殖的速度，极大的降低彩色马蹄莲组培苗的成本。
一种诱导彩色马蹄莲产生组织培养基及其建立再生体系中的应用

[发明专利]一种制备苋菜原生质体的方法及其应用-CN202010640127.5在审
发明人：李大勇;刘雪;张彬 -专利权人：北京市农林科学院
申请日： 2020-07-06 - 公布日： 2022-01-07 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明提供了一种制备苋菜原生质体的方法，其以苋菜无菌苗的幼嫩真叶为材料，酶解后过滤时挤压滤渣，制备得到大量形态正常、杂质少、无破损的苋菜原生质体，能够满足后续转化、亚细胞定位等的实验要求，可进一步为双荧光互补，体细胞杂交、遗传转化等基础研究和应用研究提供重要的技术支持，以促进苋菜遗传育种和基础研究的发展。
一种制备苋菜原生质体方法及其应用

[发明专利]一种快速去除白杨或桉树细胞壁的酶解方法和应用-CN202111326815.5在审
发明人：夏新莉;王厚领;刘晓;牛梦雪;于晓倩;张涵 -专利权人：北京林业大学
申请日： 2021-11-10 - 公布日： 2022-01-07 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明涉及一种快速去除白杨或桉树细胞壁的酶解方法，利用特定配置的酶解溶液,将通过质壁分离预处理的白杨或桉树叶片,放入酶解溶液中,室温，处理,就能够获得完整度为90％的白杨或桉树原生质体。本发明通过快速去除白杨、桉树细胞壁,对于通过基因工程领域培育优良白杨、桉树新品种具有极大的应用价值。
一种快速去除白杨桉树细胞壁方法应用

[发明专利]一种大规模继代培养及规模放大培养天山雪莲细胞的工艺-CN202111348829.7在审
发明人：张泽;李孙华;刘毅;姚雪;张妮 -专利权人：安赛搏（重庆）生物技术有限公司
申请日： 2021-11-15 - 公布日： 2021-12-31 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开一种大规模继代培养及规模放大培养天山雪莲细胞的工艺，包括天山雪莲细胞系筛选:采用天然雪莲试管苗进行外植体诱导，获得愈伤组织，以MS培养基作为筛选培养基对固体细胞进行逐代筛选，培养条件为22～25℃的无光照培养，筛选出生长快速的白色细胞系；摇瓶规模继代培养:挑选生长状态良好、没有灰色褐化、质地疏松的固体细胞接种到含有MS培养基的培养液摇瓶中继代培养；培养条件为22～25℃的无光照培养；摇瓶转反应器继代培养：将摇瓶中细胞转接到反应器中进行继代培养，培养条件为23～25℃的无光照培养，通气保持反应器中的流量计通气读数在60～80L/h；解决细胞在放大培养的过程中对培养条件的波动的耐受力低，容易出现褐化现象的问题。
一种大规模培养规模放大天山雪莲细胞工艺

[发明专利]石斛来源外泌体样囊泡及其制备和在改善脱发症中的应用-CN202111235061.2在审
发明人：朱云;周秋娜;金炫延;金荣熙;申彦晟;金延埈 -专利权人：科丝美诗（中国）化妆品有限公司
申请日： 2021-10-22 - 公布日： 2021-12-28 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了石斛来源外泌体样囊泡及其制备和在改善脱发症中的应用。石斛来源外泌体样囊泡预防、改善脱发症的效果明显高于石斛提取物。该外泌体样囊泡作为一种天然的纳米级囊泡结构，具有良好的生物相容性和口服安全性，并可以跨越生物学屏障，相对于一般植物提取物，对活性成分的传递具有更高促进作用，植物来源外泌体样囊泡可以更好的穿过皮肤屏障作用于毛囊干细胞。此外，本文采用差速离心法结合密度梯度离心从石斛中获得石斛外泌体样囊泡，进一步提高了纯度，增加了其预防、改善脱发症的效果。
石斛来源外泌体样囊泡及其制备改善脱发中的应用

[发明专利]一种分离八仙花萼片着色细胞原生质体的方法-CN202010298365.2有效
发明人：袁素霞;刘春;张盖天;杨锁宁 -专利权人：中国农业科学院蔬菜花卉研究所
申请日： 2020-04-16 - 公布日： 2021-12-28 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明涉及原生质体分离技术领域，公开了一种分离八仙花萼片着色细胞原生质体的方法，包括处理八仙花萼片、酶解、纯化和储存。本发明专门针对八仙花萼片的组织质密紧实、酶液不易浸入的特点，利用温和的酶解反应，在不损害八仙花萼片的细胞活性的条件下有效的提取出了八仙花萼片着色细胞原生质体，并且能清晰准确的辨别解离出的细胞颜色，为有针对性的对八仙花萼片中的特定着色细胞原生质体的基因水平、蛋白水平和代谢水平的研究奠定了基础。
一种分离八仙花萼片着色细胞原生质体方法

[发明专利]改造的藻油体、稳定藻油体及增强藻油体抗氧化性的方法-CN201310513558.5有效
发明人：于钰;许骏;卫玮 -专利权人：丰益（上海）生物技术研发中心有限公司
申请日： 2013-10-25 - 公布日： 2021-12-24 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本申请涉及含藻油体的组合物、改造的藻油体、稳定藻油体的方法以及增强藻油体的抗氧化性和/或防渗油的方法。尤其是，公开了含有藻油体、磷脂和油体蛋白的改造的藻油体，通过将油体蛋白和磷脂加入藻油体中来增强藻油体稳定性的方法，以及在藻油体中加入油体蛋白来增加其抗氧化性的方法。
改造藻油体稳定增强藻油体抗氧化方法

[发明专利]一种栀子苷的生产方法-CN201811577469.6有效
发明人：陈建荣;刘芳;唐映红;唐伟卓;赵晨曦 -专利权人：长沙学院
申请日： 2018-12-20 - 公布日： 2021-12-03 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：栀子中含多余种生物活性物质，国内外公认的栀子有效成分为环烯醚萜类物质，其中含量最高的为栀子苷，又称为京尼平苷。由于栀子是栀子果实是栀子苷的唯一天然获得来源，栀子苷的获取完全依赖于栀子果实，通过植物细胞工程筛选产栀子细胞进行规模化培养是解决栀子来源短缺的有效途径之一。目前还未见有通过细胞培养生产栀子苷的报道。本发明有效的解决了栀子细胞生长与栀子苷含量下降之间的矛盾，可以在短期内以内获得富含栀子苷的新鲜细胞，培养所得细胞的栀子苷含量是种子细胞中栀子苷含量的数倍，且不受自然条件的影响和限制。
一种栀子生产方法

[发明专利]山核桃原生质体的制备及瞬时转化体系的建立-CN202111124221.6在审
发明人：沈锦波;易芳;胡帅;高燕丽;张启香;黄坚钦 -专利权人：浙江农林大学
申请日： 2021-09-24 - 公布日： 2021-11-30 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开山核桃原生质体的制备及瞬时转化体系的建立。使用3.0‑3.5％纤维素酶R10，0.7‑1.0％离析酶R‑10，0.3‑0.5％Driselase和40mM MES酶组合将临安山核桃愈伤组织以及使用1.0‑1.5％纤维素酶RS、0.7‑1.0％离析酶R‑10和0.5‑0.8％Pectinase将美国山核桃愈伤组织酶解成原生质体，所得到的原生质体经分离、纯化和预处理后，利用PEG‑Ca2+将外源基因高效转入临安山核桃原生质体进行瞬时表达的方法。本发明提供一种山核桃原生质体分离纯化以及瞬时转化的方法，进一步解决了山核桃基因在其他植物中异源表达的问题。
山核桃原生质体制备瞬时转化体系建立

[发明专利]一种枣树原生质体的高效分离方法及其应用-CN202111209718.8在审
发明人：刘孟军;王立新;王林霞;刘志国;张梦玲;赵若雨 -专利权人：河北农业大学
申请日： 2021-10-18 - 公布日： 2021-11-30 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明属于植物原生质体培养技术领域，本发明提供了一种枣树原生质体的高效分离方法及其应用。本发明以枣树的胚性悬浮细胞系为研究材料，通过酶解得到原生质体，纯化后得到了数量多且活性高的原生质体，并利用钙离子染料对原生质体内Ca2+浓度进行了探究。本发明方法简单、成本低，获得的原生质体数量多且活性高，为利用其研究Ca2+信号途径奠定了基础。
一种枣树原生质体高效分离方法及其应用

[发明专利]一种提高马铃薯扩繁工艺效率的培养基及培养方法-CN202011075067.3有效
发明人：王庆彬;卢洁春;彭春娥;刘之广;张民;孔波 -专利权人：山东宇泰生物种业有限公司;山东蓬勃生物科技有限公司
申请日： 2020-10-09 - 公布日： 2021-11-23 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明提供了一种提高马铃薯扩繁工艺效率的培养基及培养方法，本发明涉及的培养基与现有技术中的MS培养基组分相比，不同之处在于氮素含量为MS培养基中氮素含量的0.25～0.5倍，硝酸钾的减少量用硫酸钾补充，其他非氮素组分含量与MS培养基中的非氮素组分含量相同；本发明涉及的培养方法为，将马铃薯组培苗茎段接种到上述培养基上，在温度22～26℃、光周期14‑18h、光照强度2400～3000lux条件下培养，制得马铃薯组培苗；有效降低了组培苗的繁殖成本，提高了组培苗剪切、转接的工作效率；显著提高了马铃薯组培扩繁工艺效率，所产生的技术效果是本领域技术人员预料不到的。
一种提高马铃薯工艺效率培养基培养方法

[发明专利]一种樟子松针叶原生质体的制备方法及应用-CN201911139202.3有效
发明人：李伟;朱茜雅;韩方旭;钮世辉 -专利权人：北京林业大学
申请日： 2019-11-20 - 公布日： 2021-11-23 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种制备樟子松针叶原生质体的方法，属于物细胞生物技术领域。所述方法包括（1）获得墇子松幼苗针叶，获得所述针叶叶条；（2）将所述叶条进行预处理；（3）将叶条放入酶解液中进行酶解；（4）将叶条从酶解液中取出，放入W5'溶液中，室温、避光、振荡，使得原生质体释放至所述W5'溶液中；（5）将包含原生质体的W5'溶液转移至100μm的尼龙网上进行过滤；（6）将包含原生质体的W5'溶液置于冰上30min，吸取上清液，加入预冷的W5'溶液中重悬原生质体。利用本发明，可获得较多数量并且状态良好、耐受性强的原生质体。
一种松针原生质体制备方法应用